Морфологические изменения пищеварительных желез и двенадцатиперстной кишки у телят при введении в рацион пробиотика Бацелл

М.Н.Гагарина
аспирант
Л.И.Дроздова
доктор ветеринарных наук
Уральская государственная сельскохозяйственная академия, Екатеринбург

Декабрь 2011

Пробиотики — это средства, восстанавливающие микробиоценозы. Согласно определению ВОЗ/FАО, пробиотики — это живые микроорганизмы, оказывающие оздоровительный эффект на организм животных[2].

Новым этапом осмысления наработок по вопросам применения пробиотиков явился Всемирный конгресс по гастроэнтерологии в Монреале, состоявшийся в 2005 году. В одном из докладов было дано определение пробиотиков как препаратов на основе кишечных комменсалов, способных осуществлять биологический контроль в организме и обладающих регуляторными, триггерными свойствами (пусковыми)[3].

Такой потенциал объясняется многочисленными метаболическими эффектами нормальной микрофлоры, прежде всего кишечника, включая синтез витаминов В и К, короткоцепочечных жирных кислот, инактивацию пищевых канцерогенов, бакте¬риальную ферментацию некоторых лекарственных препаратов, синтез сигнальных молекул и др.[5].

Одной из уникальных систем, обеспечивающих постоянство внутренней среды макроорганизма, является кишечная микрофлора. Наличие в кишечнике сбалансированного соотношения и оптимального количества аэробных и анаэробных микроорганизмов обеспечивает неспецифическую защиту организма животных от бактерий, вызывающих кишечные инфекции, способствует выработке факторов иммунной защиты. Именно кишечной микрофлоре принадлежит важная роль в нормальной кишечной перистальтике, а также в расщеплении и всасывании продуктов обмена липоидов, белков и углеводов[4].

Таким образом, пробиотики являются эффективным лечебно-профилактическим средством. Накопленный фактический материал и многочисленные научные публикации последних лет свидетельствуют о том, что характерной чертой современной инфекционной патологии молодняка является неукоснительный рост оппортунистических кишечных инфекций, возбудителями которых являются условно-патогенные бактерии. Эти микроорганизмы, циркулируя в хозяйствах, обладают широким спектром вирулентности (энтеротоксигенности, адгезивности, гемолитической активности, антибиотикоустойчивости)[2].

На фоне дефицита нормальной кишечной микрофлоры и ее низких защитных характеристик под прессингом энтеробактерий происходит прорыв барьеров слизистой кишечника и проникновение их в кровь, и паренхиматозные органы. Накоплены многочисленные факты о проницаемости слизистой кишечника для микроорганизмов, постоянной миграции бактерий в кровь в составе макрофагов, о транслокации под действием большого числа факторов, в результате чего у животного с ослабленной иммунной системой развивается генерализованная инфекция. Переболевшие животные отстают в росте и развитии, и длительное время могут быть скрытыми носителями условно-патогенных бактерий.

В результате постоянного попадания бактерий во внутреннюю среду, в крови животных накапливается промежуточные и конечные продукты фагоцитоза, чужеродные молекулы, представляющие собой компоненты клеточных стенок микроорганизмов, а также низкомолекулярные соединения микробного происхождения, которые блокируют факторы естественной резистентности организма. Кормовая добавка Бацелл способна расти и размножаться в желудочно-кишечном тракте теплокровных животных, нормализовать микрофлору кишечника, гидролизировать растительные полисахариды[4].

Цель нашего исследования заключалась в выявлении морфологических изменений в органах пищеварительной системы телят опытной и контрольной групп при введении в их рацион пробиотика Бацелл.

Мы изучили морфологические особенности распределения лимфоидного аппарата кишечника и его количественное соотношение у телят разного возраста при введении в рацион пробиотика Бацелл. Изучили гистологические изменения в печени и поджелудочной железе опытной группы телят под влиянием пробиотика Бацелл. А также оценили влияние пробиотика на биохимические показатели крови у телят и на среднесуточный прирост живой массы.

Опыт был проведен в ООО «Агрофирма «Черданская».

Были сформированы две группы телят черно-пестрой породы с живой массой 67кг, в возрасте от 14 дней до 1 месяца, по 9 голов в каждой.

Телятам опытной группы добавляли в основной рацион пробиотик Бацелл в дозе 20г на голову в сутки до 2-х месячного возраста, и 40г с 2-х до 8-ми месячного возраста. Контрольная группа животных получала рацион, предусмотренный в хозяйстве.

Через каждые два месяца проводили убой бычков и взятие кусочков поджелудочной железы, печени и 12-перстной кишки, которые фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Обработку, заливку в парафин, приготовление гистологических срезов и окрашивание гематоксилином и эозином и по Ван-Гизону проводили на кафедре анатомии и гистологии УрГСХА. Просмотр и фотографирование препаратов осуществляли с использованием микроскопа Мюгоз Аизита.

До начала скармливания пробиотика было проведено фоновое исследование крови, далее исследовали кровь через 120 дней, 240 дней. Взятие крови из яремной вены осуществляли утром, перед кормлением. Исследования проводили в Областной ветеринарной лаборатории г. Екатеринбурга.

В крови определяли содержание резервной щелочности, глюкозы, общего белка %, кальця и фосфора. Ежемесячно проводили взвешивание животных.

При сравнительном гистологическом исследовании препаратов 12-перстной кишки бычков при одном и том же увеличении (10×20), было подсчитано количество лимфоидных фолликулов на единицу площади. Их количество у телят опытной группы было большим по сравнению с контрольной. В начале опыта на срезах площадью 1,05см² в опытной группе лимфоидных фолликулов не было обнаружено, а в контрольной группе на площадь среза 1,92см² — 12 лимфоидных фолликулов.

В середине опыта произошли следующие изменения: так в опытной группе на площадь среза 2,22см² количество лимфоидных фолликулов составляло 14, а в контрольной группе на площадь среза 1,85см² — 3 лимфоидных фолликула. В конце опыта также наблюдалась разница в количестве фолликулов между опытной и контрольной группами. В опытной группе на единицу площади среза количество фолликулов составляло 3, а в контрольной группе — 1 фолликул.

В процессе опыта в печени бычков опытной и контрольной группы на первых этапах применения пробиотика Бацелл не было выявлено существенных отличий. Наиболее яркие изменения были отмечены у телят опытной группы, начиная с 4-5-месячного возраста. Ярким признаком, выраженной иммуноморфологической реакции было появление лимфоидно-клеточной инфильтрации по типу лимфоидных фолликулов. При этом печеночные балки и клетки в них были четко контурированы с хорошо выраженными одинаковой величины ядрами и зернами хроматина в них. Явление апоптоза было практически сведено к минимуму. Реакция клеток ретикуло-гистиоцитарной системы была равномерно выражена у всех животных до окончания опыта. Изменений, характерных для нарушения кровообращения, которые постоянно регистрировались у животных контрольных групп, у телят опытной группы не отмечено. У телят контрольной группы было отмечено увеличение количества и активизации клеток ретикулогистиоцитарной системы печени. Разрастание соединительной ткани в системе триады и наличие значительного количества лейкоцитов в венозной системе, как в области триады, так и в собирательной системе. При этом в печеночных клетках грубых нарушений нами отмечено не было. В нескольких случаях были выявлены процессы нарушения белкового обмена в виде зернистой дистрофии и жирового обмена в виде мелкокапельной дистрофии в печеночных клетках портальных трактов.

Поджелудочная железа телят секретирует непрерывно. В опытах проведенных Н.Ф.Поповым, Е.И.Шмаковым, В.Н.Кузнецовым (1934) на телятах, у которых был выведен проток поджелудочной железы в 5-6-месячном возрасте, установлено наличие рефлекторной фазы поджелудочной секреции. Деятельность поджелудочной железы меняется в зависимости от количества и свойства поступающей пищи. Нами в процессе опыта при гистологическом исследовании и сравнении срезов поджелудочной железы бычков при одном и том же увеличении (10×20), количество островков Лангерганса было большим у опытной группы по сравнению с контрольной. Максимальное количество островков Лангерганса в одном поле зрения было обнаружено у опытных животных. В некоторых случаях их было от четырех и более, тогда как у контрольных животных их было не более двух. В начале опыта на срезах площадью 0,44см² количество островков Лангерганса составляло 55 островков в опытной группе, а в контрольной группе на площадь среза 1,19см² — 15 островков, то есть на единицу площади в опытной группе количество составляло 125 островков, а в контрольной группе — 13. В середине опыта количество островков Лангерганса уменьшилось в опытной группе и составило на единицу площади среза 15 островков, а в контрольной группе — 11, то есть в опытной больше на 33,3%. В конце опыта на единицу площади среза количество островков в опытной группе составило 55, а в контрольной группе — 34 соответственно количество их в опытной группе было больше на 38%, по сравнению с контрольной группой.

Анализ результатов биохимических исследований крови полученных нами показал следующее:

• при исследовании крови телят опытных и контрольных групп было обнаружено, что резервная щелочность к концу опыта у телят опытной группы увеличилась на 3,6% по сравнению с контрольной;
• интенсивность усвоения общего белка в опытной группе незначительно увеличилась к концу опыта на 4%;
• при исследовании глюкозы в крови опытных и контрольных животных было обнаружено, что улучшения усвоения глюкозы у телят опытной группы не произошло;
• перед началом скармливания пробиотика Бацелл уровень фосфора в крови бычков контрольной группы составлял 6,78 мг/мл, а в опытной группе равен 7,12 мг/мл. Через 3 месяца произошло снижение данного показателя на 28,3% и 19,2% соответственно. В конце опыта так же наблюдалось снижение показателя в контрольной группе на 5,6%, а в опытной группе на 1,3.

Таблица 1 - Содержание фосфора в крови бычков, М ± м

^*р<0,5
Норма=4,5–6,0 мг/мл

В начале эксперимента содержание кальция в крови бычков контрольной группы составляло 10,4 мг/мл, в опытной группе 10,5 мг/мл. К концу 4 месяца произошло увеличение в контрольной группе на 3,3%, а в опытной группе данный показатель остался неизменным. Через 8 месяцев также произошло увеличение этого показателя в контрольной группе — 10,9 мг/мл, а в опытной — 11,56 мг/мл. Так за весь период наблюдения в контрольной группе увеличение кальция составило 4,8% и в опытной группе 10%.

Контрольные взвешивания телят опытной и контрольной групп показали следующее:

Весовые показатели телят опытной и контрольной групп
■ опыт группа
□ контр группа

Положительные сдвиги в физиологических процессах пищеварения и внутренней среде под влиянием препарата Бацелл существенно отразились на увеличении среднесуточного прироста молодняка опытной группы на 21%.

При гистологическом исследовании двенадцатиперстной кишки у телят опытной группы, в рационе которых был использован пробиотик Бацелл, было выявлено увеличение количества лимфоидных фолликулов на единицу площади среза на протяжении всего опыта. Морфологическая реакция печени свидетельствует о положительном воздействии пробиотика. При гистологическом исследовании поджелудочной железы у опытных телят было выявлено увеличение количества панкреатических островков на единицу площади срезов. Было выявлено увеличение площади каждого из островков у животных опытной группы. Это свидетельствует о том, что пробиотик Бацелл усиливает функцию поджелудочной железы, что положительно сказывается на процессе переваривания и усвоения корма и обеспечивает неспецифическую защиту организма животных от бактерий, вызывающих кишечные инфекции. Вследствие этого происходит увеличение среднесуточного прироста.

Литература

1. Д. А. Морозов, А. А. Свистунов, О. Л. Морозова и др. Применение пробиотиков в комплекс¬ ном лечении хронического обструктивного пиелонефрита у детей// Лечащий врач. — 2010. — №1.-С. 89–92.

2. Б. А. Шендеров Медицинская микробная экология и функциональное питание. Т. 3. Пробиотики и функциональное питание. — М.: ГРАНТЪ, 2001. — 286 с.

4. Жимулев И. Ф. Общая и молекулярная генетика. — Новосибирск: Издательство Новосибирского университета, 2002. — 1. — 459 с.