Отчет
о выполнении научно-исследовательских работ за 2013 год
по заданию 08.04.01.05 «Разработать методическое пособие по диагностике и профилактике нарушений антенатального и интранатального происхождения у телят»

РАСХН ГНУ
Всероссийский научно-исследовательский
ветеринарный институт патологии,
фармакологии и терапии
Отдел микробиологии,
вирусологии и иммунологии

Директор института, д.в.н.,
профессор, академик РАСХН
С.В.Шабунин

Зам директора института
по научной работе, д.б.н., профессор
М.И.Рецкий

Ответственный исполнитель:
зав. отделом, профессор,
член-корреспондент РАСХН
А.Г.Шахов

Исполнители:
вед.науч.сотр., к.вет.н.
Л.Ю.Сашнина,
науч.сотр. Д.В.Федосов,
аспирант Т.А.Ерина,
ст.лаборант О.Г.Бородина,
ст.лаборант Н.В.Чурсина

Соисполнители:
Зав. лаб. клинико-функциональной
диагностики, к.биол.н.
Ю.Н.Алехин,
ст.лаборант Г.Б.Алехина,
мл.науч.сотр. О.В.Пригородова,
зав.лаб.биохимии, к.вет.н.
В.И.Моргунова

Воронеж - 2013г.

В выполнении научных исследований по данному этапу принимали участие 6 научных сотрудников, в том числе 1 член-корреспондент РАСХН, 1 доктор ветеринарных наук, 3 кандидата наук.

Цель исследований: апробировать средства и методы профилактики морфо-функциональных нарушений антенатального и интранатального происхождения у телят с целью повышения эффективности мер борьбы с желудочно-кишечными и респираторными болезнями и подготовить для рассмотрения на заседании ученого совета и секции «Патология, фармакология и терапия» Россельхозакадемии проект «Методического пособия по диагностике и профилактике нарушений антенатального и интранатального происхождения у телят».

Новизна исследований состоит в том, что впервые изучены методы комплексной профилактики морфо-функциональных нарушений антенатального и интранатального происхождения у телят для коррекции дисбиоза толстого отдела кишечника и верхних дыхательных путей, а так же иммунного статуса с применением пробиотиков, иммунокорегирующих средств, физических методов воздействия на организм и их сочетаний. Результаты полученных исследований вошли в разработанное «Методическое пособие по диагностике и профилактике нарушений антенатального и интранатального происхождения у телят».

Материал и методы.Материалом для исследования служили цельная кровь, сыворотки крови, молозиво (молоко), патологический материал от телят (носовые смывы, фекалии) и коров (маточно-вагинальные выделения).

Исследования проведены на базе отделов микробиологии, вирусологии и иммунологии, физико-химических методов исследований, лаборатории клинико-функциональной диагностики, а также в условиях молочно-товарной фермы «Высокое» ООО «ЭкоНиваАгро» Лискинского района Воронежской области.

Для выполнения цели исследований было проведено 2 опыта:

- задачей первого являлась коррекция микробного пейзажа половых путей коров-матерей, желудочно-кишечного и респираторного тракта новорожденных телят;

- задачей второго – коррекция иммунного статуса телят группы риска.

Для первого опыта было подобрано 36 коров красно-пёстрой породы, с молочной продуктивностью в предыдущую лактацию 5100-5400кг. Способ содержания животных в сухостойный период – групповой беспривязный на глубокой соломенной подстилке. Группы формировали с учетом срока ожидаемого отела. За 10-15 дней до отела животных перевели в предродовую секцию, а при появлении предвестников родов в родовую секцию, где проходил отел.

Коров разделили на 3 группы: 1-я (контрольная), 2-я и 3-я (опытные). Коровам контрольной группы (n=12) препараты не применяли. Животным второй (первая опытная) группы (n=12) ежедневно с интервалом 24 часа до отела, интравагинально применяли мультипробиотик «Симбитер-2» с помощью шприца Жанэ и гинекологической пипетки (от 6 до 23 введений), третьей (вторая опытная) (n=12) – интравагинально по аналогичной схеме препарат «Гипролам» (от 7 до 30 введений). За животными вели клинические наблюдения и после отела регистрировали послеродовые патологии.

Для второго опыта было подобрано 5 групп по 5-6 новорожденных телят с синдромом гипотрофии или интранатальной асфиксии.

Животным 1-й группы вводили per os комплексный пробиотик «Пролам» один раз в день в течение 7-ми суток; второй – подкожно иммуномодулирующие средство «Иммунофан» однократно через день (три введения); третьей – проводили надвенное облучение крови по 5 минут с помощью лазерно-излучающей головки КЛО-4 (0,63нм, красный спектр) с максимальной мощностью излучения до 30 мВт из расчета 10 процедур с интервалом в один день; четвертой – одновременно пробиотик и иммуномодулирующее средство (те же, что в 1-ой и 2-ой группах); пятая группа – интактные животные.

Серологические исследования проводили согласно утвержденным методикам и наставлениям к соответствующим диагностическим наборам в реакциях ИФА. Учет результатов иммуноферментного анализа проводили на спектрофотометре с вертикальным ходом луча «Униплан-ТМ».

Молекулярно-генетические исследования проводили методом ПЦР с применением соответствующих утвержденных тест-систем, амплификацию ДНК – в программируемом термостате «Терцик ТПЧ-ПЦР01». Для регистрации продуктов ПЦР использовали метод электрофоретического разделения продуктов амплификации в агарозном геле.

Уровень экспрессии генов рецепторов и цитокинов, участвующих в иммунном ответе (Тул-подобный рецептор-2, Тул-подобный рецептор-4, интерлейкин-1, интерлейкин-2, интерлейкин-4, интерлейкин-8, интерлейкин-10, интерлейкин-12, фактор некроза опухоли α, γ-интерферон, трансформирующий фактор рост), определяли в цельной крови после суточной стимуляции убитыми культурами Staphylococcus aureus и Salmonella dublin по модифицированной методике (Randy E. Sacco с соавт., 2012). Из проб цельной крови животных выделяли общую РНК, которую подвергали обратной транскрипции. Образовавшуюся кДНК в концентрации 200мкг/мл использовали в ПЦР с праймерами, специфичными для искомых генов. Специфику реакции проверяли электрофоретическим разделением продуктов реакции. Уровень экспрессии оценивали при помощи амплификатора ДТ-96.

Количественное определение цитокинов в сыворотке проводили иммунологическим методом, согласно утвержденным методикам и наставлениям к соответствующим диагностическим наборам в реакциях ИФА.

Бактериологические исследования молозива, маточно-вагинальных выделений от коров, носовых смывов, фекалий от телят проводили общепринятыми классическими методами согласно утвержденным наставлениям.

Показатели неспецифической резистентности: гемолитическую активность комплемента, бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови, фагоцитарную активность лейкоцитов, фагоцитарное число и фагоцитарный индекс определяли в соответствии с «Методическими рекомендациями по оценке и коррекции неспецифической резистентности животных» (2005).

Результаты исследований.

Результаты исследований показали, что коровам контрольной группы в 50% случаев оказывали родовспоможение. Стадия выведения плода составила 120±30 минут. Одна корова после тяжелых родов и от неё теленок пали. От коров, у которых впоследствии регистрировали острый послеродовой гнойно-катаральный эндометрит, получили 2-х телят (18,2%) с синдромом гипотрофии первой степени тяжести, одного (9,1%) – с третьей степенью и одного (9,1%) – с синдромом интранатальной асфиксии. Остальные 7 телят (63,6%) родились нормотрофиками. Заболеваемость коров послеродовыми болезнями в контрольной группе составила 54,5%. У 6 коров зарегистрирован острый гнойно-катаральный эндометрит, у одной коровы – острая субинволюция матки.

От коров первой опытной группы («Симбитер-2») рождались телята-нормотрофики в 91,7% (11 голов) случаев. В первые часы жизни у одного теленка (8,3%) зарегистрировали интранатальную асфиксию с характерными клиническими признаками: синюшная окраска конъюнктивы, слизистой десен, языка, носовых зеркала и ходов, снижение мышечного тонуса, слабость физиологических рефлексов и нарушение внешнего дыхания.

Отел коров протекал без родовспоможения. Стадия выведения плода составила 30±10 минут. Заболеваемость коров послеродовыми болезнями отмечена у 10 (83,3%) животных. У них (количество введений препарата от 6 до 15 раз) регистрировали вторичную, острую субинволюцию матки, которая развилась после отделения последа и проявлялась на 5-7 сутки обильными выделениями из половых путей грязно-серого цвета жидких лохий с примесью кусков распадающихся карбункулов, значительным увеличением матки и ее атонией, угнетением животных и снижением молочной продуктивности. У коров (16,7%), которым вводили «Симбитер-2» 21-23 раза, патологий родовых путей не регистрировали.

От коров второй опытной группы («Гипролам») было получено 10 телят-нормотрофиков (83,4%), один с синдромом интранатальной асфиксии (8,3%) и один с синдромом гипотрофии третьей степени тяжести, которая проявлялась низкой массой тела (24кг), выраженным торможением физиологических рефлексов, склонностью к гипотермии, умеренной тахикардией и более частым, чем у нормотрофиков дыханием.

Отел коров протекал без родовспоможения. Стадия выведения плода составила 40±10 минут. Послеродовые патологии регистрировали у 2 коров (16,7 %), которым препарат вводили от 7 до 15 раз. Послед отделялся легко и значительно быстрее, чем у животных первой опытной и контрольной групп. У одной коровы на 8 сутки после отела диагностировали острый послеродовой гнойно-катаральный эндометрит (препарат вводили 15 раз) с характерными клиническими признаками: выделения серо-белого цвета жидкого экссудата слизисто-гнойной консистенции, без запаха, наложение грязно-серых выделений на седалищных буграх, в нижнем углу вульвы и на хвосте, гиперемия и отечность слизистой оболочки передней части влагалища и влагалищной части шейки матки, повышение температуры тела на 1-1,5˚С, угнетение общего состояния и снижение аппетита. У одной коровы регистрировали выпадение матки.

При исследовании микробного пейзажа родовых путей после отела у коров контрольной группы установлено снижение содержания лактобацилл в 8 раз, бифидумбактерий в 10,5 раза при повышении количества стрептококков группы С (в 8,8 раза), Enterococcus faecalis (в 4,8 раза), эшерихий (в 14,8 раза), бактерий рода Enterobacter (17,2 раза) и увеличении частоты их выделения. Кроме того от них изолировали золотистый стафилококк в 25,0% случаев (табл.1).

Таблица 1 - Микробный пейзаж половых путей коров контрольной группы

Виды микроорганизмов	Количество
	За 20 дней до отела	после отела
Лактобациллы	3,55±0,71*106	4,4±0,94*105
Бифидумбактерии	3,12±0,46*106	2,96±0,68*105
Corynebacterium	2,1±0,19*102	3,2±0,41*103
Staph.saprophyt.	7,33±0,12*105	4,11±0,81*105
Staph.epidermidis	2,35±0,25*105	2,1±0,17*104
Staph.aureus	н/в	2,1±0,03*104 (25,0%)
Strept.гр.С	5,04±0,45*105 (58,0%)	4,41±0,81*106 (58,0%)
Enteroc.faecalis	4,73±0,22*103 (50,0%)	2,25±0,85*104 (66,7%)
Strept.гем	4,82±0,38*105 (25,0%)	2,47±0,52*105 (50,0%)
Enterobacter	1,8±0,14*103 (16,7%)	3,1±,02*104 (25,0%)
E.coli	3,36±0,74 *104 (41,7%)	4,96±0,65*105 (58,0%)

Примечание: н/в – не выделяли.

У животных, которым интравагинально применяли «Симбитер-2», после отела регистрировали снижение содержания бифидумбактерий в 1,7 раза и повышение количества Enterococcus faecalis в 11,9 раз. При этом у них увеличилось содержание сапрофитного стафилококка в 9,3 раза, уменьшился уровень гемолитических стрептококков в 2 раза и не изолировали эшерихии и бактерии рода Enterobacter, которые обнаруживали до применения препарата в 16,7% и 8,3% соответственно (табл.2).

Таблица 2 - Микробный пейзаж половых путей коров, которым применяли «Симбитер-2»

Виды микроорганизмов	Количество
	до применения	после отела
Лактобациллы	4,37±0,83*107	3,84±0,1*107
Бифидумбактерии	6,12±0,69*107	3,5±0,73*107
Corynebacterium	3,1±0,17*102	4,6±0,23*102
Staph.epidermidis	4,13±0,16*104	3,59±0,21*104
Staph.saprophyt	4,18±0,61*104	3,93±0,32*105
Staph.aureus	н /в	н/в
Strept.гр.С	3,77±0,69*104 (25,0%)	3,23±0,65*104 (33,3%)
Strept.гем	9,1±0,01*103 (8,0%)	3,1±0,01*103 (8,0%)
Enteroc.faecalis	3,65±0,86*102 (16,7%)	4,35±0,73*103 (25,0%)
Enterobacter	5,95±0,85*102 (8,3%)	н/в
E.coli	2,95±0,25*103 (16,7%)	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

При исследовании микробного пейзажа родовых путей у коров после интравагинального применения «Гипролама» установлено повышение содержания лактобацилл в 1,2 раза, бифидумбактерий в 1,3 раза, стафилококков: сапрофитного в 1,7 и эпидермального в 7,9 раза, снижение количества стрептококков группы С в 1,2 раза, эшерихий в 1,6 раза. В этот период от животных изолировали Enterococcus faecalis и гемолитические стрептококки в 8,3% случаев (табл.3).

Таблица 3 - Микробный пейзаж половых путей коров, которым применяли «Гипролам»

Виды микроорганизмов	Количество
	до применения	после отела
Лактобациллы	3,43±0,59*107	4,34±0,61*107
Бифидумбактерии	4,41±0,72*107	5,57±0,86*107
Corynebacterium	1,8±0,02*102	1,6±0,01*102
Staph.saprophyt.	3,35±0,49*105	5,8±0,17*105
Staph.epidermidis	4,36±0,02*103 (25,0%)	3,43±0,74 *104 (50,0%)
Staph.aureus	н/в	н/в
Strept.гр.С	3,15±0,16*104 (16,7%)	2,67±0,58 *104 (25,0%)
Enteroc.faecalis	н/в	4,3±0,01*102 (8,3%)
Strept.гем	н/в	8,1±0,01*103 (8,3%)
Enterobacter	н/в	н/в
E.coli	3,27±0,89*102 (25,0%)	2,1±0,01*102 (8,3%)

Примечание: н/в – не выделяли.

Проведенными исследованиями установлено, что у животных, которым применяли «Симбитер-2» по сравнению с контролем, было выше содержание лактобацилл (в 87,3 раза), бифидумбактерий (в 118,2 раза), ниже уровень стрептококков группы С в 136,5 раза, Enterococcus faecalis в 75,2 раза, гемолитических стрептококков в 79,7 раза соответственно и от них не изолировали золотистый стафилококк, эшерихий и бактерий рода Enterobacter (табл.2).

У животных, которым применяли «Гипролам» после отела количество лактобацилл и бифидумбактерий было выше в 98,6 и 188,2 раза соответственно по сравнению с контролем. От них не выделяли золотистый стафилококк и бактерии рода Enterobacter. У животных было более низкое содержание стрептококков группы С в 165,2 раза, Enterococcus faecalis в 52,3 раза, гемолитических стрептококков в 30,5 раза и эшерихий в 2,4*103 раза (табл.3). По сравнению с животными, которым применяли «Симбитер-2», у них было выше количество бифидумбактерий в 1,6 раза и ниже уровень гемолитических стрептококков в 10,1 раза.

При изучении микрофлоры молозива в первые сутки после отела установлено, что у коров, которым применяли «Симбитер-2», оно по сравнению с контролем содержало больше лактобацилл и бифидумбактерий в 6,7 и 17,5 раза соответственно меньше в 1,5 раза Staph.epidermidis. Из него реже и в меньшей степени (в 11 раз) выделяли золотистый стафилококк, не изолировали стрептококки группы Д и эшерихии, которые обнаруживали у коров контрольной группы в 25,0 и 8,3% случаев.

В молозиве животных, которым применяли «Гипролам», количество лактобацилл и бифидумбактерий было выше, чем в контроле в 9,8 и 29,2 раза, а Staph.epidermidis ниже в 6,6 раза, не выделяли золотистый стафилококк, стрептококки группы Д и эшерихии. У них по сравнению с животными, которым применяли «Симбитер-2», содержание лактобацилл и бифидумбактерий было выше в 1,5 и 1,7 раза соответственно, ниже количество Staph.epidermidis в 4,3 раза и не изолировали золотистый стафилококк (табл.4).

Таблица 4 - Микробный пейзаж молозива от коров

Наименование микроорганизмов	Количество
	группы
	контроль	«Симбитер-2»	«Гипролам»
Лактобациллы	4,18±0,66*103	2,81±0,43*104	4,08±0,69*104
Бифидумбактерии	2,34±0,27*103	4,09±0,65*104	6,82±0,65*104
Staph. saprophyticus	н/в	3,34±1,18 *102 (41,7%)	3,13±0,29*102 (33,3%)
Staph.epidermidis	4,03±0,9*103 (66,7%)	2,63*103±0,62 (50,0%)	6,07±0,15*102 (25,0%)
Staph.aureus	2,9± 0,59*103 (58,3%)	2,63±0,58*102 (25,0%)	н/в
Strept.bovis гр.D	3,3±0,98*103 (25,0%)	н/в	н/в
E.coli	1,1± 0,01*103 (8,3%)	н/в;	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

Таким образом, применение коровам-матерям «Симбитера-2» и «Гипролама» препятствовало снижению содержания индигенной и контаминации условно-патогенной микрофлорой родовых путей и молозива, микробиоценоз которых участвует в формировании микробного пейзажа открытых полостей у телят.

Новорожденных телят после облизывания их коровами разместили вне помещения в индивидуальных домиках, в которых они содержались до 2-х месячного возраста. Телята получили первую порцию молозива в первые 2 часа жизни. В течение 3 дней им выпаивали молозиво (молоко) матери, а затем молоко, подвергнутое сквашиванию (муравьиная кислота). С 10 дневного возраста телята имели свободный доступ к воде и кормушкам со стартерным комбикормом, с 12 дня получали сено злаковое разнотравное.

Новорожденных телят, полученных от коров контрольной группы, разделили на 3 подгруппы (1-я, 2-я и 3-я). Телятам первой подгруппы (n=4) в первые 7 дней жизни ежедневно внутрь применяли пробиотик «Пролам», второй (n=4) – пробиотик внутрь по аналогичной схеме и дополнительно интраназально «Субтилис-ж», телятам 3-й подгруппы (n=4) –препараты не применяли.

Клинические наблюдения показали, что 7 телят с нормальным развитием (63,6%), в первые дни жизни были активны, поднимались и устойчиво стояли через 40,0±10 минут. Проявление сосательного рефлекса отмечено через 1,2±0,13 часа; пульс 110,0±2, частота дыхания 28,0±2,0, температура тела 39,4±0,100С, меконий выделялся через 8,5±2 часа. У одного теленка (9,1%), перенесшего асфиксию в легкой степени, в первый час жизни наблюдали ту же клиническую картину, что и у животных других подгрупп с аналогичной патологией. Теленок самостоятельно поднялся через 40 минут. Выделение мекония отмечено через 10,0 часов. В первые сутки температура тела 38,8±0,15°С, пульс 126±2,0 ударов в минуту, частота дыхания 38±2,0 в минуту. Тахикардию у теленка регистрировали до 3, одышку - до 5 суток.

У 2 (18,2%) телят-гипотрофиков первой степени тяжести в течение первых 2-х часов жизни наблюдали лёгкое угнетение, шаткость передних зубов (6 резцов), слабовыраженный цианоз конъюнктивы и слизистой носовой полости. Аппетит сохранён, пили с частыми перерывами. Выделение мекония отмечено через 10,0±1,5 часа. Телята самостоятельно поднимались через 2,0±0,5 часа. В первые сутки температура тела 38,2±0,1°С; пульс 117,0±2,00/мин, частота дыхания 36,0±1,0/мин. Проявление сосательного рефлекса отмечено через 1,5±0,23 часа.

У теленка с третьей степенью гипотрофии в первые 4 дня жизни регистрировали выраженное торможение физиологических рефлексов. В течение первых 2 часов наблюдали угнетенное состояние, цианоз видимых слизистых оболочек, гиперемию десен и шаткость передних зубов (4 резца), обильное слюноотделение. Вес теленка при рождении составил 21кг, он самостоятельно поднялся через 4,5 часа. Выделение мекония отмечено через 12 часов. В первые сутки у него регистрировали гипотермию (38,1˚С), а на 2 день – значительное повышение температуры (41,5˚С), лихорадка продолжалась в течение 3-х суток.

В первую подгруппу вошли 2 теленка-нормотрофика и один с синдромом интранатальной асфиксии. В молозивный период диарейный синдром в легкой форме регистрировали у одного теленка (33,3%), с продолжительностью патологии 2 дня, антибактериальные препараты животному не применяли. У телят-нормотрофиков желудочно-кишечные и респираторные болезни в молозивный период не отмечали. Респираторную патологию в легкой форме в молочный период регистрировали у 2 (66,6%) животных, средняя длительность болезни 8 дней. Средняя продолжительность диарейного и респираторного синдромов составила 10 дней. Среднесуточный прирост массы тела у телят - 610,7± 50,0г.

Во вторую подгруппу вошли 2 теленка-нормотрофика и по 1 теленку с синдромом первой и третьей степени гипотрофии. В молозивный период у телят – нормотрофиков и с синдромом первой степени гипотрофии патологию желудочно-кишечного тракта в легкой форме регистрировали в 33,3% случаях продолжительностью 4 дня. В молочный период у одного теленка (33,3%) отмечали пневмоэнтерит с длительностью диарейного синдрома 4 и респираторного – 12 суток. Средняя продолжительность диарейного и респираторного синдромов составила 16 дней. Среднесуточный прирост массы тела у телят - 590±35,0 г.

Теленок с выраженной степенью гипотрофии заболел с признаками профузного поноса в первый день жизни (длительность течения 4 суток) и на 15 сутки (продолжительность 5 дней). В фекалиях обнаружен геном возбудителя вирусной диареи. Респираторную патологию в тяжелой форме, которая длилась 25 суток, регистрировали с 10 дня жизни. Средняя продолжительность диарейного и респираторного синдромов составила 34 дня. Перед переводом животных в общую группу (60 сутки) у одного из них обнаружен геном Pasteurella multocida. Клинических признаков патологии не регистрировали.

В третью (интактную) подгруппу вошли 3 (75%) теленка-нормотрофика и один (25%) с первой степенью тяжести гипотрофии. В молозивный период у 75% телят отмечали желудочно-кишечную патологию, со средней продолжительностью течения болезни 3,7 суток. Энтеротоксемическую форму колибактериоза регистрировали у теленка-гипотрофика (25%). Антибактериальные препараты применяли всем животным. В молочный период диарейный синдром в легкой форме регистрировали у 25% телят с продолжительностью патологии 3 дня.

Респираторную патологию в тяжелой форме диагностировали в молочный период у 3 (75%) животных, средняя продолжительность которой составила 17,3 дня. У одного теленка (25%),который пал после перевода в общую группу, обнаружены геномы вируса респираторно-синцитиальной инфекции и Mycoplasma bovis. У одного теленка (25%) без клинически выраженной патологии, непосредственно перед переводом в общую группу (60 сутки) обнаружен геном Pasteurella multocida. Средняя продолжительность диарейного и респираторного синдромов в молочный период составила 20,3 дня. Среднесуточный прирост массы тела у телят – 450±25,0г.

При изучении микробного пейзажа толстого отдела кишечника установлено, что на 7-е сутки у телят контрольной группы, которым применяли «Пролам» по сравнению с интактными, было выше содержание лактобацилл и бифидумбактерий в 10,2 и 12,3 раза соответственно и сапрофитных стафилококков в 6,9 раза, но было ниже количество Enterococcus faecalis в 13,6 раза, Enterococcus faecium в 7 раз, бактерий родов Citrobacter и Enterobacter в 17,2 и 22,7 раза, при частоте изоляции последних в 75,0% случаев. Содержание лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий было ниже в 9,5 и 13,2 раза, с соотношением их 12,3:1 (в группе сравнения 8,9:1) (табл.5,6).

Таблица 5 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника интактных телят,
полученных от коров контрольной группы

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	1,74±0,71*108	4,43±0,88*109
Бифидумбактерии	3,03±0,81*109	3,83±0,83*1010
E.coli (лакт.+)	1,5±0,3*106	4,6±0,21*108
E.coli (лакт.-)	2,3±0,91*105	5,15±0,34*107
Соотношение E.coli (лакт.+)/ E.coli (лакт.-)	6,52:1	8,9:1
Citrobacter	2,7±0,27*103 (50,0%)	4,13±0,64*104
Enterobacter	1,07±0,17*103 (50,0%)	6,13±0,80*104
Enteroc.faecium	5,6±0,87*104 (75,0%)	3,8±0,12*106
Enteroc.faecalis	2,35±0,75*104 (75,0%)	4,06±0,51*106
Staph. aureus	3,0±0,1*103 (50,0%)	4,03±0,31*103 (75,0%)
Proteus	50%	25%
Staph. (saprophyt.; еpidermidis)	2,97±0,12*103 (75,0%)	3,93±0,74*103 (75,0%)
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	н/в
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

Таблица 6 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника рожденных от коров
контрольной группы телят, получавших «Пролам»

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	3,47±0,94*108	4,53±0,78*1010
Бифидумбактерии	5,7±0,32*109	4,73±0,62*1011
E. coli (лакт.+)	3,5±0,1*106	4,83±0,84*107
E. coli (лакт.-)	5,1±0,7*105	3,9±0,01*106
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	6,86:1	12,3:1
Citrobacter	2,6±0,29*103 (50,0%)	2,4±0,54*103 (75,0%)
Enterobacter	5,1±0,69*10 3(50,0%)	2,7±0,2*103 (75,0%)
Enteroc. faecium	4,5±0,65*104	5,4±0,38*105
Enteroc. faecalis	3,83±0,37*104	2,8±0,4*105
Staph. aureus	7,13*103±0,03 (25,0%)	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph. (saprophyt.; еpidermidis)	2,7±0,2*103	2,7±0,2*104
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	н/в
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

От телят обеих групп геномов корона- , ротавирусов и вируса диареи- болезни слизистых не выделяли.

У телят, которым применяли «Пролам» и «Субтилис-Ж» на 7-сутки по сравнению с интактными животными, было выше количество лактобацилл в 9,2 раза, бифидумбактерий в 15,1 раза, сапрофитных стафилококков в 18,7 раза, но ниже уровень Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium в 4,8 раза и 5 раз соответственно. От телят этой группы бактерии родов Citrobacter и Enterobacter выделяли в 75,0% и 50,0% случаев, количество их было меньше в 28,4 и 24,0 раза соответственно. Содержание лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий было ниже в 13,1 и 28,6 раза, с соотношением их 19,5:1 (в группе сравнения 8,9:1) (табл.5,7).

Таблица 7 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника рожденных от коров
контрольной группы телят, получавших «Пролам» и «Субтилис-Ж»

Примечание: н/в – не выделяли.

На 1-е и 7-е сутки у них обнаруживали геном вирусной диареи и болезни слизистых в 25,0% случаев.

В фекалиях интактных телят в 75,0% случаев обнаруживали Staph. aureus и в 25,0% - бактерии рода Proteus, которые не изолировали от телят, получавших препараты.

При изучении микробиоценоза верхних дыхательных путей у интактных телят полученных от контрольной группы, в 1 сутки изолировали Staph. epidermidis в 75,0% случаев, стрептококки группы Д и бактерии рода Citrobacter в 25,0%, золотистый стафилококк и эшерихии в 50,0% случаев.

На 7 сутки в 25,0% случаев выделяли стрептококки группы Д и бактерии рода Citrobacter, уменьшалась частота изоляции эпидермального стафилококка до 50,0%, но увеличилось выделение золотистого стафилококка с 50,0% до 75,0%, в 25,0% случаев обнаруживали Staph. hyicus, Staph. haemoliticus, в 50,0% - стрептококки группы С (табл.8).

На 1 и 7 сутки у них обнаруживали геном вируса ИРТ.

Таблица 8 - Микробный пейзаж верхних дыхательных путей телят,
полученных от коров контрольной группы

 

Микроорганизмы	Контрольная группа
	интактные	телята, получавшие «Пролам»	телята, получавшие «Пролам» и «Субтилис-Ж»
	1-е сутки/ 7-е сутки	1-е сутки/ 7-е сутки	1-е сутки/ 7-е сутки
Staph. saprophyticus	н/в н/в	50% 50%	25% 25%
Staph. epidermidis	75% 50%	25% 25%	50% 50%
Staph. hyicus	н/в 25%	н/в н/в	25% н/в
Staph.intermedius	н/в н/в	н/в н/в	25% н/в
Staph.aureus	50% 75%	75% 25%	50% н/в
Staph. haemoliticus	н/в 25%	н/в 25%	25% н/в
Strept. гр. Д	25% 25%	25% н/в	25% н/в
Strept. гр. С	н/в 50%	25% 25%	25% н/в
E.coli	50% н/в	н/в н/в	25% н/в
Citrobacter spp.	25% 25%	н/в н/в	25% н/в
Mуc. Вovis	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ИРТ	25% 25%	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ВД-БС	н/в н/в	н/в н/в	25% 25%
РС-вирус	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

На 30-40 день (при появлении клинических признаков у 25,0% животных) от интактных телят в 50,0% случаев выделяли Staph. saprophyticus, Staph. epidermidis, стрептококки группы С, в 25,0% - Staph. hyicus, Staph.aureus и в 100% случаев эшерихии.

На 60 день при развитии респираторной патологии у 75,0% животных уменьшилось выделение Staph. epidermidis, стрептококков группы С до 25% случаев, Staph. saprophyticus и Staph. hyicus не изолировали, но увеличилась частота выделения Staph.aureus до 75,0%, обнаруживали в 25% случаев P. multocida, бактерии рода Citrobacter, в 50,0% - Staph. haemoliticus, бактерии родов Enterobacter и Proteus и в 75,0% случаев стрептококки группы Д. У 100% животных выделяли эшерихии (табл.19). В 25,0% случаев у телят обнаруживали геномы M. bovis и респираторно-синцитиального вируса.

От телят, получавших «Пролам», рожденных от коров контрольной группы, в 1-е сутки выделяли Staph. epidermidis, стрептококки групп С и Д в 25,0% случаев, Staph. saprophyticus в 50,0% и Staph. aureus в 75,0% случаев, на 7-е сутки - сапрофитные и эпидермальные стафилококки в 50,0% и 75%, стрептококки группы С в 25,0 % случаев, уменьшалась частота изоляции Staph. aureus с 75,0% до 50%, обнаруживали Staph. haemoliticus и E. coli в 25,0% случаев и не изолировали стрептококки группы С.

У рожденных от коров контрольной группы телят, получавших «Пролам» и «Субтилис-Ж», в первые сутки жизни выделяли сапрофитный и эпидермальный стафилококки в 25,0% и 50,0% случаев, Staph. hyicus, Staph.intermedius, Staph. haemoliticus, Citrobacter в 25,0%, Staph.aureus и E.coli в 50,0% случаев. На 7-е сутки частота выделения сапрофитного и эпидермального стафилококков не изменилась, а золотистый стафилококк, Staph. haemoliticus, Staph. intermedius, Staph. hyicus, стрептококков групп Д и С, бактерий рода Citrobacter и E. сoli не изолировали.

На 35-40 сутки у них выделяли сапрофитный и эпидермальный стафилококки в 50,0% случаев, обнаруживали в 25,0% стрептококки группы Д и эшерихии и в 75,0% золотистый стафилококк.

При появлении клинических признаков респираторной патологии на 60 день у телят не выделяли сапрофитный и эпидермальный стафилококки, стрептококки группы Д, эшерихии, при этом в 25,0% случаев обнаруживали геномы респираторно-синцитиального вируса и M. bovis, P. multocida и изолировали бактерии рода Enterobacter

При изучении иммунного статуса установлено, что на 7 сутки у интактных телят снижались БАСК в 2,1 раза, КАСК на 17,2 и ЛАСК на 25,6%, а так же ФАЛ, ФЧ и ФИ на 34,4, 52,9 и 30,1% соответственно. При этом у телят, обработанных «Проламом» и «Проламом» в комбинации с «Субтилисом-Ж», бактерицидная активность сыворотки крови не изменялась, а лизоцимная активность повышалась на 17,6 и 43,2% соответственно. У животных, получавших «Пролам», при неизменной КАСК незначительно снижались количество активных фагоцитов (ФАЛ на 6,8%) и их микробная емкость (ФЧ, ФИ на 17,7 и 25,3%). У телят, получавших «Пролам» в комбинации с «Субтилисом-Ж», показатели клеточного звена оставались на том же уровне, отмечалось повышение КАСК в 2,1 раза, что объясняется антигенной стимуляцией иммунитета микрофлорой, входящей в состав прбиотика «Субтилис Ж».

У животных всех групп на 7 сутки отмечалось повышение титров антител к ротавирусу, коронавирусу и вирусу ВД-БС в 2-2.5 раза, что связано с циркуляцией указанных возбудителей среди телят (табл.9).

Таблица 9 - Иммунный статус телят контрольной группы

Показа-тели	1 сутки			7 сутки
	Интакт-ные	Телята, получавшие		Интакт-ные	Телята, получавшие
		Пролам	Пролам и Субтилис-Ж		Пролам	Пролам и Субтилис-Ж
БАСК,%	91,2±1,33	89,9±1,48	86,5±0,62	43,9±1,43	87,5±1,95	85,1±2,40
КАСК,% гем	5,8±1,78	4,1±0,70	2,3±0,66	4,8±1,06	4,0±1,02	4,8±2,01
ЛАСК, мкг/мл	2,15±0,35	1,7±0,11	1,6±0,03	1,6±0,06	2,0±0,21	2,51±0,49
ФАЛ	84,0±6,78	80,0±5,77	87,5±3,77	62,5±7,76	74,7±2,91	87,5±4,27
ФЧ	8,7±1,70	7,9±1,47	10,1±0,98	4,1±0,51	6,5±0,47	10,1±1,68
ФИ	9,3±1,17	9,9±1,71	11,5±1,35	6,5±1,31	7,4±1,18	11,4±1,52
Титры антител к: ротавирусу;	39,5±1,20	42,6±1,07	30,2±1,09	84,3±1,81	85,8±2,41	74,8±1,50
корона- вирусу	48,3±0,88	34,1±1,12	41,3±1,67	99,6±2,46	84,7±1,73	88,9±1,32
ВД-БС	33,6±3,54	32,4±1,51	29,8±0,97	65,7±1,80	76,8±2,27	58,7±1,23

Новорожденных телят, полученных от коров, обработанных «Симбитером-2», разделили на 3 подгруппы (4-я, 5-я и 6-я). Животным 4-й и 5-й подгрупп (n=4) пробиотики применяли по схемам, что и телятам 1 и 2 подгрупп. Телятам 6-й подгруппы пробиотики не применяли.

Клинические наблюдения за телятами показали, что они в 91,7% (11 голов) случаев были активны, поднимались и устойчиво стояли через 50,0±10 минут. Проявление сосательного рефлекса отмечено через 0,98±0,23 часа; пульс 110,0±2,95, частота дыхания 28,0±2,0, температура тела 39,3±0,150С, меконий выделялся через 9±2 часа. У одного теленка (8,3%), перенесшего асфиксию в легкой степени, в течение первых 2-х часов жизни наблюдали угнетенное состояние, цианоз видимых слизистых оболочек, гиперемию десен. Выделение мекония отмечено через 9,0 часов. Теленок самостоятельно поднялся через 60 минут. Температура тела у него в первые сутки была 38,6±1,01°С, пульс 123±4 ударов и частота дыхания 38±2 в минуту. Тахикардию у теленка регистрировали до 4, одышку - до 5 суток.

В четвертую подгруппу вошли 3 теленка-нормотрофика и один с синдромом интранатальной асфиксии. У телят-нормотрофиков в течение молозивного (7-10 суток) и молочного периода (до 2-месячного возраста) желудочно-кишечную патологию не отмечали. У теленка, перенесшего асфиксию, на 8 день жизни регистрировали расстройство желудочно-кишечного тракта в легкой форме, которое продолжалось 4 дня. Антибактериальные препараты телятам в молозивный период не применяли. В молочный период диарею не отмечали, респираторная патология в легкой форме диагностирована у 75% животных со средней длительностью течения болезни – 12 дней. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов у телят составила 16 дней. Среднесуточный прирост массы тела у телят - 643,6±24,0г.

В пятую подгруппу вошли телята-нормотрофики (n=4). Заболеваемость их желудочно-кишечными болезнями в молозивный период составила 50%, в молочный – её не регистрировали. Средняя продолжительность желудочно-кишечных болезней составила 4 дня. У одного теленка обнаружен геном коронавируса, болезнь у него протекала в легкой форме. В молозивный период заболеваемость респираторными болезнями не диагностировали, в молочный – регистрировали у 50% животных, которые протекали в легкой форме со средней продолжительностью 11 дней. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов составила 15 дней. Среднесуточный прирост массы тела у телят- 620,3±32,0г.

В шестую подгруппу вошли телята-нормотрофики (n=4), которые пробиотик не получали. В молозивный период желудочно-кишечные и респираторные болезни у них не регистрировали, а в молочный диагностировали пневмоэнтериты в 75% случаев, при этом средняя продолжительность диарейного (9,7 дней) и респираторного (12,6 дней) синдромов составила 22,3 суток. Тяжелое течение респираторной патологии наблюдалось у одного теленка на 52 сутки, впоследствии болезнь перешла в хроническую форму. Среднесуточный прирост массы тела у телят составил - 500,2±23,0г.

При исследовании микробного пейзажа толстого отдела кишечника телят, полученных от коров, которым интравагинально применяли «Симбитер», установлено, что на 7 сутки у животных которым применяли «Пролам» по сравнению с интактными животными, было выше содержание лактобацилл в 15,5 раза и бифидумбактерий в 17,7раза, но ниже количество сапрофитных стафилококков в 201,8 раза, Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis в 7,7 и 18,2 раза, лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий в 7,8 и 11 раз соответственно при их соотношении 107,2 (в группе сравнения 75,3:1).

Таблица 10 - Микробный пейзаж толстого кишечника интактных телят,
полученных от обработанных «Симбитер- 2» коров

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	3,43±0,12*109	1,83±0,16*1010
Бифидумбактерии	4,73±0,12*1010	2,45±0,21*1011
E. coli (лакт.+)	5,0±0,4*106	3,24±0,49*108
E. coli (лакт.-)	4,7±0,31*104 (50,0%)	4,3±0,23*106
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	106,4:1	75,3:1
Citrobacter	3,63±0,13*102 (50,0%)	3,67±0,15*104 (75,0%)
Enterobacter	8,25±0,41*102 (50,0%)	2,55±0,93*104 (75,0%)
Enteroc. faecium	5,7±0,32*104 (75,0%)	7,55±0,45*105
Enteroc. faecalis	1,2±0,71*104 (75,0%)	7,9±0,01*105
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	2,1±0,08*103	3,33±0,13*105
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	н/в
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

У них были ниже частота выделения Citrobacter и Enterobacter на 25,0% и их количество в 269,8 и 128,8 раз соответственно (табл.10,11).

У телят обеих групп геномов корона-, ротавирусов и вируса диареи-болезни слизистых не обнаруживали.

Таблица 11 - Микробный пейзаж толстого кишечника телят,
получавших «Пролам», рожденных от обработанных «Симбитером -2» коров

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	3,05±0,13*109	2,83±0,79*1011
Бифидумбактерии	2,85±0,12*1010	4,33±0,12*1012
E. coli (лакт.+)	2,17±0,87*106	4,18±0,15*107
E. coli (лакт.-)	2,15±0,31*104 (50,0%)	3,9±0,64*105
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	100,9:1	107,2:1
Citrobacter	2,05±0,65*102 (50,0%)	1,36±0,3*102 (50,0%)
Enterobacter	4,3±0,12*102 (50,0%)	2,06±0,11*102 (50,0%)
Enteroc.faecium	7,4±0,32*104 (75,0%)	9,81±0,17*104
Enteroc.faecalis	5,7±0,18*104 (75,0%)	4,35±0,38*104
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph. (saprophyt.; еpidermidis)	2,75±0,65*103	1,65±0,5*103 (50,0%)
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	н/в
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

На 7-е сутки у телят, которым применяли «Пролам» и «Субтилис-Ж», было выше, чем у телят интактной группы, содержание лактобацилл и бифидумбактерий в 44,8 и 18,5 раза, ниже количество сапрофитных стафилококков в 17 раз, Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis в 31,5 и 58,5 раз соответственно. Соотношение лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий было значительно выше (116,9:1), чем у телят группы сравнения (75,3:1). Частота выделения бактерий родов Citrobacter и Enterobacter у них составляла 25,0%, у интактных животных 75%, при этом количество указанных микроорганизмов у последних было выше в 227,9 и 81,7 раза соответственно (табл.11,12).

Таблица 12 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника телят, которым применяли «Пролам» и «Субтилис-Ж», рожденных от обработанных «Симбитером-2» коров

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	3,21±0,78*109	8,2±0,56*1011
Бифидумбактерии	6,83±0,63*1010	4,53±0,12*1012
E. coli (лакт.+)	3,33±0,17*106	6,2±0,16*107
E. coli (лакт.-)	3,25±0,85*104 (50,0%)	5,3±0,64*105 (75,0%)
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	102,5:1	116,9:1
Citrobacter	2,93±0,15*102 (25,0%)	1,61±0,16*102 (25,0%)
Enterobacter	4,63±0,14*102 (25,0%)	3,12±0,11*102 (25,0%)
Enteroc.faecium	3,83±0,13*104 (75,0%)	2,4±0,11*104
Enteroc.faecalis	2,8±0,35*104 (75,0%)	1,35±0,13*104
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	4,2±0,13*103 (75,0%)	1,95±0,13*104
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	25,0%
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

В этот период у 25,0% телят обнаруживали геном коронавируса.

При изучении микробного пейзажа верхних дыхательных путей интактных телят, рожденных от обработанных «Симбитер-2» коров, в 1 сутки изолировали эпидермальный стафилококк в 75,0% и стрептококки группы Д в 25,0% случаев.

На 7 сутки уменьшалось выделение эпидермального стафилококка с 75,0% до 25,0%, при увеличении частоты изоляции стрептококков группы Д 25,0% до 75,0% случаев. У них обнаруживали в 25,0% Staph. intermedius, Staph. haemoliticus, стрептококки группы С, бактерии родов Enterobacter и Proteus и в 50,0 % - Staph. hyicus случаев.

У телят, получавших «Пролам», рожденных от обработанных «Симбитер-2» коров, в 1 сутки выделяли эпидермальный стафилококк в 25,0% случаев. В возрасте 7 суток отмечали увеличение частоты выделения эпидермального стафилококка с 25,0 до 75,0%, обнаруживали Staph. hyicus в 25,0% и стрептококки группы Д в 50,0% случаев.

У телят, получавших «Пролам» и «Субтилис-Ж», рожденных от коров этой группы в первые сутки в 25,0% случаев выделяли эпидермальный и сапрофитный стафилококки. На 7-е сутки у них изолировали эпидермальный стафилококк и стрептококки группы С в 25,0% случаев, сапрофитный стафилококк не обнаруживали (табл.13).

Таблица 13 - Микробный пейзаж верхних дыхательных путей телят, полученных от обработанных «Симбитер-2» коров

Виды микроорганизмов	Интактные	Телята, получавшие «Пролам»	Телята, получавшие «Пролам» и «Субтилис-Ж»
	1-е сутки/ 7-е сутки	1-е сутки/ 7-е сутки	1-е сутки/ 7-е сутки
Staph. saprophyticus	н/в н/в	н/в н/в	25% н/в
Staph. epidermidis	75% 25%	25% 75%	25% 25%
Staph. hyicus	н/в 50%	н/в 25%	н/в н/в
Staph.intermedius	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в
Staph.aureus	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Staph. haemoliticus	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в
Strept. гр. Д	25% 75%	н/в 50%	н/в н/в
Strept. гр. С	н/в 25%	н/в н/в	н/в 25%
E.coli	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Proteus	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в
Enterobacter spp.	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в
Mуc. Вovis	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ИРТ	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ВД-БС	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
РС-вирус	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

На 35-40 дни от животных Staph. saprophyticus выделяли в 25,0 %, Staph. epidermidis и Staph. hyicus в 50,0%, при этом в 25,0% случаев обнаруживали Staph. haemoliticus и E. coli (табл.19). От 50,0% животных выделяли геном респираторно-синцитиального вируса.

На 60 день при развитии респираторной патологии у 25,0% телят снижалось выделение Staph. epidermidis до 25%, обнаруживали Staph.aureus, стрептококки группы С, бактерии родов Enterobacter и Proteus в 25,0% случаев (табл.19).

При изучении иммунного статуса телят, рожденных от коров, получавших «Симбитер-2», установлено повышение бактерицидной активности сыворотки крови у интактных животных на 8,5%, более выраженные изменения указанного показателя регистрировали после применения «Пролама» (на 29,4%) и «Пролама» с «Субтилисом-Ж» (на 14,3%), комплементарной активности – в 1,6, 3,2 раза и на 19,2% соответственно. У телят, получавших пробиотики, отмечали стимуляцию клеточного звена иммунитета, выраженную повышением ФАЛ, ФЧ и ФИ на 17, 8 и 23,9%, 42,2 и 24,3%, 14,7 и 4,4% соответственно, при этом у животных интактной группы эти показатели снижались. Увеличение титров антител свидетельствует о циркуляции возбудителей среди телят.

Таблица 14 - Иммунный статус телят, рожденных от получавших «Симбитер-2» коров

Показатели	1 сутки			7 сутки
	Интакт- ные	Телята, получавшие		Интакт ные	Телята, получавшие
		«Пролам»	«Пролам и Субтилис-Ж»		«Пролам»	«Пролам и Субтилис-Ж»
БАСК,%	81,1±2,59	72,7±1,98	83,0±2,64	88,1±2,14	94,1±3,10	94,9±3,94
КАСК, % гем	9,7±1,08	4,5±0,55	7,3±1,55	15,5±2,32	14,5±1,99	8,7±0,74
ЛАСК, мкг/мл	1,5±0,11	1,7±0,05	1,7±0,06	1,6±0,10	1,5±0,01	1,8±0,12
ФАЛ	82,0±1,15	84,0±2,94	83,0±4,21	73,0±4,2	86,0±1,36	90,5±1,25
ФЧ	8,2±1,27	8,3±0,53	10,3±0,33	6,2±0,79	11,8±1,39	12,8±1,86
ФИ	9,9±1,72	10,9±0,32	13,5±2,01	9,5±0,27	12,5±2,08	14,1±2,01
Титры антител к: ротавирусу	52,0±1,09	49,6±1,51	40,8±0,90	80,3±1,65	80,2±1,13	74,1±1,18
коронавирусу	48,8±1,20	50,4±1,85	52,6±1,10	93,7±4,53	85,0±1,25	85,5±1,19
ВД-БС	40,4±1,07	41,5±1,11	39,6±0,87	69,3±1,14	82,6±1,05	63,8±1,23

Новорожденных телят, полученных от коров, обработанных «Гипроламом», разделили на 3 подгруппы (7-я, 8-я и 9-я). Животным 7-й и 8-й подгрупп применяли пробиотики по аналогичной схеме, что и телятам 1,2,4 и 5 подгрупп. Телятам 9-й группы препараты не применяли.

Клинические наблюдения за телятами показали, что они в 83,4% (10 голов) случаев были активны, поднимались и устойчиво стояли через 40,0±10 минут, проявление сосательного рефлекса отмечено через 0,7±1,17 часа; пульс 110,0±1,95, частота дыхания 26,0±2,0, температура тела 39,4±0,150С, меконий выделялся через 9±1,5 часа. У одного теленка (8,3%), перенесшего асфиксию в легкой степени, в первый час жизни наблюдали угнетенное состояние, цианоз видимых слизистых оболочек, гиперемию десен и в первые 4-5 дней жизни - торможение физиологических рефлексов, а также тахикардию и одышку. Теленок самостоятельно поднялся через 50 минут. Выделение мекония отмечено через 9,0 часов. В первые сутки температура тела 38,9±0,15°С, пульс 126±2,0 ударов в минуту, частота дыхания 36±2,0 в минуту. У одного теленка (8,3%) с третьей степенью гипотрофии в молозивный период наблюдали выраженную гипотермию (37,9±0,150С) и умеренную тахикардию (124±2,0), частота дыхания колебалась в переделах нормы 26,0±2,0. В течение 2-х часов жизни отмечали лёгкое угнетение, шаткость передних зубов (количество резцов 6), гиперемию слизистой дёсен в виде каймы, цианоз слизистой носовой полости и конъюнктивы. Выделение мекония отмечено через 13,5 часа. Теленок самостоятельно поднялся через 7 часов.

В седьмую подгруппу вошли 3 теленка-нормотрофика и один с синдромом интранатальной асфиксии. В течение всего опыта у животных не регистрировали желудочно-кишечную патологию. У одного теленка-нормотрофика был обнаружен геном коронавируса. Респираторные болезни в легкой форме регистрировали у 50% телят в молочный период со средней продолжительностью течения 7 дней. Среднесуточный прирост массы тела у телят составил - 650,7±22,0г.

В восьмую подгруппу вошли 3 теленка-нормотрофика и один с синдромом третьей степени гипотрофии. У животных с нормальным развитием желудочно-кишечные и респираторные болезни не регистрировали. У одного теленка-нормотрофика обнаружен геном коронавируса. Среднесуточный прирост массы тела у телят-нормотрофиков составил - 610,7±30,0г.

Теленок с выраженной степенью гипотрофии в молозивный период не болел. В молочный – у него регистрировали диарейный синдром в легкой форме на 12 сутки, продолжительностью 2 дня и на 20 сутки – в тяжелой форме, длительностью 5 дней. Респираторную патологию отмечали на 25 сутки, она длилась18 дней. После переболевания у теленка наблюдали снижение массы тела, легкое угнетение и хромоту (патологию регистрировали в запястных суставах). Рецидив патологии регистрировали на 53 сутки, болезнь протекала в хронической форме в течение 25 дней. У животного обнаружен геном Mycoplasma bovis. Средняя продолжительность диарейного и респираторного синдромов составила 32 дня.

В девятую подгруппу вошли телята-нормотрофики (n=4). В молозивный период желудочно-кишечные болезни в легкой форме регистрировали в 75% случаях со средней продолжительностью 3,3 дня. На 10 сутки у одного теленка был обнаружен геном коронавируса. В молочный период диарейный синдром продолжительностью 7 дней регистрировали у 25% телят.

Респираторную патологию в молозивный период не отмечали, в молочный – регистрировали у 75% животных, средняя длительность болезни 16,6 дней. Тяжелое её течение фиксировали у одного теленка (25%). Средняя продолжительность диарейного и респираторного синдромов в молочный период составила 23,6 дня. Среднесуточный прирост массы тела у телят девятой подгруппы - 520,4±22,0г.

При исследовании микробного пейзажа толстого отдела кишечника телят, получавших «Пролам», рожденных от обработанных «Гипроламом» коров, установлено, что на 7 сутки содержание лактобацилл и бифидумбактерий было выше по сравнению с интактными животными в 7,8 и 12,3 раза соответственно, но было ниже количество Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis в 3,5 и 13,6 раза, сапрофитных стафилококков в 5,6 раза. Соотношение лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий было выше (135,4:1), чем у телят группы сравнения (94,5:1), и количество их было меньше в 10,6 и 15,1 раз соответственно (табл.15, 16).

Таблица 15 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника интактных телят, рожденных от обработанных «Гипроламом» коров

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	4,13±0,14*1010	7,33±0,71*1011
Бифидумбактерии	1,18±0,59*1011	5,03±0,16*1012
E. coli (лакт.+)	3,35±0,16*106	5,58±0,11*108
E. coli (лакт.-)	2,9±0,11*104 (75,0%)	5,9±0,64*106
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	115,5:1	94,5:1
Citrobacter	2,53±0,11*102 (25,0%)	3,8±0,11*103
Enterobacter	3,1±0,12*102 (50,0%)	3,32±0,17*103
Enteroc.faecium	5,75±0,13*104	1,5±0,14*105
Enteroc.faecalis	2,3±0,8*103 (75,0%)	1,87±0,71*104
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	5,75±0,63*103	3,25±0,8*104
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	25,0%
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

В этот период у животных, получавших «Пролам», частота выделения бактерий рода Citrobacter увеличилась на 25,0% (75,0%), Enterobacter не изменилась (50,0%), а у телят группы сравнения повысилась до 100% и количество указанных микроорганизмов у последних было выше в 9,3 и 12,9 раза соответственно. В 25,0% случаев у телят обеих групп обнаруживали геном коронавируса (табл.15,16).

Таблица 16 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника телят, рожденных от
обработанных «Гипроламом» коров и получавших «Пролам»

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	4,18±0,34*1010	5,73±0,13*1012
Бифидумбактерии	8,15±0,98*1011	6,18±0,17*1013
E. coli (лакт.+)	3,6±0,15*106	5,28±0,51*107
E. coli (лакт.-)	4,3±0,24*104 (50,0%)	3,9±0,15*105 (50,0%)
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	86,7:1	135,4:1
Citrobacter	1,9±0,2*102 (50,0%)	4,07±0,18*102 (75,0%)
Enterobacter	3,45±0,14*102 (50,0%)	2,57±0,19*102 (50,0%)
Enteroc.faecium	1,7±0,11*104 (50,0%)	4,28±0,49*104
Enteroc.faecalis	5,1±0,001*103 (25,0%)	1,37±0,19*104 (50,0%)
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	2,95±0,64*103	5,83±0,16*103
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	25,0%
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

После применения телятам «Пролам» и «Субтилис-Ж» у них было выше, чем у телят интактной группы количество лактобацилл и бифидумбактерий в 5,2 и 8,6 раза, Enterococcus faecium в 1,4 раза, но ниже уровень сапрофитных стафилококков в 9,4 раза, Enterococcus faecalis в 5,5 раза соответственно. Содержание лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий у них было ниже в 8,2 и 12,9 раза соответственно при их соотношении 149,1:1 (в группе сравнения 94,5:1). Кроме того частота выделения лактозоотрицательных эшерихий у телят опытной группы была ниже на 25,0%. Количество бактерий родов Citrobacter и Enterobacter у телят опытной группы было ниже в 27,1 и 27,7 раза при частоте выделения 75,0% и 50,0% соответственно (в группе сравнения 100%). У 25,0% животных обнаруживали геном коронавируса.

Таблица 17 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника телят, получавших «Пролам»
и «Субтилис-Ж», рожденных от обработанных «Гипроламом» коров

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	3,1±0,13*1010	3,78±0,18*1012
Бифидумбактерии	2,08±0,32*1011	4,33±0,14*1013
E. coli (лакт.+)	2,78±0,06*106	6,83±0,86*107
E. coli (лакт.-)	3,3±0,14*104 (75,0%)	4,58±0,76*105 (25,0%)
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	84,2:1	149,1:1
Citrobacter	2,1±0,4*102 (50,0%)	1,4±0,06*102 (75,0%)
Enterobacter	1,73±0,19*102 (50,0%)	1,2±0,8*102 (50,0%)
Enteroc.faecium	4,37±0,17*104 (50,0%)	2,15±0,16*105
Enteroc.faecalis	2,45±0,72*103 (25,0%)	3,38±0,62*103 (50,0%)
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	3,98±0,44*103	3,45±0,13*103
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	25,0%
Ротавирус	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

От животных обеих групп выделяли энтеропатогенные эшерихии серовариантов О33, О103, О101, О119, О20, О115, О119, О126.

При изучении микробного пейзажа интактных телят, рожденных от обработанных «Гипроламом» коров, в 1 сутки выделяли эпидермальный и сапрофитный стафилококки в 50,0 и 75,0% случаев соответственно. На 7 сутки уменьшилось выделение эпидермального стафилококка с 50,0% до 25,0%, не изолировали сапрофитный стафилококк, обнаруживали в 50,0% случаев Staph. hyicus, золотистый стафилококк, Staph. haemoliticus, стрептококки группы С, бактерии рода Proteus, в 75,0% - стрептококки группы Д, в 25,0% случаев – эшерихии, бактерии родов Citrobacter и Enterobacter.

У получавших «Пролам» телят, рожденных от обработанных «Гипроламом» коров, в 1-е сутки изолировали эпидермальный стафилококк в 100%, сапрофитный стафилококк и стрептококки групп С и Д в 25,0% случаев. На 7-е сутки выделяли сапрофитный стафилококк и стрептококки группы С в 25,0%, уменьшалась частота изоляции эпидермального стафилококка со 100 % до 75,0%, обнаруживали в 50,0% - Staph. hyicus, стрептококки группы Д и в 25,0% случаев золотистый стафилококк, Staph. haemoliticus, эшерихии, бактерии рода Enterobacter и Proteus (табл.18).

У получавших «Пролам» и «Субтилис-Ж» телят, рожденных от коров этой группы, в 1-е сутки изолировали сапрофитный и эпидермальный стафилококки в 100% случаев. На 7-е сутки уменьшалось выделение сапрофитного и эпидермального стафилококка до 75,0% и 50,0% соответственно, обнаруживали стрептококки группы Д в 25,0% и стрептококки группы С в 50,0% случаев (табл.18).

Таблица 18 - Микробный пейзаж верхних дыхательных путей телят,
полученных от обработанных «Гипроламом» коров

Виды микроорганизмов	Интактные	Телята, получавшие «Пролам»	Телята, получавшие «Пролам» и «Субтилис-Ж»
	1-е сутки/ 7-е сутки	1-е сутки/ 7-е сутки	1-е сутки/ 7-е сутки
Staph. saprophyticus	75% н/в	25% 25%	100% 75%
Staph. epidermidis	50% 25%	100% 75%	100% 50%
Staph. hyicus	н/в 50%	н/в 50%	н/в н/в
Staph.aureus	н/в 50%	н/в 25%	н/в н/в
Staph. haemoliticus	н/в 50%	н/в 25%	н/в н/в
Strept. гр. Д	н/в 75%	25% 50%	н/в 25%
Strept. гр. С	н/в 50%	25% 25%	н/в 50%
E.coli	н/в 25%	н/в 25%	н/в н/в
Proteus	н/в 50%	н/в 25%	н/в н/в
Citrobacter spp.	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в
Enterobacter spp.	н/в 25%	н/в 25%	н/в н/в
Pasteurella multocida	25% н/в	25% н/в	н/в н/в
Mуc. Вovis	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ИРТ	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ВД-БС	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
РС-вирус	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

На 30-40 дни у них в 100% случаев выделяли Staph. epidermidis и Staph. hyicus, в 25,0% – обнаруживали Staph. saprophyticus и E. coli (табл.19).

На 60 день у телят отмечали снижение частоты выделения Staph. epidermidis до 50,0%, обнаруживали Staph.aureus в 50,0% случаев, стрептококки группы Д и бактерии рода Enterobacter в 25,0% и увеличивалась частота выделения E. coli до 50,0% (табл.19).

Таблица 19 - Микробный пейзаж верхних дыхательных путей телят

Виды микроорганизмов	30-40 сутки / 60 сутки
	интактные	Телята, получавшие «Пролам» и «Субтилис-Ж»
	от коров контрольной группы		от коров, обработанных препаратом «Симбитер-2»	от коров, обработанных препаратом «Гипролам»
Staph. saprophyticus	50% н/в	50% н/в	25% 25%	25% 25%
Staph. epidermidis	50% 25%	50% н/в	75% 25%	100% 50%
Staph. hyicus	25% н/в	н/в н/в	50% 50%	100% н/в
Staph.aureus	25% 75%	75% 75%	н/в 25%	н/в 50%
Staph. haemoliticus	н/в 50%	н/в н/в	25% н/в	н/в н/в
Strept. гр. Д	н/в 75%	25% н/в	н/в н/в	н/в 25%
Strept. гр. С	50% 25%	н/в 25%	н/в 25%	н/в н/в
E.coli	100% 100%	25% н/в	н/в н/в	25% н/в
Proteus	н/в 50%	н/в н/в	н/в 25%	н/в н/в
Citrobacter spp.	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Enterobacter spp.	н/в 50%	н/в 25%	н/в 50%	н/в 25%
Pasteurella multocida	н/в 25%	н/в н/в	н/в 25%	н/в н/в
Mуc. вovis	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в	н/в 25%
Вирус ИРТ	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ВД-БС	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в
РС-вирус	н/в 25%	н/в н/в	н/в н/в	н/в н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

Из носовых смывов телят выделяли энтеропатогенные эшерихии серовариантов О4, О126, О103, О1, О115, О26, О33, О119, О115.

При изучении иммунного статуса установлено, что на 7 сутки у интактных телят и получавших «Пролам» с «Субтилисом-Ж» происходило снижение КАСК и показателей клеточного иммунитета, но у животных после применения «Пролама», отмечали повышение показателей клеточного и гуморального звена неспецифической защиты (табл.20).

Таблица 20 - Иммунный статус телят, полученных от получавших «Гипролам» коров

Показатели	1-е сутки			7-е сутки
	Интакт- ные	телята, получавшие		Интакт- ные	телята, получавшие
		«Пролам»	«Пролам и Субтилис-Ж»		«Пролам»	«Пролам и Субтилис-Ж»
БАСК,%	86,4± 2,97	81,5±2,81	87,5±1,82	84,3±2,56	85,0±2,12	95,4±2,38
КАСК,% гем	9,4±2,38	5,2±1,1	6,1±1,2	6,2±0,40	6,0±1,64	4,5±0,42
ЛАСК, мкг/мл	1,7±0,06	1,6±0,02	1,7±0,03	1,7±0,04	1,8±0,15	1,8±0,14
ФАЛ	86,4±4,97	67,5±4,57	87,0±1,29	69,0±1,73	87,0±2,38	81,0±3,11
ФЧ	6,5±0,41	4,7±6,23	9,9±1,38	5,6±0,75	9,5±1,1	8,7±0,98
ФИ	9,0±0,28	6,2±1,18	11,6±1,52	7,83±0,87	10,2±1,3	10,7±1,2
Титры антител к: ротавирусу	65,1±1,99	51,8±1,11	39,7±1,15	82,0±1,01	63,6±1,06	60,3±1,66
Корона- вирусу	48,7±1,57	50,1±0,87	62,9±1,75	89,5±0,91	64,2±1,86	72,2±0,83
ВД-БС	52,8±0,87	52,8±1,35	30,6±1,17	61,5±1,00	70,9±0,95	50,5±1,09

В период возникновения и развития респираторной патологии у телят всех групп отмечали снижение показателей клеточного иммунитета в ответ на антигенную нагрузку. У животных, получавших «Пролам» и «Субтилис-Ж», регистрировали снижение лизоцимной активности сыворотки крови за счет расходования его в защитных процессах, при этом у интактных телят этот показатель увеличивался на 43,8%, что свидетельствует о более поздней реакции организма на антигенное воздействие. Кроме того у животных опытных групп отмечали повышение активности гуморальных факторов неспецифического иммунитета (БАСК, КАСК). Снижение титров антител к антигенам возбудителей респираторных болезней указывает на элиминацию их из организма в составе иммунных комплексов (табл. 21).

Таблица 21 - Иммунный статус телят при возникновении респираторной патологии
на 35-40 сутки (числитель) и 60 сутки (знаменатель)

Показатели		Телята, получавшие «Пролам» и «Субтилис-Ж»
	Интактные телята	от коров контрольной группы		от коров, обработанных «Симбитером-2»	от коров, обработанных «Гипроламом»
БАСК,%	49,7±1,43 35,8±1,92	87,8±2,22 89,5±0,99		88,1±2,3 91,2±1,04	87,8±2,22 89,5±0,99
КАСК, % гем	14,6±1,30 8,8±0,54	3,7±0,36 10,7±1,39		4,3±0,56 7,0±2,06	3,7±0,36 10,7±1,39
ЛАСК,мкг/мл	1,6±0,02 2,3±0,56	3,52±0,95 1,7±0,08		1,7±0,08 1,6±0,07	3,52±0,95 1,7±0,08
ФАЛ	55±1,73 51,5±4,99	85,5±1,25 84±2,94		90,0±2,00 87,5±2,21	87,0±1,00 89,5±0,99
ФЧ	3,03±0,38 4,88±1,56	9,5±1,64 7,33±0,21		9,0±2,30 6,4±0,16	9,2±0,52 8,0±1,19
ФИ	5,45±0,56 3,73±0,84	10,2±2,46 5,9±0,38		9,1±3,20 5,6±0,21	8,8±1,05 6,68±0,87
Титры антител к: вирусу РСИ	86,4±6,79 65,5±7,89	83,3±6,82 66,3±11,1		102,7±0,5 91,6±4,61	89,7±4,85 76,2±5,32
ИРТ	83,2±14,09 18,7±3,16	61,9±11,44 29,5±6,66		64,5±7,35 43,8±13,47	64,5±4,58 16,0±2,64
ВД-БС	91,2±1,82 75,0±2,05	76,1±1,22 63,7±1,01		67,6±1,17 58,9±1,28	63,4±1,31 82,1±1,49

Во втором опыте животных отбирали по характерным клиническим признакам: выраженное торможение физиологических рефлексов, склонность к гипотермии и умеренная тахикардия, а также более частое дыхание. У всех телят в течение первых 2 часов жизни наблюдали легкое угнетение, шаткость передних зубов (4-6 резцов), гиперемию слизистой десен в виде каймы, цианоз конъюнктивы и слизистой носовой полости.

Клинические наблюдения за телятами-гипотрофиками контрольной группы в первые дни жизни показали, что они самостоятельно поднимались через 2,6±0,18 часа, проявление сосательного рефлекса отмечали через 2,0±0,27 часа, меконий выделялся через 9±1,5 часа, температура тела 38,9±0,09˚С; пульс 120,0±2,0/мин, частота дыхания 38,0±2,0/мин.

В первые сутки желудочно-кишечные болезни регистрировали в 60% случаях длительностью 4,3 дня. У одного теленка (20%) обнаружен геном ротавируса, болезнь протекала в тяжелой форме. На 9-10 сутки у всех животных выделили геном коронавируса, профузный понос отмечали в течение 5,8 дней. В молочный период диарейный синдром в тяжелой форме регистрировали у одного теленка (20%) продолжительностью 16 суток. Средняя длительность желудочно-кишечной патологии составила 13,8 дня.

Респираторные болезни в легкой форме диагностировали в молочный период у (60%) животных длительностью 9 суток. Среднесуточный прирост массы тела (до 2-х месяцев) составил- 340,7±20,0г.

После перевода животных в общую группу (60-65 сутки) тяжелое течение респираторной патологии наблюдалось в 80% случаях, впоследствии болезнь перешла в хроническую форму. У двух телят, которые пали, обнаружены геномы вируса респираторно-синцитиальной инфекции и Mycoplasma bovis. На протяжении всего опыта средняя продолжительность респираторных болезней составила – 22,4 дня. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов – 36,2 суток.

Клинические наблюдения за телятами-гипотрофиками, которым применяли «Пролам» (первой опытной группы) показали, что они самостоятельно поднимались через 6,0±2,3 часа, проявление сосательного рефлекса отмечено через 3,3±0,41 часа, меконий выделялся через 10,0±4,2 часа, температура тела 38,4±0,1°С; пульс 118,0±2,0/мин, частота дыхания 37,0±3,0/мин.

В первые сутки желудочно-кишечные болезни в тяжелой форме регистрировали у всех телят длительностью 5 дней. У 2-х телят (40%) был обнаружен геном ротавируса. У одного теленка (20%) на 9 сутки отмечали диарейный синдром в легкой форме, продолжительностью 2 дня. На 10 сутки у 2-х телят (40%) обнаружен геном коронавируса, но клинические признаки патологии регистрировали у одного (20%) животного в тяжелой форме, длительностью 4 дня. Средняя продолжительность диарейного синдрома составила 6,2 дня.

В молочный период диареи не отмечали, а респираторные болезни в легкой форме диагностировали у 2-х телят (40%) со средней продолжительностью 9 дней. Среднесуточный прирост массы тела (до 2-х месяцев) составил – 430,7±24,0 г.

После перевода животных в общую группу, на 60-70 сутки в 80% случаях проявились клинические признаки респираторной патологии со средней продолжительностью 12,75 дней. Тяжелое течение болезни регистрировали у одного теленка (20%). Геном Pasteurella multocida обнаружен у трех животных (60%). На протяжении всего опыта средняя продолжительность респираторной патологии составила – 13,8 дней. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов – 20 суток.

При изучении микробного пейзажа толстого отдела кишечника установлено, что на 7-е сутки у телят-гипоторофиков которым применяли «Пролам» по сравнению с интактными, было выше содержание лактобацилл в 47 раз и бифидумбактерий в 14 раз, ниже количество Enterococcus faecalis в 1,2 раза, сапрофитных стафилококков в 1,9 раза. В этот период частота выделения бактерий родов Citrobacter и Enterobacter увеличилась у них до 80,0%, у интактных телят до 100%, при этом количество указанных микроорганизмов у последних было выше в 68,1 и 185,4 раза соответственно. Содержание лактозоположительных и лактозоотрицательных эшерихий было ниже в 1,3 и 3,6 раза, при соотношении 75,6:1 (в группе сравнения 26,1:1) (табл.22,23).

Таблица 22 - Микробный пейзаж толстого отдела кишечника телят-гипотрофиков

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	4,76±0,12*107	1,2±0,68*108
Бифидумбактерии	3,9±0,18*108	3,6±0,13*109
E. coli (лакт.+)	2,56±0,67*105	5,56±0,17*107
E. coli (лакт.-)	3,63±0,47*104 (50,0%)	2,13±0,27*106
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	7,05:1	26,1:1
Citrobacter	2,86±0,95*103 (40,0%)	3,2±0,11*105
Enterobacter	3,94±0,71*103 (60,0%)	6,34±0,46*105
Enteroc.faecium	2,83±0,13*104 (60,0%)	2,98±0,22*105
Enteroc.faecalis	5,88±0,16*104 (80,0%)	3,38±0,12*105
Staph. aureus	н/в	2,15±0,95*102 (40,0%)
Proteus	60,0%	20,0%
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	4,6±0,15*103	3,8±0,14*104
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	100 %
Ротавирус	20,0%	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

Таблица 23 - Микробный пейзаж толстого кишечника
телят-гипотрофиков, получавших «Пролам»

Наименование микроорганизмов	Количество
	1-е сутки	7-е сутки
Лактобациллы	4,68±0,84*107	5,64±0,08*109
Бифидумбактерии	3,8±0,97*108	5,03±0,16*1010
E. coli (лакт.+)	4,42±0,88*105	4,46±0,96*107
E. coli (лакт.-)	5,3±0,15*104 (50,0%)	5,9±0,64*105
Соотношение E. coli (лакт.+)/ E. coli (лакт.-)	8,3:1	75,6:1
Citrobacter	4,85±0,73*103 (60,0%)	4,7±0,89*103 (80,0%)
Enterobacter	3,7±0,27*103 (60,0%)	3,42±0,94*103 (80,0%)
Enteroc.faecium	2,33±0,23*104	2,9±0,3*105
Enteroc.faecalis	3,8±0,74*104 (60,0%)	2,8±0,78*105
Staph. aureus	н/в	н/в
Proteus	н/в	н/в
Staph.(saprophyt.; еpidermidis)	3,7±0,27*103	2,86±0,41*104
Клостридии	н/в	н/в
Коронавирус	н/в	40,0%
Ротавирус	40,0%	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

От интактных телят в 40,0% случаев выделяли Staph. aureus и в 20,0% - бактерии рода Proteus, которые не изолировали от телят после применения «Пролама» (табл.22,23).

В первые сутки у телят опытной и контрольной обнаруживали геном ротавируса в 40,0% и 20,0% случаев соответственно, на 7 сутки геном коронавируса в 40,0% и 100% случаев.

При изучении микробиоценоза верхних дыхательных путей в суточном возрасте у телят-гипотрофиков обнаруживали сапрофитный стафилококк, стрептококки группы С и золотистый стафилококк в 40,0% случаев, эпидермальный стафилококк в 60% случаев, стрептококки группы Д в 20,0%, эшерихии в 80,0% случаев. У телят-гипотрофиков, получавших «Пролам», выделяли сапрофитный, эпидермальный и золотистый стафилококки в 20,0% случаев, стрептококки групп С и Д и Proteus в 40,0% и в 100% случаев обнаруживали эшерихий (табл.24).

На 7-е сутки у животных после применения «Пролама» увеличилось выделение сапрофитного стафилококка до 60,0% случаев, эпидермального стафилококка до 80,0%, стрептококков группы С до 60,0%, при этом снизилась частота изоляции стрептококков группы Д, эшерихий и Proteus до 20,0%, золотистый стафилококк не обнаруживали. В 60,0% случаев от них выделяли Staph. hyicus. У интактных телят в этот период не выделяли сапрофитный стафилококк, уменьшалась частота изоляции эпидермального до 20,0% случаев, эшерихий до 60,0%, при увеличении частоты выделения стрептококков группы Д и С до 40,0% и 60,0% случаев соответственно, Кроме того от животных в этот период изолировали Staph. hyicus в 20,0%, Staph. haemoliticus в 40,0%, бактерии рода Citrobacter в 20,0% и Proteus в 100% случаев (табл.24).

Клинические наблюдения за телятами, которым применяли «Иммунофан» (вторая опытная группа) в первые дни жизни показали, что они самостоятельно поднимались через 6,2±1,5 часа, проявление сосательного рефлекса отмечали через 3,4±0,48 часа, меконий выделялся через 9,0±1,5 часа, температура тела 38,6±0,1°С; пульс 120,0±2,0/мин, частота дыхания 36,0±2,0/мин.

Таблица 24 - Микробный пейзаж верхних дыхательных путей телят-гипотрофиков
(интактные телята – числитель, телята, получавшие «Пролам» - знаменатель)

Микроорганизмы	Возраст телят
	1-е сутки	7-е сутки
Staph.saprophyticus	40% / 20%	н/в / 60%
Staph.epidermidis	60% 20%	20% 80%
Staph.hyicus	н/в н/в	20% 60%
Staph.aureus	40% 20%	40% н/в
Staph.haemoliticus	н/в н/в	40% н/в
Strept. гр. Д	20% 40%	40% 20%
Strept. гр. С	40% 40%	60% 60%
E.coli	80% 100%	60% 20%
Proteus	н/в 40%	100% 20%
Citrobacter spp.	н/в н/в	20% н/в
Pasteurella multocida	н/в н/в	н/в н/в
Mуc.Вovis	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ИРТ	н/в н/в	н/в н/в
Вирус ВД-БС	н/в н/в	н/в н/в
РС-И	н/в н/в	н/в н/в

Примечание: н/в – не выделяли.

В первые сутки желудочно-кишечные болезни в легкой форме регистрировали в 33,3% случаях со средней продолжительностью 3 дня. На 6-7 сутки диарейный синдром отмечали у 5 телят (83,3%) длительностью 4,2 дня. Тяжелое течение болезни фиксировали у одного теленка (16,6%). В молочный период желудочно-кишечную патологию в легкой форме диагностировали в 66,6% случаях длительностью 4 дня. Продолжительность диарейного синдрома составила 7,1 дня.

Респираторную патологию в молозивный период не отмечали, в молочный – регистрировали у 50% животных в легкой форме, средняя длительность болезни - 7,6 дней. Среднесуточный прирост массы тела (до 2-х месяцев) составил- 460,5±32,0г.

После перевода животных в общую группу (на 58-60 сутки) респираторную патологию в легкой форме диагностировали в 50% случаях, длительностью 7,3 дня. На протяжении всего опыта средняя продолжительность респираторных болезней составила – 7,5 суток. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов –14,6 суток.

Клинические наблюдения за телятами, которым применяли надвенное облучение (третья опытная группа) в первые дни жизни показали, что они самостоятельно поднимались через 3,2±1,2 часа, проявление сосательного рефлекса отмечали через 2,8±0,37 часа, меконий выделялся через 10,0±1,5 часа, температура тела 38,8±0,14˚С; пульс 110,7±2,0/мин, частота дыхания 36,8±0,5/мин.

Желудочно-кишечные болезни в легкой форме регистрировали у всех телят со средней продолжительностью 3 дня. В молочный период у одного теленка (20%) отмечали пневмоэнтерит с длительностью диарейного синдрома 4 и респираторного – 10 суток.

Респираторную патологию в молозивный период не отмечали, в молочный – регистрировали у 60% животных, средняя длительность болезни 18,7 дней. Тяжелое течение фиксировали у одного теленка (20%), который пал на 52 сутки, у него были обнаружены геномы вируса респираторно-синцитиальной инфекции и Mycoplasma bovis. Среднесуточный прирост массы тела (до 2-х месяцев) составил - 550,5±24,0г.

После перевода животных в общую группу (60 сутки) респираторную патологию в тяжелой форме диагностировали у одного теленка (25%), который пал через 16 дней. У животного обнаружен геном вируса респираторно-синцитиальной инфекции. На протяжении всего опыта, средняя продолжительность респираторных болезней составила – 21,5 дней. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов –25,3 суток.

Клинические наблюдения за телятами, которым применяли «Пролам» и «Иммунофан» (четвертая опытная группа) в первые дни жизни показали, что они самостоятельно поднимались через 7,2±2 часа, проявление сосательного рефлекса отмечали через 3,2±0,32 часа, меконий выделялся через 10,2±1,5 часа, температура тела 38,6±0,10С; пульс 118,0±2,0/мин, частота дыхания 38,0±2,0/мин.

В первые сутки желудочно-кишечные болезни в легкой форме регистрировали в 80% случаях со средней продолжительностью 2,25 дня. На 5-6 сутки у всех животных отмечали: выраженную гипотермию (37,8±0,23˚С), анемичность слизистых оболочек, отсутствие аппетита, расстройство пищеварения (длительность патологии -2,8 дня).

В молочный период респираторный синдром был отмечен у одного теленка (20%) в легкой форме продолжительностью 9 дней. Среднесуточный прирост массы тела (до 2-х месяцев) составил- 420,5±25,0г.

После перевода животных в общую группу (60-65 сутки) респираторную патологию в легкой форме регистрировали в 60% случаях со средней продолжительностью 10 дней. На протяжении всего опыта средняя продолжительность респираторных болезней составила – 9,8 дней. Продолжительность диарейного и респираторного синдромов –14,4 суток.

При возникновении респираторной патологии у интактных телят увеличилась частота выделения золотистого стафилококка до 60,0%, Staph. haemolyticus до 80,0%, стрептококков группы Д до 60,0%, эшерихий до 80,0%, бактерий рода Citrobacter до 100%, при снижении до 40,0% изоляции стрептококков группы С и до 60,0% Proteus, сапрофитный и эпидермальный стафилококки не обнаруживали. В 40,0% случаев у них выделяли геномы M.bovis и вируса респираторно-синцитиальной инфекции.

На 70 сутки у телят, получавших «Пролам», уменьшилось выделение сапрофитного, эпидермального стафилококков и Staph. hyicus до 20,0%, при увеличении частоты изоляции стрептококков группы Д до 60,0%, обнаруживали золотистый стафилококк в 20,0%, P. multocida и бактерии рода Citrobacter в 60,0% случаев.

При изучении микробного пейзажа верхних дыхательных путей у телят, которым применяли «Иммунофан», «Иммунофан» и «Пролам», и надвенное облучение выделяли сапрофитный стафилококк в 20,0, 40,0 и 40,0% случаев, эпидермальный стафилококк в 80,0, 80,0 и 40,0% , Staph. hyicus в 20,0%, 40,0% и 20,0% случаев соответственно, которые не обнаруживали у интактных телят.

У телят получавших «Иммунофан» изолировали стрептококки группы Д, золотистый стафилококк и бактерии рода Citrobacter в 40,0%, а также эшерихии и Proteus в 20,0% случаев.

У телят которым применяли надвенное облучение в 40,0% случаев выделяли Staph.haemoliticus, стрептококки группы С, Proteus, в 60,0% золотистый стафилококк, эшерихии, бактерии рода Citrobacter, в 20,0% стрептококки группы Д, кроме того у них обнаруживали геномы вируса респираторно-синцитиальной инфекции в 40,0% и M.bovis в 20,0% случаев.

У телят получавших «Иммунофан» и «Пролам» изолировали Staph.haemoliticus в 20,0% случаев (табл.26).

Таблица 26 - Микробный пейзаж верхних дыхательных путей телят-гипотрофиков
при респираторной патологии в возрасте 70 дней

Возбудители	интактные	Телята, которым применяли
		«Пролам»	«Иммуно-фан»	«Пролам» «Иммунофан»	Надвенное облучение
Staph. saprophyticus	н/в	20%	20%	40%	40%
Staph.epidermidis	н/в	20%	80%	80%	40%
Staph.hyicus	н/в	20%	20%	40%	20%
Staph.aureus	60%	20%	40%	н/в	60%
Staph.haemoliticus	80%	н/в	н/в	20%	40,0%
Strept. гр. Д	60%	40%	40%	н/в	20%
Strept. гр. С	40%	60%	н/в	н/в	40%
E.coli	80%	20%	20%	н/в	60%
Proteus	60%	20%	20%	н/в	40%
Citrobacter spp.	100%	60%	40%	н/в	60%
Pasteurella multocida	н/в	60%	н/в	н/в	н/в
Mуc. Вovis	40,0%	н/в	н/в	н/в	20,0%
Вирус ИРТ	н/в	н/в	н/в	н/в	н/в
Вирус ВД-БС	н/в	н/в	н/в	н/в	н/в
РСИ	40,0%	н/в	н/в	н/в	40,0%

Примечание: н/в – не выделяли.

Результаты иммунного статуса показали, что к 7 суткам у телят контрольной группы снизились БАСК на 12,4% и КАСК в 14 раз. После проведенного курса иммунокоррекции у телят, получавших «Пролам» и «Иммунофан» отмечали незначительное повышение бактерицидной активности сыворотки крови (на 7,7% и 15,1%) при снижении комплементарной активности в 2,2 и 1,7 раза соответственно, свидетельствующие об антигеном воздействии окружающей среды на организм новорожденных животных. У телят, получавших «Пролам» в сочетании с «Иммунофаном» регистрировали снижение показателей неспецифической резистентности – БАСК на 6,9%, КАСК в 3,5 раза и ЛАСК на 12,5%, связанное с развитием желудочно-кишечной патологии в этот период.

Таким образом, применение иммунокорректоров способствовали поддержанию уровня естественной резистентности в период адаптации организма новорожденных телят к новым условиям жизни и формированию иммунной системы. У животных, получавших иммунокоррегирующие средства, показатели неспецифической защиты были выше, чем у телят контрольной группы (БАСК на 5,6-26,3%, КАСК в 3,8-9,3 раза) (табл.27).

Таблица 27 - Показатели неспецифического звена
гуморального иммунитета телят-гипотрофиков

Показатели	1 сутки	7 сутки	21 сутки	60-70 сутки
	Контрольная группа
БАСК, %	77,3±2,19	67,6±2,30	71,8±2,89	69,1±1,18
КАСК, % гем.	15,4±0,3	1,1±0,13	6,5±0,6	11,4±2,50
ЛАСК, мг/мл	1,6±0,05	1,6±0,15	2,1±0,46	2,1±0,25
Телята, получавшие «Пролам»
БАСК, %	71,1±6,08	76,6±6,17	н/и	85,6±4,47
КАСК, % гем.	10,8±3,40	4,9±1,11	н/и	9,5±2,95
ЛАСК, мг/мл	1,6±0,03	1,5±0,04	н/и	1,8±0,05
Телята, получавшие «Иммунофан»
БАСК, %	74,2±1,20	85,4±2,97	н/и	86,1±1,90
КАСК, % гем.	17,1±1,18	10,2±1,31	н/и	12,6±2,52
ЛАСК, мг/мл	1,8±0,08	1,7±0,08	н/и	2,2±0,39
Телята, получавшие «Иммунофан» и «Пролам»
БАСК, %	76,5±1,93	71,2±1,02	н/и	85,2±1,80
КАСК, % гем.	14,7±2,61	4,2±0,45	н/и	12,4±1,50
ЛАСК, мг/мл	1,6±0,01	1,4±0,21	н/и	2,4±0,53
Телята, которым применяли надвенное облучение
БАСК, %	84,2±2,79	н/и	82,8±1,74	83,0±2,23
КАСК, % гем.	6,1±0,98	н/и	3,8±0,62	5,2±0,38
ЛАСК, мг/мл	1,8±0,11	н/и	1,6±0,03	1,6±0,04

У телят после проведенного физического метода коррекции иммунитета (надвенное облучение) бактерицидная активность сыворотки крови не изменялась и была на 15,3% выше, чем у телят контрольной группы, комплементарная и лизоцимная активность, напротив, снизились на 39,5 и 11,1% и были ниже в 1,7 и 1,3 раза соответственно, чем у животных группы сравнения (табл.27).

На 60-70 сутки при возникновении и развитии респираторной патологии у телят, получавших «Иммунофан» и «Иммунофан» в сочетании с «Проламом» бактерицидная, комплементарная и лизоцимная активности сыворотки крови были выше на 24,6, 10,5 и 9,5% соответственно, чем у животных группы сравнения. У телят, которым применяли только пробиотик и надвенное облучение, при более высоком уровне БАСК (на 24,1 и 20,3%) по сравнению с контролем были ниже комплементарная и лизоцимная активности сыворотки крови на 16,7% и в 2,2 раза и на 14,3 и 23,8% соответственно, что указывает на повышенный расход белков системы комплемента и лизоцима в ответ на возросшую антигенную нагрузку.

Таким образом, у телят, получавших «Иммунофан», поддержание естественной резистентности в период формирования иммунной системы и стимуляция и коррекция ее в момент возникновения и развития респираторной патологии были более выраженными, чем у животных, которым применяли другие методы коррекции.

Таблица 28 - Содержание антител в сыворотке крови телят к возбудителям
желудочно-кишечных и респираторных болезней

Показатели	1 сутки	7 сутки	21 сутки	60-70 сутки
	Телята, получавшие «Пролам»
ротавирусу	26,5±1,96	63,8±2,79	н/и	н/и
коронавирусу	20,9±1,74	66,1±3,21	н/и	н/и
ВД-БС	20,7±0,72	48,0±1,14	н/и	52,4±1,4
вирусу РСИ	106,2±2,14	124,5±0,52	н/и	108,5±11,54
вирусу ИРТ	89,3±13,44	107,8±17,89	н/и	51,3±13,21
Телята, получавшие «Иммунофан»
ротавирусу	20,1±0,72	57,4±1,56	н/и	н/и
коронавирусу	18,5±0,92	64,2±1,13	н/и	н/и
ВД-БС	19,5±0,61	55,5±1,06	н/и	47,5±1,06
вирусу РСИ	107,9±9,5	122,9±2,39	н/и	97,7±10,49
вирусу ИРТ	98,5±12,35	93,3±10,88	н/и	51,2±7,63
Телята, получавшие «Пролам» и «Иммунофан»
ротавирусу	32,4±0,75	71,8±1,952	н/и	н/и
коронавирусу	28,2±0,97	72,7±1,05	н/и	н/и
ВД-БС	31,6±0,91	74,1±0,56	н/и	65,9±0,96
вирусу РСИ	101,2±3,64	123,2±0,94	н/и	111,7±5,43
вирусу ИРТ	80,8±15,94	91,7±13,02	н/и	19,1±2,68
Телята, подвергнутые надвенному облучению
ротавирусу	26,5±1,96	н/и	н/и	н/и
коронавирусу	20,9±1,74	н/и	н/и	н/и
ВД-БС	26,1±0,66	н/и	71,7±1,31	68,0±1,04
вирусу РСИ	124,2±0,5	н/и	126,5±0,34	122,7±0,85
вирусу ИРТ	107,4±3,94	н/и	98,1±7,89	45,9±9,63
Телята контрольной группы
ротавирусу	31,1±1,06	88,4±0,68	н/и	н/и
коронавирусу	31,8±0,45	96,7±0,6	н/и	н/и
ВД-БС	31,2±1,32	84,6±1,06	79,2±1,59	73,3±1,76
вирусу РСИ	99,3±9,67	104,5±18,48	99,6±23,28	71,2±25,68
вирусу ИРТ	55,5±17,14	52,9±18,9	39,9±21,4	39,3±18,29

Примечание: н/в – не выделяли.

При исследовании содержания антител к наиболее распространенным вирусным возбудителям желудочно-кишечных и респираторных болезней телят установлено, что к 7 суткам титры антител к рота-, коронавирусу и вирусу диареи и болезни слизистых повышались у телят всех групп, что свидетельствует о циркуляции возбудителей среди животных. Выделение геномов рота- и коронавируса от больных телят указывает на участие их в желудочно-кишечной патологии. Высокие титры антител к антигенам вирусов РСИ и ИРТ свидетельствуют об их колостральном происхождении и циркуляции возбудителей респираторной патологии среди поголовья коров-матерей. При этом содержание антител к указанным возбудителям у телят, которым применялись иммунокоррегирующие средства, были выше на 16,1% (к вирусу РСИ) и в 2,1 раза (к вирусу ИРТ), что свидетельствует лучшей всасываемости иммуноглобулинов из молозива.

При возникновении и развитии респираторной патологии титры антител к антигенам вирусов РСИ и ИРТ снижались у животных всех групп, что связано с расходованием иммуноглобулинов для элиминации указанных возбудителей из организма больных телят. При этом содержание антител к вирусу РСИ у животных, которым применяли иммунокоррегирующие средства, было выше на 33,9-42%, чем у телят контрольной группы. Снижение антител к вирусу ИРТ у животных всех групп указывает на отсутствие циркуляции возбудителя среди телят.

Для изучения иммунокоррегирующего действия примененных в опыте средств были проведены исследования по их влиянию на синтез и экспрессию генов цитокинов лейкоцитами крови стимулированных Staphylococcus aureus и Salmonella dublin. Установлено, что к 7 суткам у телят всех групп снижалась концентрация α-ФНО, при этом у животных, получавших «Иммунофан» и «Пролам», его концентрация была минимальна, а у телят, которым использовали «Иммунофан» в сочетании с «Проламом», в связи с проявлением желудочно-кишечной патологии снижение содержания указанного медиатора было менее выраженным, однако уровень его был ниже, чем у телят интактной группы.

В этот период снижалось выделение другого провоспалительного цитокина – интерлейкина-8, отвечающего за стимуляцию нейтрофилов, у животных, получавших «Пролам», «Пролам» в сочетании с «Иммунофаном» и контрольной группы, что указывает на недостаточную иммунную реакцию на антигенное воздействие. У телят, получавших «Иммунофан», в отличие от животных других групп, суточное воздействие на иммунокомпетентные клетки антигенов золотистого стафилококка и сальмонеллы приводило к потенцированию синтеза указанного интерлейкина, что способствовало активации клеточного звена иммунитета (табл.29,30).

Таблица 29 - Концентрация цитокинов в сыворотке крови телят
при суточной стимуляции Staphylococcus aureus (пг/мл)

Препараты	α-ФНО		ИЛ -1		ИЛ-2		ИЛ-4		ИЛ-8		ИЛ-10
	Возраст, сут.
	1	7-10	1	7-10	1	7-10	1	7-10	1	7-10	1	7-10
«Пролам»	25,3± 5,8	0,98± 0,66	4,3± 1,79	9,5± 2,92	61,7± 25,56	0	0,91± 0,38	2,6± 0,42	17,2± 4,69	11,3± 1,87	3,3± 0,84	3,6± 0,98
«Иммунофан»	18,9± 8,61	0	11,5± 5,95	17,4± 4,9	31,1± 19,06	30,9± 9,02	1,4± 0,39	1,8± 0,08	4,8± 1,69	16,0± 2,85	3,9± 0,14	3,7± 0,04
«Пролам» Иммунофан»	43,2± 2,35	21,3± 9,77	0,37± 0,24	6,1± 4,67	21,3± 9,94	10,4± 6,14	1,8± 0,57	2,4± 0,23	33,4± 3,49	14,9± 1,53	2,5± 0,9	4,5± 0,42
Интактные	42,3± 4,56	26,9± 8,08	1,1± 1,03	7,1± 3,19	18,3± 8,19	9,9± 6,71	1,8± 0,4	1,9± 0,34	21,6± 5,31	13,5± 2,59	2,1± 1,34	4,5± 0,37

При исследовании содержания интерлейкина-1 при стимуляции клеток антигенами стафилококка и сальмонелл установлены существенные различия. Воздействие сальмонелл на иммунокомпетентные клетки приводило к уменьшению синтеза и выделения медиатора к 7 суткам у телят всех групп, более выраженному у животных после проведения иммунокоррекции. Стимуляция лейкоцитов крови золотистым стафилококком, напротив, приводило к повышению выделения интерлейкина-1, активация синтеза которого в большей степени проявилась у животных, получавших «Пролам» в сочетании с «Иммунофаном» и телят контрольной группы.

Указанные различия в воздействии стафилококка и сальмонелл на синтез интерлейкина-1 обусловлены большей иммунореактивностью антигенов последних, что способствует быстрому переходу от воспалительной реакции к клеточному иммунному ответу. Об этом свидетельствует увеличение концентрации в ответ на стимуляцию клетками сальмонелл интерлейкина-2, повышающего цитолитическую функцию Т-киллеров и натуральных киллеров, продукцию перфоринов, участвующих в лизисе бактериальных клеток, и активирующего макрофаги. Воздействие стафилококка приводило к снижению выделения цитокина у телят всех групп, кроме животных после применения «Иммунофана», у которых он оставался на том же уровне.

Таблица 30 - Концентрация цитокинов в сыворотке крови телят
при суточной стимуляции Salmonella dublin (пг/мл)

Препараты	α-ФНО		ИЛ -1		ИЛ-2		ИЛ-4		ИЛ-8		ИЛ-10
	Возраст, сут.
	1	7-10	1	7-10	1	7-10	1	7-10	1	7-10	1	7-10
«Пролам»	69,9± 0,63	19,2± 3,74	47,0± 10,3	38,1± 7,98	66,3± 15,2	79,6± 20,28	3,9± 0,98	1,7± 0,12	47,6± 3,46	37,5± 3,71	0	19,3± 8,18
«Иммунофан»	61,0± 2,86	16,5± 2,3	31,1± 4,32	17,6± 1,95	97,3± 13,76	145,0± 38,2	1,5± 0,23	1,1± 0,17	34,5± 3,39	42,5± 1,05	1,9± 1,85	40,6± 3,65
«Пролам» «Иммунофан»	69,9± 3,82	32,1± 4,37	69,0± 2,91	26,3± 1,2	68,7± 13,88	55,3± 12,35	6,5± 0,81	2,5± 0,34	48,4± 2,26	41,2± 2,25	1,6± 0,81	4,5± 1,32
Интактные	59,1± 4,04	46,7± 4,26	58,9± 7,26	47,9± 8,58	45,8± 9,66	97,5± 23,4	5,0± 0,52	4,7± 1,43	43,9± 4,78	35,5± 3,42	8,7± 3,24	10,9± 6,38

Повышение содержания интерлейкина-2 при стимуляции сальмонеллами приводило к снижению концентрации интерлейкина-4, отвечающий в большей степени за гуморальный иммунитет и синтез иммуноглобулинов В-лимфоцитами. Активация выделения последнего у телят после проведенной иммунокоррекции при воздействии стафилококка объясняется большей частотой и длительностью контакта телят с микроорганизмом и наличием в крови специфических В-клеток и клеток памяти (табл.29,30).

Повышение содержания интерлейкина-10 у телят всех групп при воздействии антигенов бактерий обусловлено необходимостью снижения воспалительной реакции организма животных на присутствие патогенов. У телят, получавших «Иммунофан» стимуляция стафилококком не вызывала подобный эффект, что, при активации выделения интерлейкина-8 и стабильном синтезе интерлейкина-2, свидетельствует о более выраженной клеточной реакции.

Рисунок 1 - Экспрессия генов цитокинов в лейкоцитах крови телят, получавших «Иммунофан», после суточной стимуляции антигенами микроорганизмов

При исследовании экспрессии генов провоспалительных цитокинов и рецепторов иммунокомпетентных клеток установлено, что у телят после применения коррегирующих средств происходила активация генов, кодирующих Тулл-подобные рецепторы 2 и 4 типов, и провоспалительных цитокинов (интерлейкина-1 и фактора некроза опухоли).

У телят, получавших «Иммунофан» экспрессия генов цитокинов, стимулирующих клеточную реакцию – интерлейкина-8 и интерлейкина-12, была более выражена, чем у животных, которым применяли «Пролам» и «Пролам» с «Иммунофаном», что, вероятно, обусловлено положительным действием «Пролама» на микробиоценоз кишечника, способствующим коррекции иммунитета, направленной на уменьшение роли клеточного и увеличение гуморального иммунного ответа (рис.1-4).

Рисунок 2 - Экспрессия генов цитокинов в лейкоцитах крови телят, получавших «Пролам» и «Иммунофан», после суточной стимуляции антигенами микроорганизмов

У телят интактной группы экспрессия генов провоспалительных цитокинов и рецепторов в ответ на стимуляцию антигенами микроорганизмов была ниже, чем у животных, которым применялись иммунокорректоры, что свидетельствует о менее выраженной реакции на антигенное воздействие.

Рисунок 3 - Экспрессия генов цитокинов в лейкоцитах крови телят,
получавших «Пролам», после суточной стимуляции антигенами микроорганизмов

Рисунок 4 - Экспрессия генов цитокинов в лейкоцитах крови телят контрольной группы после суточной стимуляции антигенами микроорганизмов.

Выявленный менее выраженный ответ лейкоцитов крови в ответ на воздействие стафилококка, проявляющийся меньшим синтезом и выделением цитокинов и экспрессией генов при снижении факторов неспецифической резистентности может приводить к торможению иммунной реакции на возрастание антигенной нагрузки.