Руководство
по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов
Руководство подготовили:
А.Ю.Лошманова, м.н.с.; Н.А. Безбородова, к.б.н. , с.н.с.; Н.Н.Беспамятных, м.н.с.; Н.В.Кисислева, с.н.с.; Е.Н.Беспамятных, к.б.н. , с.н.с., Бусыгин П. аспирант - отдел ветеринарно-лабораторной диагностики с испытательной лабораторией, И.А.Лебедева - д.б.н.,с.н.с. отдел экологии и иммунопатологии
Введение
В настоящее время в животноводстве и птицеводстве одной из актуальных является проблема микотоксикозов - специфических заболеваний, возникающих в результате поедания животными кормов, поражённых токсическими метаболитами плесневых грибов (Петрович С.В., 1991).
Совсем недавно ФАО (Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединённых Наций) констатировала, что 25% зерна, которое производится в мире, заражено микотоксинами. Вполне возможно, что этот показатель несколько занижен (Э.К.Папуниди и соавт., 2007).
Американская компания Pioneer Hi-Bred International, которая занимается выведением новых сельскохозяйственных культур уже более 85 лет, сообщает, что 95% микотоксинов находятся именно в урожае (Л.Г.Бурдов и соавт., 2011; А.В.Иванов и соавт., 2008; В.А. Антипов и соавт., 2007). В России загрязненность фуражного зерна составляет в среднем 39,5 - 74,7%. В Западной Сибири этот показатель для некоторых видов грибов достигает 85,3%, при этом количество токсичных и остротоксичных изолятов может превышать 70 - 80 % (Н.А.Солдатенко и соавт., 2008).
По данным Министерства сельского хозяйства Российской Федерации, агентства по сельскому хозяйству управления ветеринарии, результаты микологического анализа показали, что поражение микотоксинами зерна имеет место во всех обследованных регионах Российской Федерации (К.П.Кононенко и соавт., 2005; М.Я. Тремасов, 2005).
Результаты обследования зерна пшеницы, ячменя, овса и ржи в Российских регионах, выполненные за период 1995-2002гг., составили пораженность по Т-2 токсину в Уральском регионе - 36,4%, Заподно-Сибирском - 37,7%, Восточно-Сибирском - 10,6% и Дальневосточном регионе - 30,5%. Общими для всех регионов были наибольшая частота обнаружения Т-2-токсина в зерне овса и преобладание диапазона содержаний 10-100мкг/кг. В Уральском, Западно-Сибирском и Восточно-Сибирском регионах достаточно часто встречалось фоновое загрязнение менее 10мкг/кг в 24-36% проб от числа положительных (К.П.Кононенко и соавт., 2005).
В Уральском регионе экологическая обстановка, связанная с высоким уровнем концентрации промышленных предприятий (загрязнением окружающей среды тяжелыми металлами, радионуклидами и т.д.), во многом способствует образованию микотоксинов, которыми поражены корма и сырье (Донник И.М. и соавт., 2008).
В период с 2006 по 2009 год на базе ГНУ Уральского НИВИ Россельхозакадемии был проведен мониторинг кормов и сырья на наличие микотоксинов, который показал, что поступавшие пробы на 34% поражены опасными метаболитами плесневых грибов. Наиболее часто в кормах и сырье обнаруживали Т-2 токсин - 38%, охратоксин - 20%, зеараленон - 39%, ДОН - 11%, афлатоксин - 21% и фуманизин - 10% . Полученные данные способствовали дальнейшему проведению мониторинга кормов и сырья, поступающих на исследование микотоксинов с предприятий и хозяйств, расположенных на территории Среднего Урала.
Таким образом, микотоксикозы - это чрезвычайно значимая проблема, требующая проведения мониторинга кормов и сырья, изучения видового состава, распространения и контаминации плесневых грибов в кормах и комбикормовом сырье, а так же изучения особенностей клинического проявления микотоксикозов, эффективности сорбирующих и инактивирующих препаратов для разработки руководства по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от действия метаболитов плесневых грибов.
Среди незаразных заболеваний сельскохозяйственных животных значительное место занимают микотоксикозы - отравления, возникающие при скармливании животным кормов, пораженных токсичными метаболитами плесневых грибов (С.В.Петрович, 1991; В.А.Антипов, 2006). Эта проблема находится в центре внимания таких авторитетных международных организаций, как Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ), Продовольственная и сельскохозяйственная организация ООН (ФАО), Программа ООН по окружающей среде (ЮНЕП), Международное агентство по исследованию рака (МАИР) и др. Она несёт в себе значительную угрозу загрязнения окружающей среды и возникновения токсикозов сельскохозяйственных животных и человека (Р.Р.Доминов, 2003; А.А.Воробьёв, 2006).
Микотоксины наносят огромный экономический вред животноводству и птицеводству во всём мире. Рост плесневых грибов снижает питательную ценность корма, ухудшая его потребление, что приводит к падению продуктивности животных (Т.Бекесова, 2003).
В настоящее время известно более 300 различных микотоксинов, потребление которых с кормами и кормовым сырьём приводит к токсическому эффекту различной степени у млекопитающих и птиц (В.А.Тутельян и соавт., 1985; Д.Диаза, 2006). Сегодня, необходимо искать защиту не от одного, двух, а от целого ряда микотоксинов и число их постоянно растет. К тому же в зараженных кормах и кормовом сырье они, как правило, находятся в сочетании, взаимно усиливая действие, друг друга (Б.Н.Хмелёвский и соавт., 1985; Р.Х.Хусяинов и соавт., 2004).
Многие микотоксины обладают мутагенными, канцерогенными и иммуносупрессивными свойствами, и опасны для животных и человека (Н.Г.Бурдов, 2007). Токсические эффекты их весьма разнообразны и зависят от дозы токсина, продолжительности введения, вида, возраста животного, пола, физиологического статуса (Н.А.Солдатенко и соавт., 2008). Различные виды и концентрация микотоксинов варьируют каждый год, что связано с годовыми изменениями погодных условий и другими экологическими факторами (Э.К.Папуниди и соавт., 2007; А.В. Иванов и соавт., 2008).
Проблема микотоксикозов действительно значительная, и новые знания в этой области актуальны как никогда (Диаза Д., 2006). Для того чтобы борьба с микотоксикозами животных, была более эффективной необходимо дальнейшее изучение и совершенствование средств и способов защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов, проведение систематического мониторинга на наличие микотоксинов в кормах и сырье, производимых на комбикормовых предприятиях и используемых на животноводческих комплексах на территории Среднего Урала.
1. Мониторинговые исследования кормов и кормового сырья на территории Урала
Для определения степени зараженности кормов и сырья микотоксинами иммуноферментному анализу было подвергнуто 886 проб в период с 2006 по 1-2 квартал 2012 года.
Проведенными исследованиями установлено, что пробы сырья, поступившие в декабре 2006 года, были на 100% контаминированы несколькими видами микотоксинов, не превышающими максимально допустимых уровней (МДУ).
В 2007 году пораженность кормов и кормового сырья составила 53%. Выделенные микотоксины имели разные уровни накопления: Т-2 токсин от 0,1 до 6,84мг/кг; охратоксин от 3,0 до 19,8мг/кг; зеараленон от 1,3 до 1,7мг/кг; фуманизин от 1,0 до 1,4мг/кг; афлатоксин от 0,01 до 0,6мг/кг и ДОН от 2,4 до 21,0мг/кг. Доминирующими видами микотоксинов в пробах стали Т-2 токсин (превышение МДУ в 68,4 раза), охратоксин (превышение МДУ в 396 раза), афлатоксин (превышение МДУ в 24,4 раза) и ДОН (превышение МДУ в 10,5 раз).
В 2008 году выявлено 27% проб, пораженных микотоксинами, с сочетанием различных микотоксинов и превышением максимально допустимых уровней по микотоксину ДОН в 1,7 раза и Т-2 токсину в 1,3 раза, но при этом с доминированием в пораженных образцах зеараленона, без превышения максимально допустимых уровней (МДУ). В пробах наблюдались разные концентрации микотоксинов: Т-2 токсин в концентрации - 0,13мг/кг; ДОН от 2,18 до 3,41мг/кг; охратоксин - 0,002мг/кг; зеараленон - 0,5мг/кг; афлатоксин - 0,001мг/кг.
Контаминация микотоксинами кормов и комбикормового сырья в 2009 году составила 16% с превышением максимально допустимых уровней: охратоксина в 2,6 раза, Т-2 токсина в 28 раз и фуманизина в 1,5 раза. Уровни накопления микотоксинов составили: Т-2 токсин от 0,1мг/кг до 2,8мг/кг, охратоксин от 0,05мг/кг до 0,13мг/кг, фуманизин от 1мг/кг до 1,5мг/кг.
Пораженность микотоксинами кормов и сырья в 2010 году составила 4,3% с превышением максимально допустимых уровней: охратоксина в 79,4 раза, Т-2 токсина в 3 раза, афлатоксина в 11,2 раза, фуманизина в 1,5 раза. Обнаруженные микотоксины содержали различные уровни накопления: охратоксин от 0,05мг/кг до 3,97мг/кг, Т - 2 токсин от 0,125мг/кг до 0,3мг/кг, афлатоксин от 0,025мг/кг до 0,28мг/кг, фуманизин от 1,0мг/кг до 2,5мг/кг.
В 2011 году в 37,9% проб были обнаружены токсигенные метаболиты плесневых грибов с превышением максимально допустимых уровней по микотоксину ДОН в 2,8 раза. Обнаруженные микотоксины представляли различные уровни накопления: микотоксина ДОН от 1,61мг/кг до 2,8мг/кг, Т - 2 токсин от 0,02мг/кг до 0,1мг/кг. В 100% поступивших проб были найдены следы микотоксинов, не превышающих максимально допустимые уровни, с сочетанием до 6 различных видов опасных метаболитов грибов в одном образце. Однако, следует отметить, что даже небольшие концентрации микотоксинов, способны накапливаться в органах и тканях, вызывая микотоксикозы сельскохозяйственных животных.
В 1-2 квартале 2012 года контаминация микотоксинами составила 65,8% с превышением максимально допустимых уровней: ДОН и Т-2 токсина в 2 раза; афлатоксина в 3 раза. Наблюдали различные уровни накопления микотоксинов: ДОН от 1,3мг/кг до 2мг/кг, Т - 2 токсин от 0,1мг/кг до 0,2мг/кг, афлатоксин от 0,025мг/кг до 0,075мг/кг. В пробах доминировали Т-2 токсин и ДОН.
Таким образом, пораженность микотоксинами проб с 2006 по 1-2 квартал 2012 года составила в среднем 22,4%: Т-2 токсином - 14%; зеараленоном - 4%, фуманизином - 2,6%; ДОН - 1%; афлатоксином - 1%.
Данные по пораженности микотоксинами кормов и сырья представлены на рисунках 1 и 2.
Рисунок 1 - Контаминация проб микотоксинами с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года
Рисунок 2 - Контаминация кормов и сырья различными видами опасных продуцентов плесневых грибов с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года
Одновременно проведен анализ степени пораженности различных видов кормов и сырья метаболитами плесневых грибов (табл. 1).
Таблица 1 - Уровень пораженности различных видов кормов микотоксинами, n=886
| Виды кормов | Количество проб корма, пораженных микотоксинами от общего числа поступивших проб, % | Количество проб корма, пораженных микотоксинами от числа пораженных проб, % |
|---|---|---|
| Комбикорма (n=99): - полнорационный комбикорм - кормовые смеси - премиксы - концентраты |
11,00 10,40 0,20 0,10 0,30 |
5,50 5,2 0 0,10 0,05 0,15 |
| Концентрированные корма (n=56): - пшеница - кукуруза - ячмень - рожь - соя полножирная - соя экструдированная |
6,30 3,80 0,30 1,70 0,10 0,10 0,30 |
3,10 1,90 0,10 0,85 0,05 0,05 0,15 |
| Сочные корма (n=18): - сено - сенаж - силос |
2,0 0,1 0,7 1,2 |
1,0 0,05 0,35 0,6 |
| Отходы перерабатывающей промышленности (n=15): - глютен кукурузный - шрот подсолнечный - шрот соевый - жмых подсолнечный |
1,70 0,20 0,40 0,50 0,60 |
0,80 0.10 0,20 0,20 0,30 |
| Зерно-сенаж (n=1) | 0,10 | 0,05 |
| Зерно-смесь (n=7) | 0,70 | 0,30 |
| Зеленая масса (n=2) | 0,20 | 0,10 |
Исследования показали, что в период с 2006 по 1-2 квартал 2012 года наиболее часто выявляли контаминацию миктоксинами комбикормов (11% от общего количества поступивших проб), концентрированных кормов (6,3%) и сочных кормов (2%). Наибольшую поражённость микотоксинами отмечали при исследовании полнорационных комбикормов - в среднем 10,4% исследуемых проб в течение анализируемого периода. Это могло быть связано с тем, что кормовое сырье, поступающее, для производства комбикормов уже было контаминировано микотоксинами. Из всех видов концентрированных кормов, поступивших на исследование, наиболее пораженными были пшеница - 3,8% и ячмень - 1,7%. Из сочных видов кормов чаще всего обнаруживали микотоксины в силосе - 1,2% проб от общего числа кормов всех видов.
При этом в пробах различных видов кормов обнаруживали сочетание нескольких видов микотоксинов (табл. 2).
Таблица 2 - Встречаемость в кормах и сырье различных видов микотоксинов и их сочетаний
| Пробы | Виды микотоксинов |
|---|---|
| Полнорационный комбикорм | Т-2, охратоксин, зеараленон, охратоксин, афлатоксин |
| Пшеница | Т-2 , фуманизин, ДОН, афлатоксин |
| Силос | Т-2, охратоксин, зеараленон, ДОН |
| Сенаж | Т-2, охратоксин, зеараленон, ДОН |
| Ячмень | Т-2, ДОН, охратоксин |
| Жмых подсолнечный | Т-2, ДОН |
| Шрот подсолнечный | Т-2, зеараленон |
| Кукуруза, соевый шрот, соя полножирная, соя эксудированная, сено, глютен кукурузный, зеленная масса |
Т-2 токсин |
В период с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года пробы кормов и сырья были контаминированны несколькими видами микотоксинов: полнорационный комбикорм содержал до пяти видов микотоксинов; пшеница, силос, сенаж до четырех микотоксинов; ячмень сочетание до трех метаболитов плесневых грибов; жмых подсолнечный и шрот подсолнечный до двух видов опасных продуцентов плесневых грибов; кукуруза, соевый шрот, соя полножирная, соя эксудированная, сено, глютен кукурузный и зеленая масса до одного вида микотоксинов.
В пробах чаще обнаруживали сочетание таких микотоксинов, как Т-2 токсин, микотоксин ДОН, зеараленон и охратоксин.
Предполагается, что степень контаминации кормов определенными сочетаниями, зависит в первую очередь от развития продуцирующих их плесневых грибов и токсичных свойств метаболитов (П.В.Мирошниченко, 2007).
Была проанализирована пораженность поставляемых кормов и сырья из различных сельскохозяйственных организаций, находящихся на территории Среднего Урала (рис. 3).
Рисунок 3 - Контаминация проб микотоксинами, поступавших из различных видов предприятий и сельскохозяйственных организаций, находящихся на территории Среднего Урала
Исследованиями было установлено, что доля пораженных микотоксинами кормов, поступивших из предприятий по их производству (комбикормовые заводы и т.д.) составила в среднем 38% проб, из свинокомплексов - 29% проб, из молочно-товарных предприятий - 19% и из птицеводческих организаций - 14%. Наибольшую степень поражения отмечали в пробах кормов, поступивших из молочно-товарных предприятий.
В результате анализа мониторинговых исследований было установлено, что контаминация кормов и кормового сырья токсинообразующими микромицетами и продуктами их метаболизма имеет широкое распространение на Среднем Урале, что требует разработки руководства по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов с учетом региональных особенностей.
2. Характеристика препаратов, используемых для нейтрализации и детоксикации токсинов в исследованиях.
2.1 Пробиотический препарат «Бацелл-М» Препараты выпускаются ООО «Биотехагро», г.Тимашевск Краснодарского края. «Бацелл-М» (Bacell-М). Пробиотическая добавка к корму «Бацелл-М» состоит из микробной массы спорообразующих бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-5225; бактерий Lactobacillus plantarum 52 ВКПМ В-2347; Enterococcus faecium М-3185 В-3491; шрота подсолнечного, либо продуктов переработки зерновых или колосовых культур. В 1г пробиотической добавки содержится не менее 1×108 КОЕ (колониеобразующих единиц) бактерий каждого вида. Не содержит генетически модифицированных организмов (ГМО).
Пробиотическая добавка к корму «Бацелл-М» представляет собой сыпучий порошок с включениями частиц подсолнечного шрота, зерновых или колосовых культур от светло-коричневого до темно-коричневого цвета со специфическим запахом. «Бацелл-М» расфасовывают от 5,0 до 25,0кг в пакеты или мешки из бумаги. Каждую единицу фасовки снабжают инструкцией по применению и этикеткой с указанием: наименования организации производителя, препарата, количества препарата, номера серии, номера контроля, даты изготовления (месяц, год), срока годности, условий хранения, обозначения ТУ, надписи «Для животных». Хранят пробиотическую добавку к корму «Бацелл-М» в чистом, защищенном от света помещении при температуре не выше 20°С. Срок годности пробиотической добавки - 6 месяцев от даты изготовления. Пробиотическая добавка к корму «Бацелл-М» после истечения срока годности не должна применяться.
2.2 Пробиотический препарат «Моноспорин» (Monosporin). «Моноспорин» состоит из микробной массы спорообразующих бактерий Bacillus subtilis, мелассы свекловичной, соевого гидролизата, воды. В 1 см3 препарата содержится 1×108 КОЕ (колониеобразующих единиц) спорообразующих бактерий. Не содержит ГМО. «Моноспорин» представляет собой жидкую суспензию со взвешенными частицами от светло-коричневого до кремового цвета с оттенками разной интенсивности, с запахом питательной среды. «Моноспорин» расфасовывают по 0,4; 1,0; 2,0 дм3 в стерильные полимерные контейнеры для инфузионных растворов, по 0,1, 0,2, 0,4дм3 в стеклянные банки или бутыли, которые упаковывают в ящики или коробки из гофрированного картона массой нетто до 15кг. Каждую единицу фасовки снабжают инструкцией по применению и этикеткой с указанием: наименования организации-производителя, препарата, количества препарата, номера партии, номера контроля, даты изготовления (месяц, год), срока годности, условий хранения, обозначения ТУ, надписи «Для животных». «Моноспорин» хранят в сухом, защищенном от света помещении при температуре от 2 до 100С. Срок годности препарата - 6 месяцев от даты изготовления. «Моноспорин» после истечения срока годности не должен применяться.
3. Биологические свойства пробиотических препаратов
«Бацелл-М» (г/гол):
- телятам с 5 по 30 день - 10,0;
- телятам старше 30 дней - 15,0;
- коровам в период сухостоя и лактации - 30,0 - 60,0;
- ягнятам от 10 до 30 дней - 5,0;
- ягнятам старше 30 дней до 6 месяцев - 10,0;
- рыбе - 2кг на 1т (0,2% от массы сухого комбикорма);
- птице - 2кг на 1 т (0,2% от массы сухого комбикорма);
- поросятам - 3кг на 1 т (0,3% от массы сухого комбикорма);
- свиньям на откорме - 3-6кг на 1т корма (0,3-0,6% от массы сухого комбикорма). 0,6% вводят при повышенном содержании клетчатки в рационе;
- свиноматкам и хрякам - 3кг на 1т (0,3% от массы сухого комбикорма).
«Моноспорин», мл/гол/сут:
- телятам с 1 по 8 день жизни - 4,0;
- телятам с 26 по 30 день жизни - 4,0;
Птице на 100 голов:
- цыплятам-бройлерам с 1 по 13 день - 3,0;
- цыплятам-бройлерам в финишный период (28-30 день жизни) с первого дня применения комбикорма «Финиш» ежедневно в течение 5 дней - 3,0;
- курам-несушкам яичных и мясных кроссов в период разноса в первые дни яйцекладки в течение 10 дней подряд - 20,0.
- поросятам с 1 по 8 день жизни - 2,0;
- поросятам за 3 дня до отъема и 3 дня после отъема - 2,0;
- свиноматкам за 10 дней до опороса - 10,0.
6. Экологическая безопасность применения
пробиотических препаратов «Бацелл-М»
и «Моноспорин»
Побочных явлений и осложнений при применении пробиотических препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» в рекомендуемых дозах не выявлено. Противопоказаний к применению не установлено.
Животноводческая продукция после применения адсорбента и пробиотических добавок может использоваться без ограничений.
7. Фактические результаты применения пробиотических препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» при экспериментальном воспроизведении микотоксикозов на лабораторных животных
Опыт по экспериментальному воспроизведению микотоксикозов, а так же по изучению детоксикационного действия пробиотичеких препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» против микотоксинов проводили в условиях вивария Уральского НИВИ, на 70 здоровых белых мышах, обоего пола, живой массой 18-21г.
При воспроизведении микотоксикозов, использовали комбикорма, естественно поражённые микотоксинами ( Т-2 токсин и микотоксин ДОН). Корма задавали в течение 10 дней, в дозе 5г/гол, один раз в день.
Первой опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный Т-2 токсином в концентрации 0,2мг/кг. Второй группе - комбикорм, пораженный Т-2 токсином в концентрации 0,2мг/кг с введением препарата «Бацелл-М» 0,2% от массы комбикорма в течение 10 дней подряд. Третьей опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный Т-2 токсином в концентрации 0,2мг/кг с введением жидкого препарата «Моноспорин» 4мл\100 г корма в течение 10 дней подряд.
Четвертой опытной группе скармливали комбикорм, естественно пораженный микотоксином ДОН в концентрации 3,0мг/кг. Пятой опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный микотоксином ДОН в концентрации 3,0мг/кг с введением «Бацелл-М» 0,2% от массы комбикорма. Шестой опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный микотоксином ДОН в концентрации 3,0мг/кг с введением жидкого препарата «Моноспорин» 4мл\100 г корма. Седьмая группа лабораторных животных была сформирована как контрольная, которой скармливали чистые от микотоксинов комбикорма.
В течении 10 дней в опытных и контрольной группах проводился учет живой массы лабораторных животных (табл.8).
Таблица 3 - Показатели живой массы мышей в течение опытного периода, n=70
| Группы животных | Количествоживотных, гол. | Средние показатели живой массы, г | |
|---|---|---|---|
| 1 день | 10 день | ||
| 1 опытная группа | 10 | 20,3 | 20,5 |
| 2 опытная группа | 10 | 20,5 | 21,6 |
| 3 опытная группа | 10 | 19,0 | 20,8 |
| 4 опытная группа | 10 | 20,7 | 17,1 |
| 5 опытная группа | 10 | 20,1 | 20,9 |
| 6 опытная группа | 10 | 20,0 | 21,0 |
| контрольная группа | 10 | 19,7 | 20,9 |
Из табличных данных видно, что показатели живой массы на конец опытного периода в четвертой опытной группе, потреблявшей корма с микотоксином ДОН, были ниже в два раза, по сравнению со всеми остальными группами.
Признаки микотоксикоза у четвертой опытной группы (получавших микотоксин ДОН) проявились на 5 день скармливания пораженных комбикормов. У мышей отмечались изменения ответной реакции на внешние раздражители, подёргивание конечностями и хвостом, агрессивность, взъерошенность и потеря блеска шерстного покрова, увеличение потребления воды. С 8 по 10 день испытаний наблюдалась гиперемия видимых слизистых оболочек, расстройство нервной системы. Отмечалось снижение потребления корма. У остальных опытных групп получавших комбикорма с микотоксинами (Т-2, ДОН) и препаратами «Бацелл-М» и «Моноспорин», а так же у контрольных животных признаки токсикоза не наблюдались.
В конце опытного периода у животных производили отбор проб крови для лабораторного исследования (табл.9).
Количество лейкоцитов у четвертой опытной группы (получавшей комбикорм с микотоксином ДОН) было выше на 42% (Р<0,01), по сравнению с опытными группами, получавшими комбикорм с препаратами «Бацелл-М» и «Моноспорин» и контрольной группой. Из лейкоформулы крови было видно, что количество сегментоядерных нейтрофилов у мышей четвертой опытной группы увеличилось на 51%, по сравнению с остальными опытными группами и контрольной группой. Это свидетельствует о воспалительном процессе в организме у животных четвертой опытной группы, получавших комбикорм пораженный микотоксином ДОН. Гематологические показатели у остальных опытных групп и контрольных животных находились в пределах физиологической нормы.
Таблица 4 - Биохимические показатели крови опытных и контрольных групп мышей
| Группа животных | Билирубин, ммоль/л | Амилаза, ммоль/л | Холестерин, ммоль/л | Мочевина, ммоль/л | Креатинин, ммоль/л |
|---|---|---|---|---|---|
| Норма | до 10 | 3,2-6,6 | 1,6 - 5,0 | 5,41 ± 12,9 | 55,8-162,4 |
| 1 опытная группа (n=10) |
2,0 | 3,50± 0,29 |
2,44± 0,04 |
5,8± 2,0** |
158,30± 1,7* |
| 2 опытная группа (n=10) |
4,0 | 5,7± 0,19 |
4,8± 0,17 |
5,94± 0,9** |
154,65± 1,8* |
| 3 опытная группа (n=10) |
2,0 | 3,29± 0,16 |
3,1± 0,28 |
5,74± 0,2 * |
144,5± 6,86* |
| 4 опытная группа (n=10) |
2,8 | 3,85± 0,10 |
2,0± 0,23 |
13,5± 0,43* |
189,9± 3,36* |
| 5 опытная группа (n=10) | 1,0 | 3,56± 0,11 |
3,5± 0,47 |
7,8± 0,29 |
146,8± 6,87 |
| 6 опытная группа (n=10) |
4,0 | 3,33± 0,23 |
3,56± 0,22 |
7,9± 0,30 |
126,6± 5,31 |
| контрольная группа (n=10) |
4,2 | 4,67± 0,21 |
5,0± 0,10 |
6,7± 0,24 |
158,3± 7,88 |
Примечание: *-p<0,05; **-p<0,01
Таблица 5 - Гематологические показатели крови опытных и контрольных групп мышей
| Группа животных | Эритроциты,1012 | Лейкоциты, 109 | Гемоглобин, г/л | Лейкоформула, % | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Юные | палочкоядерные нейтрофилы | сегментоядерные нейтрофилы | эозинофилы | Моноциты | базофилы | лимфоциты | ||||
| норма | 5,0-11,0 | 6,0-13,0 | 140-180 | 0 | 1,0-5,0 | 18,0-30,0 | 0,0-4,0 | 2,0-5,0 | 0,0-2,0 | 60-78 |
| 1 опытная группа (n=10) | ,44±0,23 | 6,67±0,23 | 149,4±2,34 | 0 | 1,0 | 19,9 | 1,0 | 0,0 | 0 | 79,0 |
| 2 опытная группа (n=10) | 5,89±0,20 | 6,80±0,39** | 158,6±2,70 | 0 | 1,0 | 19,4** | 1,0 | 0,0 | 0 | 78,6 |
| 3 опытная группа (n=10) | 6,70±0,16 | 6,0±0,20 | 150,6±1,90 | 0 | 1,0 | 30,2 | 0,0 | 0,0 | 1 | 67,8 |
| 4 опытная группа (n=10) | 5,20±0,20 | 14,52±0,39** | 140,2±1,24 | 0 | 2,0 | 39,9** | 0,0 | 0,0 | 0 | 58,1 |
| 5 опытная группа (n=10) | 5,5±0,20 | 6,89±0,25** | 151,1±1,30 | 0 | 1,0 | 20,2** | 1,0 | 0,0 | 0 | 77,8 |
| 6 опытная группа (n=10) | 6,45±0,20 | 6,90±0,19 | 156,6±1,30 | 0 | 1,0 | 21,3 | 1,0 | 0,0 | 0 | 76,7 |
| контрольная группа (n=10) | 6,9±0,18 | 6,50±0,15 | 152,2±2,90 | 0 |
1,0 | 20,2 | 0,0 | 0,0 | 0 | 78,8 |
Примечание: ** - Р<0,01
Биохимический анализ крови мышей четвертой опытной группы , корма для которой были поражены микотоксином ДОН показал, что уровень мочевины увеличился на 37%, а креатинина - на 78%, по сравнению с опытными животными, получавшими с пораженными кормами препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» и контрольными животными. Увеличение этих показателей свидетельствует о нарушении белкового обмена, нарушении синтеза протеина, что подтверждается поталогией почек у мышей при морфологических исследованиях.
Биохимические показатели опытных групп, получавшими с пораженными кормами препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» были в пределах нормы.
При патологоанатомическом исследовании животных, получавших микотоксин ДОН, отмечали подкожные и внутримышечные кровоизлияния, геморрагическое воспаление слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, гипертрофия почек.
У опытных групп, получавших пробиотические препараты, патологоанатомических изменений, характерных для микотоксикозов во внутренних органах не выявлено.
Таким образом, при проведении ряда опытов было выяснено, что препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» обладают детоксикационными своиствами. Входящие в состав препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» бактерии B. subtilis синтезируют ферменты, которые разрушительно воздействуют на различные химические группы молекул микотоксинов. Кроме того, препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» обладают пробиотическими свойствами, что в свою очередь положительно воздействует на естественную резистентность организма животных, нормализует деятельность желудочно-кишечного тракта, стимулирует обменные процессы в организме, повышая усвояемость кормов. Препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» можно использовать как в профилактических целях против микотоксикозов животных, так и в целях детоксикации кормов пораженных токсичными метаболитами плесневых грибов. При этом, пробиотические препараты технологичны, так «Бацелл-М» достаточно удобно вводить в комбикорма и «Моноспорин» через систему поения.
1.2.3. Влияние пробиотических препаратов Бацелл-М, Моноспорин и Пролам» на снижение уровня микотоксинов в кормах для свиноматок
Исследование проводили в ООО «БМК» Богдановчского р-на Свердловской области. Материалом для исследования служили супоросные свиноматки породы ландрас. В первой серии экспериментов проводили скармливание пробиотичекой добавки «Бацелл-М» из расчета 2кг на 1 тонну и выпаивание Моноспорина и Пролама из рассчета 10 мл на 1 голову за 30 дней до опороса. Во второй серии экспериментов свиноматкам скармливали «Бацелл-М» и выпаивали Моноспорин в дозировках как в первом исследовании за 45 дней до опороса. «Бацелл-М» скармливали в течение всего периода эксперимента, «Моноспорин» и «Пролам» по схеме: 10 дней выпаивание 10 дней перерыв и так далее. В кормах определяли микотоксины: Т2 и ДОН.
Таблица 6 - Схема проведения первого исследования
| Группа | Схема применения пробиотика | Доза пробиотика |
|---|---|---|
| Контроль | - | - |
| 1 опытная | За 30 дней до опороса | 2 кг/ т «Бацелл-М» |
| 2 опытная | За 30 дней до опороса | 10 мл на 1 гол «Моноспорин» |
| 3 опытная | За 30 дней до опороса | 10 мл на 1 гол «Пролам» |
Таблица 7 - Схема проведения второго исследования
| Группа | Схема применения пробиотика | доза пробиотика |
|---|---|---|
| Контроль | - | - |
| 1 опытная | За 45 дней до опороса | 2 кг/ т «Бацелл-М» |
| 2 опытная | За 45 дней до опороса | 10 мл на 1 гол «Моноспорин» |
Учитываемые показатели:
учитывали уровень микотоксинов в кормах после воздействия пробиотическими препаратами;
- у свиноматок после опороса через 5 дней брали кровь на морфо-биохимический анализ;
- у свиноматок плаценту для гистологических исследований;
- по группам учитывали сохранность и приросты живой массы поросят, полученных от свиноматок, которым скармливали до опороса пробиотические препараты.
Результаты исследований. Исследования корма. Имеющимся в лаборатории ИФА-методом по спецификации с набором R-Biofarm (производство Германия) в кормах, которые используют свиноматкам, были обнаружены следы микотоксинов Т2-токсин и микотоксин ДОН. Для доказательства воздействия пробиотика «Бацелл-М» на снижение уровня микротоксинов были проведены исследования in vitro. Моделируя условия нарушения хранения кормов: температура 37оС и 80% влажности в течение 7 суток, и, контролируя уровень микотоксинов каждые 48 часов 3 раза подряд, установили уровень микотоксина Т2-токсин 0, 094мг/кг и микотоксина ДОН 0,120мг/кг. Затем к 20г корма добавили 50мл водного 0.5% раствора соляной кислоты (для создания условий подобных условиям в желудке) и пробиотический препарат «Бацелл-М». В течение 16 час уровень контролируемых микотоксинов снизился до 0, 022мг/кг и 0,074мг/кг, то есть на 76% и 38% соответственно. В контроле уровень микотоксинов остался без изменений.
Исследования крови. Результаты анализов крови показали, что пробиотические препараты в опытных группах способствовали нормализации уровня гемоглобина, а в контрольной группе уровень гемоглобина был выше нормативных значений. В опытных группах наблюдалось и повышение уровня лейкоцитов и лимфоцитов, что свидетельствует о повышении резистентности организма. Так, уровень Т- и В-лимфоцитов был выше на 3.35 - 26.86% в опытных группах при использовании пробиотиков, по сравнению с контрольными значениями. Фагоцитарная активность в контроле была выше, чем в опытных группах на 3.67 - 0.75%. Достоверно выше был уровень палочковидных нейтрофилов и ближе к нормативным значениям в опытных группах при использовании пробиотиков, чем в контроле, такая же картина наблюдалась и по уровню моноцитов.
В целом можно отметить, что при использовании пробиотических препаратов происходил процесс нормализации и активизации иммунных процессов в организме свиноматок. Были проведены биохимические исследования крови свиноматок, которые представлены в таблицах 3 и 4
Таблица 8 - Биохимические показатели крови свиноматок после опороса, получавших пробиотики за 30 дней до опороса, n=32
| Показатель | Полученные результаты | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Опыт «Бацелл-М» | Опыт «Моноспорин» | Опыт «Пролам» | Контроль | Норма | |
| Общий белок, г/л | 79,34 ± 2,92 |
73,63 ± 0,69 |
71,95 ± 3,77 |
76,47 ± 4,75 |
57,0- 79,0 |
| Альбумины, г/л | 44,12 ± 1,41 |
44,83 ± 0,68 |
41,80 ± 0,96 |
44,00 ± 1,50 |
25,0- 38,0 |
| Глюкоза, Ммоль/л | 5,88 ± 0,72 |
5,63 ± 0,99 |
4,55 ± 0,93 |
7,43 ± 0,58 |
3,6- 6,3 |
| Мочевина ммоль/л | 3,04 ± 0,33 |
3,08 ± 0,38 |
3,45 ± 0,59 |
3,03 ± 0,56 |
3,7- 8,8 |
| Холестерин, ммоль/л | 1,48 ± 0,10 |
1,48 ± 0,18 |
1,20 ± 0,19 |
1,37 ± 0,03 |
1,8- 3,7 |
| Креатинин, мкмоль/л | 71,48 ± 8,41 |
62,18 ± 9,42 |
77,00 ± 15,99 |
73,83 ± 12,41 |
77,0- 175,0 |
| Магний, ммоль/л | 1,04 ± 0,04 |
1,08 ± 0,13 |
1,43 ± 0,28 |
1,47 ± 0,07 |
0,7- 1,1 |
| Кальций, ммоль/л | 2,60 ± 0,04 |
2,70 ± 0,04 |
2,05 ± 0,09 |
2,60 ± 0,06 |
2,6- 3,3 |
| Фосфор, ммоль/л | 2,08 ± 0,08 |
2,85 ± 0,69 |
1,83 ± 0,09 |
2,20 ± 0,21 |
0,7- 1,7 |
| Железо, мкмоль/л | 30,52 ± 1,33 |
38,18 ± 1,88 |
40,20 ± 2,45 |
40,03 ± 4,97 |
16,0- 36,0 |
| Калий,ммоль/л | 7,16 ± 0,32 |
6,70 ± 0,15 |
7,15 ± 0,35 |
7,50 ± 0,40 |
4,9- 7,1 |
| Хлориды,ммоль/л | 99,34 ± 1,68 |
99,58 ± 1,06 |
108,13 ± 0,81 |
103,60 ± 1,65 |
88,0- 107,0 |
| Щелочная фосфатаза, U/л | 51,17 ± 7,86 |
59,25 ± 3,71 |
88,00 ± 14,93 |
62,00 ± 13,00 |
70,0- 227,0 |
| Медь, мкмоль/л | 18,36 ± 0,57 |
20,48 ± 5,56 |
12,83 ± 1,99 |
18,60 ± 1,31 |
11,0- 7,0 |
| Цинк, мкмоль/л | 12,30 ± 1,83 |
15,05 ± 1,17 |
13,30 ± 1,40 |
16,30 ± 0,50 |
8,0- 35,0 |
| AST, ед./л | 82,76 ± 20,43 |
52,43 ± 16,69 |
44,38 ± 11,50 |
43,63 ± 5,02 |
9,0- 113,0 |
| ALT, Ед./л | 39,36 ± 8,68 |
42,08 ± 11,17 |
26,23 ± 7,77 |
23,63 ± 0,88 |
32,0- 84,0 |
| Креатинкиназа, Ед./л | 1173,88 ± 334,28 |
513,13 ± 132,60 |
525,74 ± 144,58 |
453,70 ± 217,94 |
34,0- 166,0 |
| ЛДГ, Ед./л | 794,34 ± 171,59 |
540,03 ± 103,99 |
711,08 ± 36,95 |
500,53 ± 68,57 |
309,0- 938,0 |
| Амилаза, Ед/л | 1419,22 ± 79,80 |
1183,28 ± 213,34 |
1804,65 ± 315,41 |
1385,23 ± 242,63 |
47,0- 188,0 |
| Кислая фосфатаза Ед/л | 2,80 ± 0,37 |
3,60 ± 0,63 |
3,38 ± 1,52 |
3,10 ± 0,31 |
0,0- 6,5 |
| Триглицериды, ммоль/л | 0,46 ± 0,08 |
0,38 ± 0,06 |
0,15 ± 0,05 |
0,63 ± 0,24 |
0,22- 1,28 |
| Общий билирубин, мкмоль/л | 0,70 ± 0,51 |
0,45 ± 0,45 |
0,55 ± 0,43 |
0,43 ± 0,43 |
1,7- 3,4 |
| СК-МВ, Ед/л | 174,82 ± 31,81 |
96,18 ± 10,43 |
94,50 ± 9,52 |
85,57 ± 11,47 |
11,5- 55,5 |
| Холинэстераза, Ед/л | 691,42 ± 62,59 |
859,5 ± 71,47 |
945,45 ± 119,41 |
834,03 ± 165,17 |
1000,0- 2000,0 |
| Липаза, Ед/л | 21,04 ± 8,93 |
8,50 ± 2,13 |
9,25 ± 4,70 |
6,40 ± 2,00 |
0,0- 83,0 |
Таблица 9 - Биохимические показатели крови свиноматок после опороса, получавших пробиотики за 45 дней до опороса, n=24
| Показатель | Полученные результаты | |||
|---|---|---|---|---|
| Опыт «Бацелл-М» | Опыт «Моноспорин» | Контроль | Норма | |
| Общий белок, г/л | 71,03 ± 3,64 | 65,95 ± 2,98 | 67,17 ± 6,20 | 57,0-79,0 |
| Альбумины, г/л | 43,68 ± 1,16 | 43,40 ± 1,61 | 39,63 ± 4,28 | 25,0-38,0 |
| Глюкоза, ммоль/л | 4,85 ± 0,34 | 5,55 ± 0,90 | 5,00 ± 0,55 | 3,6-6,3 |
| Мочевина ммоль/л | 3,53 ± 0,87 | 2,25 ± 0,17 | 3,70 ± 0,93 | 3,7-8,8 |
| Холестерин, ммоль/л | 0,85 ± 0,16 | 0,90 ± 0,07 | 1,50 ± 0,21 | 1,8-3,7 |
| Креатинин, мкмоль/л | 105,08 ± 26,69 | 120,25 ± 7,96 | 112,77 ± 14,17 | 77,0-175,0 |
| Магний, ммоль/л | 1,33 ± 0,30 | 1,25 ± 0,35 | 1,43 ± 0,24 | 0,7-1,1 |
| Кальций, ммоль/л | 2,18 ± 0,09 | 1,98 ± 0,06 | 2,13 ± 0,03 | 2,6-3,3 |
| Фосфор, ммоль/л | 1,90 ± 0,04 | 2,00 ± 0,09 | 2,73 ± 0,58 | 0,7-1,7 |
| Железо, мкмоль/л | 38,33 ± 3,56 | 43,95 ± 4,19 | 33,77 ± 1,98 | 16,0-36,0 |
| Калий,ммоль/л | 7,15 ± 0,32 | 7,23 ± 0,19 | 5,33 ± 1,09 | 4,9-7,1 |
| Натрий, ммоль/л | 165,33 ± 3,35 | 152,23 ± 6,57 | 152,63 ± 1,13 | 133,0-147,0 |
| Хлориды,ммоль/л | 109,85 ± 2,80 | 108,13 ± 2,71 | 108,27 ± 2,70 | 88,0-107,0 |
| Щелочная фосфатаза, U/л | 41,50 ± 8,21 | 56,25 ± 4,50 | 110,67 ± 47,90 | 70,0-227,0 |
| Медь, мкмоль/л | 13,73 ± 0,77 | 14,18 ± 2,06 | 15,60 ± 1,59 | 11,0-47,0 |
| Цинк, мкмоль/л | 11,4 ± 0,94 | 15,48 ± 2,78 | 11,40 ± 1,19 | 8,0-35,0 |
| AST, ед./л | 36,70 ± 4,82 | 41,78 ± 7,91 | 41,83 ± 2,02 | 9,0-113,0 |
| ALT, Ед./л | 18,65 ± 5,71 | 26,00 ± 4,75 | 44,53 ± 3,32 | 32,0-84,0 |
| ГГТ, Ед/л | 18,78 ± 5,80 | 15,58 ± 6,95 | 26,23 ± 3,20 | 2,7-22,0 |
| ЛДГ, Ед./л | 594,23 ± 59,70 | 826,70 ± 102,96 | 664,87 ± 43,38 | 309,0-938,0 |
| Амилаза, Ед/л | 1843,80 ± 258,03 | 994,15 ± 239,89 | 1965,03 ± 298,97 | 47,0-188,0 |
| Кислая фосфатаза Ед/л | 3,78 ± 0,14 | 4,08 ± 1,06 | 5,27 ± 1,62 | 0,0-6,5 |
| Триглицериды, ммоль/л | 0,2 ±0,08 | 0,20 ± 0,07 | 0,30 ± 0,06 | 0,22-1,28 |
| Общий билирубин, мкмоль/л | 0,23 ± 0,23 | 2,83 ± 1,36 | 0,13 ± 0,13 | 1,7-3,4 |
| СК-МВ, Ед/л | 89,75 ± 5,63 | 96,28 ± 21,33 | 163,40 ± 9,64 | 11,5-55,5 |
| Холинэстераза, Ед/л | 806,98 ± 62,08 | 845,1 ± 44,37 | 935,90 ± 135,51 | 1000,0-2000,0 |
| Липаза, Ед/л | 4,08 ± 2,53 | 11,13 ± 7,69 | 18,80 ± 4,39 |
0,0-83,0
|
Биохимический анализ крови по данным таблицы 3 и 4 показал, что большинство показателей находиться в пределах нормативных или контрольных значений в опытных группах, где свиноматкам давали пробиотические препараты за 30-45 дней до опороса. По отдельным показателям отмечается тенденция изменения показателей, однако четкой закономерности не установлено.
Нужно отметить, что в сложной системе мать-плод в последний период супоросности происходит стабилизация и нормализация сложных биохимических процессов в зависимости от условий содержания и уровня кормления, генотипа. Эти факторы стабилизации оказываются более сильными, чем воздействие продуктов жизнедеятельности вводимых микроорганизмов на биохимические процессы. Так, отмечено закономерное повышение или понижение значения отдельных показателей, как в контрольных, так и в опытных группах одновременно, в отличие от нормативных значений.
Зоотехнические показатели. В 30 дневном возрасте была рассчитана сохранность и среднесуточный прирост поросят-сосунов от свиноматок, которым скармливали пробиотики до опороса.
Таблица 10 - Показатели сохранности и прироста живой массы поросят в возрасте 30 дней, n=616
| Группа | Период применения пробиотиков | Сохранность % | Среднесуточный прирост, кг |
|---|---|---|---|
| Первое исследование | |||
| Поросята от свиноматок контрольной группы | - | 83,3 ± 1.87 | 0,131 ± 0,01 |
| Поросята от свиноматок 1 опытной группы | «Бацелл-М» за 30 дней до опороса | 92,46 ± 2,21 | 0,155 ± 0,01 |
| Поросята от свиноматок 2 опытной группы | «Моноспорин» за 30 дней до опороса | 98,33 ± 1,67 | 0,193 ± 0,01 |
| Поросята от свиноматок 3 опытной группы | «Пролам» за 30 дней до опороса | 100,00 ± 0 | 0,152 ± 0,01 |
| Второе исследование | |||
| Поросята от свиноматок контрольной группы | 86,98 ± 1,85 | 0,145 ± 0,01 | |
| Поросята от свиноматок 1 опытной группы | «Бацелл-М» за 45 дней до опороса | 91,96 ± 2,03 | 0,149 ± 0,01 |
| Поросята от свиноматок 2 опытной группы | «Моноспорин» за 45 дней до опороса | 96,02 ± 2,10 | 0,154 ± 0,01 |
По данным таблицы 5 в группах поросят от свиноматок, которые получали пробиотические препараты, была выше сохранность на 9-16% в первом исследовании и на 5-10% во втором исследовании. Среднесуточные приросты живой массы были соответственно выше на 16 - 47% в первом исследовании и на 2.8 - 6.2% во втором исследовании.
Гистологические исследования плаценты свиноматок, по 3 головы из каждой группы, показали, что плацента свиноматок, получающих «Бацелл-М» была в пределах гистологической нормы. Ворсинки хориона и эпителий распределены не равномерно. В одних случаях это высокий эпителий с хорошо выраженными ядрами и зернами хроматина в них. Стенки кровеносных сосудов собственной пластинки разрыхлены. Клеточный состав их в состоянии пролиферации. Между ворсинками хориона встречаются разрозненные сгустки фибриноида и сеточки фибрина. В некоторых участках эпителия хориона ярко выраженная вакуольная дистрофия и некроз эпителия Кровеносные сосуды среднего калибра содержат эритроциты, находящиеся в состоянии распада. Строма ворсинок разрыхлена, что характерно для отпадающей плаценты.
Плацента свиноматки, получающей «Моноспорин» была в пределах гистологической нормы. В плаценте имеют место участки разрастания молодой грануляционной ткани, в которой замурованы ворсины хориона. Микроциркуляторное русло ворсин в состоянии гиперемии. Строма ворсин более плотная, огрубевшая. В собственной пластинке наблюдается наличие макрофагов с пенистой цитоплазмой и четко выраженным ядром в состоянии некробиоза.
Плацента свиноматки, получающей «Пролам». Рисунок ворсин хориона выражен. Кровеносные сосуды собственной пластинки резко кровенаполнены. В них наблюдается гемолиз эритроцитов с выпадением пигмента гемосидерина, в самой пластинке - выпадение липофусцина, что свидетельствует о раннем изнашивании плаценты.
Плацента свиноматки контрольной группы. Патологические изменения. В концевых отделах ворсинок эпителий истончен, без ядер, атрофирован (плацентарная недостаточность). В собственной пластинке наличие макрофагов, нагруженных гемосидерином.
Анализ состояния плаценты свиноматок по гистологическим срезам, получающих «Бацелл-М», «Моноспорин» и «Пролам» свидетельствует о том, что плацента находиться в основном в пределах гистологической нормы. В контрольной группе, отмечен целый ряд патологий плаценты: изнашивание, преждевременное старение, разрыхление плаценты; атрофия эпителия ворсинок; распад эритроцитов, плацентарная недостаточность, нарушение кровоснабжение плаценты. Всё это свидетельствует о том, что в контрольной группе при традиционной технологии содержания супоросных свиноматок в их организме происходит ряд патологических изменений, связанных с нарушением обмена веществ и ухудшением состояния здоровья организма: токсикоз, повышение артериального давления, отеки, распад гемоглобина с образованием оксида железа.
Заключение. Наиболее часто обнаруживаемые в кормах средней полосы России микотоксины трихотеценовой группы: Т-2 токсин и микотоксин ДОН, которые не способны связываться и удерживаться сорбентами, изготовленными как на основе алюмосиликатов, так и на основе бентонитов или цеолитов. Эти препараты вносят в корма, где они моментально инактивируются самим кормом, который выступает в качестве конкурента за присоединение микотоксинов. Входящие в состав комбикорма зерно, корма животного происхождения и минеральное сырье являются конкурентными сорбентами микотоксинов вследствие наличия клетчатки, полисахаридов, белков, а также благодаря существенному превышению любого фирменного сорбента по массе и наличию кислото-связывающей способности. Возможность сорбировать микотоксины у сорбирующих препаратов есть только в проксимальном отделе кишечника после расщепления корма в процессе переваривания. Однако смена кислой среды в желудке на слабощелочную в кишечнике приводит к потере большинством сорбентов способности удерживать токсины и они также поступают в кровь. Включенные в состав некоторых комплексных препаратов ферменты, расщепляющие специфические функциональные группы у неполярных токсинов (например, 12,13-эпокси группу у трихотеценовых токсинов), вводятся в состав комбикорма в очень небольших количествах и вместе с ним поступают в желудок. Компоненты комбикорма, значительно превышающие по массе как микотоксин, так и инактивирующий его фермент, создадут физико-химическое препятствие для их взаимодействия. Таким образом, сорбирующие препараты в тех небольших концентрациях, которые предлагается вводить в корма с целью профилактики микотоксикозов (0,25-0,5%) не способны существенно уменьшить содержание неполярных микотоксинов (10).
Выводы. Под воздействием пробиоического препарата «Бацелл-М» уровень контролируемых микотоксинов Т2-токсин и микотоксин ДОН снизился на 76 и 38% соответственно. Использование пробиотических препаратов свиноматкам во вторую половину супоросности или в третий последний период супоросности позволяет не только нормализовать биохимические процессы в организме, но и повысить иммунитет. Эта закономерность передается плоду. Поросята, рожденные от свиноматок, которым давали с кормом и питьем пробиотические препараты обладают высокой скоростью роста и высокой сохранностью по сравнению с общепринятыми системами содержания свиноматок.
8 Cпособы и средства защиты сельскохозяйственных животных от микотоксинов
Учитывая высокий уровень контаминации микотоксинами кормов, используемых в птицеводстве и животноводстве, были проанализированы средства и способы защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов с учетом региональных особенностей.
К способам предотвращения заражения микотоксинами при выращивании кормового сырья относятся технология возделывания, подбор сортов, устойчивых к грибковым заболеваниям, различные способы технологии хранения и консервирования кормов (контроль размножения плесневых грибов и минимизации накопления микотоксинов за счёт предварительной подготовки хранилищ, консервации и контроля процесса хранения), лабораторный контроль качества кормов и кормового сырья (методы отбора проб, методики определения микотоксинов в кормах).
К средствам снижения влияния микотоксинов на животных относится использование средств защиты растений, применение сорбентов и пробиотических препаратов.
8.1 Способы предотвращения заражения микотоксинами кормового сырья
Проведение мероприятий по предотвращению заражения кормовых средств плесневыми грибами во время выращивания, уборки и хранения является основным, а иногда и единственным методом профилактики микотоксикозов сельскохозяйственных животных:
- Один из традиционных способов - ранняя вспашка зяби, своевременное лущение стерни, сжигание всего погибшего материала на земельных участках перед подготовкой их под новый урожаи;
- К новым способам относится обработка сразу после уборки урожая в вечерние и ночные часы стерни и соломы злаковых культур, растительных остатков кукурузы и подсолнечника против фитопатогенных грибов грибами рода Trichoderma, которые входят в состав препарата Глиокладин.
Практикование севооборота, равномерное орошение посевов, использование по возможности фунгицидов и инсектицидов;
- Использование для посева на территории Уральского региона устойчивых к поражению грибами и ранних сортов культур (озимая рожь - сорт Исеть, сорт Паром, сорт Пышма, сорт Былина, сорт памяти Кунакбаева; озимая и яровая тритикале - сорт Торнадо, сорт Башкирская короткостебельная; ячмень - сорт Калита; пшеница - сорт Горноуральская; овес - сорт памяти Балавина).
- Посев с соблюдением рекомендуемого расстояния между растениями и рядами;
- Оберегание зерна во время возделывания сельскохозяйственных культур, уборки и хранения от механического повреждения;
- Недопущение внесения чрезмерных доз азотных удобрений;
- Уборка растений после полного созревания в сжатые сроки, отказ от раздельной уборки в дождливую погоду;
- Соблюдение оптимальных сроков жатвы, проведение очистки зерна, наиболее быстрое снижение влажности зерна до 15%.
7.2 Способы, технологии хранения и консервирования кормов, предотвращающие поражение их микотоксинами
- Перед приготовлением кормовых смесей ингредиенты исследуют на пораженность токсичными грибами и токсинами. Это дает возможность выбрать оптимальный способ производства корма. Например, зеараленон, стойкий ко многим детоксикантам, разрушается при силосовании. А процесс гранулирования уменьшает количество диаспор грибов в корме в 35-85 раз.
- При хранении корма придерживаются двух основных принципов - его хранят в сухом виде и оберегают от повреждений - механических (дробление при уборке и транспортировке), насекомыми и грызунами.
- Зерно перед закладкой на хранение просушивают в течение 48 часов на зерносушилках до влажности 7-14% в зависимости от вида зерна и срока хранения. Зерно с относительно высоким содержанием крахмала (пшеница, ячмень, кукуруза, сорго и др.) рекомендуется хранить при влажности продукта до 13%, соевые бобы - до 12%, семена масличных культур (арахис, хлопчатник) - до 7-10%. Если зерно хранят при температуре 1°С, то плесень не будет развиваться даже при оптимальной для ее роста влажности.
- Для обеспечения длительного и надежного хранения зерна рекомендуется понижать либо его температуру, либо его влажность.
- Сроки хранения гранулированных кормов в зависимости от их влажности должны составлять: для гранул из соломы и злаков, обработанных едким натром, влажностью ниже 14% - в течение года, 14-15% - до 6 недель и выше 14% - хранению не подлежат. Другие виды гранулированных кормов, включая гранулированную солому для свиней и гранулы из зеленой массы кукурузы, при влажности менее 12% можно хранить до года, 12-14% - до 6 недель и выше 14% - хранению не подлежат.
- Кормовые средства следует хранить при пониженной температуре. Если есть опасность развития некоторых видов Fusarium, которые образуют токсин при низкой температуре, эффективным может быть хранение в присутствии азота (в герметичных башнях в основном для зерна).
- Кормовые бункеры должны регулярно очищаться. Вентилирование зерна и использование связующих веществ на основе воды важны для уменьшения перемещения свободной влаги в кормах и содержания их сухими. Таким образом, влажность помещений также должна находиться под постоянным контролем и корректироваться путем вентиляции.
- В целях профилактики после сбора урожая обязательно проверяются на наличие спор плесневых грибов все хранилища, кормоцехи, смесители и кормушки. Своевременно проводится уборка помещений и оборудования от старых кормов и кормового сырья.
- При использовании фунгицидов происходит подавление роста плесеней и уменьшение образования микотоксинов в кормах (такими препаратами служат пропионовая кислота, уксусная кислота, бензойная и сорбиновая).
- Применяются основные методы консервирования кормов - сушка, квашение (силосование), стерилизация.
При сушке из кормов удаляется вода, вследствие чего в них повышается концентрация сухих веществ и соответственно осмотическое давление до таких пределов, при которых становится невозможным усвоение их (всасывание) микроорганизмами. Сушка (естественная и искусственная) применяется при заготовке сена, сенажа, травяной муки.
При силосовании происходит сбраживание молочнокислыми микроорганизмами сахаров, входящих в состав сочных растительных кормов с образованием молочной кислоты, которая при концентрации 0,7% и выше обладает консервирующим действием и тормозит или прекращает жизнедеятельность всех микробов. Для силосований применяются силосные закваски, которые содержат чистые культуры молочнокислых бактерий (Байкал ЭМ1, Битасил» Битасил, Казахсил-М, Биотроф, Лактофлор, Биосиб, Феркон и т.д.).
Термическая обработка кормов и сырья от микотоксинов менее эффективна.
7.3 Лабораторный контроль кормов и кормового сырья на содержание метаболитов плесневых грибов
В системе контроля над загрязнением продовольственного сырья и пищевых продуктов микотоксинами можно выделить три основных этапа:
- Отбор образцов для анализа.
Достоверность оценки качества и безопасности продукции во многом зависит от правильного отбора проб, хра¬нения и доставки их в лаборатории.
В зависимости от назначения отобранные образцы подразделяют на точечные (разовые), средние и объединенные. Разовая, или точечная, проба - проба, отобранная с одного места (точки). Точечные пробы берут из разных мест небольшими порциями, объединяя их в общую объединенную пробу, которую тщательно перемешивают и для отправки в лабораторию готовят среднюю пробу. В том случае, когда отбор проб кормов осуществляют с целью обнаружения микотоксинов, то тогда проводят отбор наиболее пораженных плесенью участков.
Зеленые корма. Пробы зеленых кормов отбирают с пастбищ, лугов, участков кормовых культур. Отбор проб проводят не менее чем с 10 точек участка. Точеч¬ные пробы тщательно перемешивают, расстилают ровным слоем и небольшими пучками, затем пробы объединяют и отбирают средний образец.
Среднюю пробу зеленых кормов (травы) 1,5-2,0кг помещают в полиэтиленовый пакет, вкладывают паспорт качества и сразу же направляют в лабораторию. В случае, если в день отбора пробы были не отправлены в лабораторию, их необходимо хранить в холодильнике не более суток.
Сено, солома. Пробы отбирают не менее чем в 10 точках скирды на разных уровнях, начиная с высоты 0,5-1м. Масса точечной пробы должна составлять 200-250г. От каждых 5 тонн заскирдованного сена берут объединенную пробу массой не менее 1кг. Отбор проб проводят пробоотборниками конструкции ВНИИ кормов имени В. В. Вильмса или ПГК-7 и ПГК-8. Число точечных проб от партии непрессо¬ванного сена массой до 25 тонн должно быть не менее 20, от каждых последующих 5 тонн - дополнительно еще по 4. Для отбора проб рекомендуется минимальное число точечных проб, равное 8. Пробы прессованного сена при отсутствии пробоотборника отбирают в период укладки тюков в штабель: массой до 15 тонн - в количестве 3%, но не менее чем из 5 тюков; от 15 до 50 тонн - 1%, но не менее чем из 15 тюков. Точечные пробы из прессованного сена берут от каждого отобранного тюка. Для этого с тюка снимают проволоку или шпагат и, не нарушая целостности сена, выбирают по одному пласту: из первого тюка пласт с края, из второго - рядом с крайним, из третьего - следующий пласт и т.д. Отобранные разовые пробы сена раскладывают на брезенте или пленке размером примерно 2х2 м и осторожно перемешивают, не допуская ломки растений и образования трухи, составляя объединенную пробу. Масса объединенной пробы от партии не прессованного ванного и прессованного сена должна быть не менее 5кг. Из общей пробы выделяют образец для анализа.
Пробу сена массой не менее 1кг упаковывают в плотную бумагу, бумажный пакет или сухой полиэтиленовый пакет, прикладывают паспорт качества и в течение 2-3 дней доставляют в лабораторию.
Образцы соломы для анализа берут таким же образом.
Силос, сенаж. Пробы отбирают не ранее чем через 1 месяц после закладки на хранение (после окончания процесса консервации) и не менее чем за 10 дней до скармливания, сдачи или продажи. Образцы отбирают из силос¬ных сооружений (башни, траншеи, ямы, рукава). Точечные пробы отбирают пробоотборником на всю глубину слоя. Верхний слой, резко отличающийся по цвету от основной массы при отборе проб на качественный анализ силоса, предварительно убирают и в образец не включают, при подозрении на отравление - отбирают отдельно. От каждого хранилища отбирают минимум три пробы. Рекомендуется точки отбора проб в траншеях с открытыми торцовыми сторонами, которые должны находиться по диагонали на равных расстояниях друг от друга. Объединенную пробу помещают на пленку или брезент. После тщательного и быстрого перемешивания объединенной пробы выбирают из нескольких мест средний образец массой около 1кг. Средние пробы силоса или сенажа помещают в пакет из плотной пленки или стеклянную банку с плотно закрывающейся крышкой, вкладывают паспорт качества и направляют в лабораторию в течение суток с момента отбора.
Комбикорма, мука травяная, отруби, мучка, сечка и др. На складах из партий рассыпного и гранулированного комбикорма точечные пробы отбирают вагонным или амбарным щупом, а при его отсутствии совком из центра квадрата площадью 4-5 м2 каждый: при высоте насыпи до 0,75м - из верхнего и нижнего слоев, свыше 0,75м - из верхнего, среднего и нижнего слоев. Масса объединенной пробы от партий рассыпного корма должна быть не менее 4кг, после смешивания и квартования из нее выбирают средний образец для анализа массой 0,5-1кг.
Среднюю пробу кормов травяных помещают в банку с плотно закрывающейся крышкой или полиэтиленовый пакет и направляют в лабораторию вместе с паспортом качества.
- Лабораторный анализ образцов.
1. Для предприятий по производству кормов рекомендуется проводить постоянный входной (исследование сырья) и выходной контроль продукции (готовые корма) на содержание миктоксинов.
2. Для молочно-товарных, свиноводческих и птицеводческих предприятий рекомендуется проведение исследований кормов (в первую очередь комбикормов и зерна) не реже 1 раза в квартал. Исследования должны охватывать период заготовки кормов и окончание сроков их хранения.
3. Рекомендуется проведение исследований по определению не менее 6 видов микотоксинов с обязательным включением следующих видов: Т-2 токсин, охратоксин, ДОН, афлотоксин, зеараленон, фумонизин.
Традиционные методы лабораторного контроля - тонкослойная, жидкостная и газожидкостная хроматография - позволяют обеспечить достаточный предел обнаружения микотоксинов, однако характеризуются высокой стоимостью оборудования, колонок, значительным расходом дорогостоящих растворителей, длительным временем пробоподготовки. Указанные особенности ограничивают широкое использование данных методов непосредственно в сфере производственного или предконтрактного контроля.
В последнее время, особенно в целях скрининга и в рутинной лабораторной практике, широко применяется более удобный метод иммуноферментного анализа, стоящим первым в списке арбитражных методов контроля остатков органических токсикантов в продовольственном сырье, согласно директиве Евросоюза № 93/257/ЕЕС. Данный метод контроля не только характеризуется высокой экспрессностью и чувствительностью определения, но и очень прост в реализации. Высокая гибкость и эффективность метода позволяет исследовать как единичные пробы, так и десятки проб одновременно, при этом анализ всех микотоксинов выполняется на одной методической и инструментальной платформе.
- Обобщение результатов анализа.
Инспектирование и мониторинг - система повторных количественных анализов степени загрязнения, как отдельных пищевых продуктов, так и рациона питания в целом по стране или определенном регионе страны. Мониторинг позволяет установить: уровень загрязнения и определить его вариабельность во времени; установить причины и характер изменения уровня загрязнения; выявить корма и сырьё, являющихся наиболее благоприятным субстратом для продуцентов микотоксинов; подтвердить эффективность мероприятий по снижению загрязнения; предотвратить поступление в пищу сырья и кормов с высоки уровнем загрязнения. Особое значение приобретает контроль при характеристике качества кормов, импортируемых из других стран.
7.4 Методы снижение влияния микотоксинов на организм сельскохозяйственных животных
Противогрибную обработку кормов (детоксикацию с деконтаминации) проводят вынужденно, когда установлена токсичность их для животных. Средства и методы детоксикации должны разрушать, инактивировать или удалять микотоксин, препятствовать образованию токсических или канцеро¬генных веществ в конечной продукции, не нарушать питательной ценности продукта и его усвояемости, значительно не изменять технологических свойств корма, разрушать споры и мицелий гриба.
- Детоксикация кормов - методы, с помощью которых микотоксины лишаются токсических свойств.
1. Химические методы - применение кислот и щелочей, например метанолом, нашатырным спиртом, гидроокисью аммония, аммиаком, озоном, бисульфитом натрия, пропионовой кислотой уксусной кислотой, аскорбиновой, бензойной кислотой, генцианвиолетом, ортофенилфенолом, дифенилом, формальдегидом, 8-хинолинолом, фенилртуть-ацетатом едким натром, кальцинированной содой, пиросульфитом натрия и др.
2. Биологические методы, включающие разрушение токсина ферментами, вырабатываемыми различными микроорганизмами (бактериями и грибами). Ферменты модифицируют микотоксины до безопасных веществ, воздействуя на ту часть молекулы, которая ответственно за токсическое действие. Такой подход особенно важен и, возможно, единственно эффективен для неполярных микотоксинов, которые практически не связываются адсорбентами (трихотецены, зеараленон, охратоксины). Детоксикация микотоксинов происходит в результате действия ферментов, обладающих оксидоредуктазной, гидролитической (эпоксидгидролазы, карбоксилэстеразы, лактоногидролазы) и трансферазной (УДФ-гликозилтрансферазы) активностью (Олин, Проваген, Моноспорин, Бацелл, Пролам и т.д.).
К таким методам относится применение пробиотических препаратов, разрушающих микотоксины (например, содержащих Bacillus subtilis). Кроме того, пробиотические микроорганизмы продуцируют целый ряд биологически активных веществ, которые повышают устойчивость организма животных к негативному действию микотоксинов (вещества, подавляющие развитие патогенных бактерий - органические кислоты и природные антибиотики; факторы, повышающие биодоступность питательных веществ - гидролитические ферменты и поверхностно-активные вещества; незаменимые компоненты рациона - витамины и аминокислоты). В наших исследованиях подтверждена эффективность пробиотических препаратов в качестве средств защиты от микотоксикозов животных.
3. Физические методы - сортировка, термическая инактивация, облучение, ультразвук или экстракция контаминированных продуктов, которые малоэффективны.
- Деконтаминация кормов - методы удаления микотоксинов из загрязненного корма с применением различных видов адсорбентов.Связывая микотоксины, адсорбенты ингибируют их поступление из желудочно-кишечного тракта, снижают токсический эффект на организм и предотвращают контаминацию этими соединениями и их метаболитами конечных продуктов, предназначенных для потребления человеком. Методом адсорбции эффективно удаляются полярные микотоксины (это в основном афлатоксины, в некоторой степени фумонизины). В то же время неполярные токсины одними адсорбентами практически не сорбируются, а другими сорбируются недостаточно эффективно. Степень нейтрализации микотоксинов зависит и от адсорбционной емкости адсорбента. Этот показатель и степень пораженности корма определяют норму ввода адсорбента в корма. Существенными свойствами адсорбентов являются способность работать в широком интервале рН и необратимость связывания микотоксинов. Некоторые адсорбенты обладают свойством адсорбировать еще и питательные вещества, витамины, микроэлементы, что необходимо учитывать при их применении.
Наиболее эффективными являются поликомпонентные сорбирующие препараты, содержащие в своем составе цеолиты, бентониты и алюмосиликаты (Элитокс, Кормо-Токс, Микосорб, Сорбитокс, Токсифин и т.д.). Гидратированные натрий кальций алюмосиликаты признаны лучшими из неорганических адсорбентов. Это доказано лабораторными и производственными исследованиями многих независимых научных центров. Их адсорбционная емкость в отношении афлатоксинов достигает 60-70мг/г (для сравнения бентониты - до 9мг/г), оптимальная адсорбционная активность наблюдается в широком интервале рН - от 2 до 10 и при температуре от 25 до 42°С.
7.5 Характеристика препаратов, применяемых для снижения уровня грибов в почве и микотоксинов в кормах и организме животных.
7.5.1. Обработка почв. Глиокладин - биологический фунгицид - для подавления возбудителей грибных заболеваний. Действующее вещество - грибы Trichoderma harziannum ВИЗР - 18 и комплекс метаболитов (полезная почвенная микрофлора).Эффективно подавляет грибные заболевания: корневые гнили, увядания различной этиологии, аскохитоз и антракноз, альтернариоз и серая гниль. Механизм действия: гриб в почве образует хорошо развитую грибницу, размножается спорами. Быстро развивается в богатых органическим веществом почвах при влажности 60-80% от ППВ и температуре 14-27 С. T.harziannum оплетает колонии других микроорганизмов, препятствуя их росту и развитию. Порошковая форма - полный аналог BioponicMix от GHE. Споровая концентрация препарата ГЛИОКЛАДИН на 2 степени выше препарата BioponicMix. Препаративная форма: порошок, таблетки. Снижает токсичность почв после пропаривания или применения химических средств защиты растений путем восстановления почвенной микрофлоры. Гарантийный срок хранения - 6 месяцев со дня изготовления при температуре от 0 до +25 С без нарушения упаковки. Совместимость: выдерживать интервал в применении с биологическими препаратами Алирин-Б, Гамаир, Планриз и др. не менее 7-14 дней. Перечень защищаемых культур растений: огурец защищенного и открытого грунта, томаты защищенного и открытого грунта, рассада цветочных растений и комнатные цветочные растения.
Алиприн - Б - биологический фунгицид. Рекомендуется применять совместно с препаратом ГАМАИР. Действующее вещество - бактерии Bacillus subtilis 10-ВИЗР (полезная почвенная микрофлора). Эффективно подавляет грибные заболевания: корневые гнили, септориоз, ризоктониоз, фитофтороз, альтернариоз, церкоспороз, трахомикозное увядание, мучнистая роса, пероноспороз, парша, монилиоз, серая гниль, ржавчина. Препаративная форма: таблетки. Снижает токсичность почв после пропаривания или применения химических средств защиты растений путем восстановления почвенной микрофлоры. Увеличивает содержание белка и аскорбиновой кислоты в продукции на 20-30% и снижает уровень накопления нитратов в ней на 25-40%. Гарантийный срок хранения - 1,5 года со дня изготовления при температуре от 0 до +250С без нарушения упаковки. Совместимость: в рабочем растворе совместим с биопрепаратами, регуляторами роста, органическими и минеральными удобрениями, кроме химических бактерицидов. Перечень защищаемых культур растений: пшеница, сахарная свекла, картофель.
Гамаир - биологический фунгицид - для подавления возбудителей бактериальных и грибных заболеваний. Рекомендуется применять совместно с препаратом АЛИРИН-Б. Действующее вещество - бактерии Bacillus subtilis М-22 ВИЗР и комплекс метаболитов растений (полезная почвенная микрофлора). Эффективно подавляет грибные и бактериальные заболевания: бактериальный рак томата, некроз сердцевины стебля, мягкие гнили и широкий спектр грибных фитопатогенов. Препаративная форма: таблетки. Гарантийный срок хранения - 1,5 года со дня изготовления при температуре от 0 до +25 С без нарушения упаковки. Совместимость: в рабочем растворе совместим с биопрепаратами, регуляторами роста, органическими и минеральными удобрениями, кроме химических бактерицидов. Перечень защищаемых культур растений: пшеница, сахарная свекла, картофель.
7.5.2 Препараты для силосования. Битасил (Bitasil) состоит из смеси амилолитического молочнокислого стрептококка Lactococcus lactis subsp.lactis, молочнокислых бактерий Lactobacterium plantarum, мелассы свекловичной, соевого гидролизата, натрия хлористого, воды. В 1 см3 закваски содержится не менее 2х107 КОЕ (колониеобразующих единиц) молочнокислых бактерий. Не содержит генно-инженерно-модифицированных организмов. Битасил представляет собой жидкую суспензию со взвешенными частицами от бежевого до коричневого цвета с оттенками разной интенсивности, с кисловатым запахом. Битасил расфасовывают по 2, 5, 10 дм3 в герметичную тару, изготовленную из полимерных материалов. Каждую единицу фасовки снабжают инструкцией по применению и этикеткой с указанием: наименования организации-производителя, наименования препарата, объем препарата, номера партии, номера контроля, даты изготовления (мес. год), срока годности, условий хранения, обозначения ТУ. Битасил хранят в сухом, защищенном от света помещении при температуре от 2° до 10°С. Битасил является микробиологическим консервантом растительного сырья. Входящие в состав закваски бактерии Lactobacterium plantarum и Lactococcus lactis subsp. Lactis имеют преимущество по сравнению с естественными молочнокислыми бактериями в том, что обладают большей способностью к быстрому и обильному образованию молочной кислоты. Это способствует регуляции бродильных процессов в силосе, предотвращает маслянокислое брожение, снижается объем образуемого силосного сока и тем самым увеличивается сохранность белка. В результате повышается аэробная стабильность силосуемой массы, увеличивается количество молочной и уксусной кислот, этилового спирта, что позволяет достигнуть оптимальных значений рН 3,8-4,2 и исключить деятельность гнилостных, маслянокислых бактерий, плесневых грибов. Показания к применению. Битасил предназначен для быстрого и эффективного течения процесса силосования и сенажирования растительного сырья и повышения стабильности готового силоса и сенажа. Для силосования и сенажирования растительного сырья используют рабочий раствор закваски. Для этого 1,0 дм3 Битасил вносят в 100,0 дм3 чистой питьевой воды, тщательно перемешивают. Полученным раствором равномерно опрыскивают зеленую массу по мере загрузки ее в сооружение из расчета 5 дм3 на каждую тонну. Опрыскивание производят после равномерного распределения растительной массы по траншее слоями не более 40см. В поверхностные слои закваску вносят в большем количестве. При использовании специализированной силосоуборочной техники, оборудованной приспособлением для внесения силосной закваски, Битасил вносится в силосуемую массу непосредственно во время ее скашивания и измельчения в поле, в той же пропорции - 5 дм3 рабочего раствора на 1т растительной массы. 1,0 дм3 закваски рассчитан для консервирования 20 тонн зеленой массы. В тот же день силосуемую (сенажируемую) массу укрывают сверху полиэтиленовой пленкой, которую особенно тщательно заделывают у стен траншей и прижимают грузом по всей поверхности. Применение закваски целесообразно при любых способах силосования и сенажирования (горизонтальные траншеи, железобетонные траншейные сооружения, полиэтиленовые рукава и др.). Побочных явлений после скармливания силоса или сенажа, приготовленного с помощью Битасил, не наблюдается. Противопоказаний для применения Битасил не установлено. Продукцию животноводства, полученную с применением кормов, приготовленных с использованием закваски для силосования и сенажирования кормов Битасил, можно использовать в пищевых целях без ограничений. Меры личной профилактики . Специальных мер для личной профилактики при работе с закваской для силосования и сенажирования растительного сырья Битасил не предусматривается. Препарат следует хранить в местах, недоступных для детей. Гарантийный срок использования: 3 месяца от даты изготовления. Битасил после истечения срока годности не должен применяться.
7.5.4. Пробиотические препараты.
«Пролам» (Prolam) содержит жизнеспособные штаммы молочнокислых бактерий Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (B-5788), Lactobacillus acidophilus 43c (B-3235) в количестве не менее 5×107 КОЕ/см3, молочнокислых стрептококков Lactococcus lactis subsp. lactis 574 (B-3145), Lactococcus lactis subsp. lactis 1704-5 (B-3192) - 5×107 КОЕ/см3, бифидобактерий Bifidobacterium animalis 83 (АС-1248) - 1×107 КОЕ/см3 и вспомогательные вещества - воду, мелассу свекловичную, молоко или молочную сыворотку. Не содержит ГМО. «Пролам» представляет собой суспензию от светло-коричневого до кремового цвета с кисловатым запахом. «Пролам» расфасовывают по 2,0; 5,0; 10,0 дм3 в стерильную герметичную тару, изготовленную из полимерных материалов. Микроорганизмы, входящие в состав «Пролама», нормализуют микрофлору желудочно-кишечного тракта, повышают конверсию корма, усиливают неспецифический иммунитет, и, как следствие, улучшают сохранность и продуктивность сельскохозяйственных животных. Пролам назначают поросятам индивидуально или групповым методом с водой или кормом. Растворы перед употреблением взбалтывают до однородной массы. Поросятам при рождении до 8-дневного возраста препарат следует вводить перорально при помощи шприца-дозатора. Рекомендуемые однократные суточные профилактические дозы для поросят с 1-го дня жизни и до конца периода доращивания недельными курсами (с недельным перерывом) из расчета 3-5мл на голову в сутки. Цыплятам-бройлерам - через воду либо корм из расчета 0,1мл на голову в день с 1-го по 14-й день жизни, с 22-го по 28-й день и с 36-го по 42-й день жизни;цыплятам яичных кроссов - через воду либо корм из расчета 0,1мл на голову в день с 1-го по 14-й день жизни, с 22-го по 28-й день; взрослой птице - в преддверии и в периоды стрессовых ситуаций в течение семи дней подряд из расчета 2мл на 1 литр выпиваемой в день воды.
Рекомендации производству.
Для повышения сохранности и прироста живой массы поросят, сохранения здоровья свиноматок, рекомендуем новую схему с применением пробиотиков для супоросных свиноматок.
Таблица 11 - Схема применения пробиотиков для супоросных свиноматок
| Физиологический период свиноматок | Традиционная схема | Новая схема с применением пробиотиков | |
|---|---|---|---|
| «Бацелл-М» | «Моноспорин» | ||
| Свиноматки за 30 дней до опороса |
- | Скармливание 0,2% к массе комбикорма ежедневно до опороса |
10мл/гол по схеме: 10 дней выпаивание 10 дней перерыв |
| Свиноматки за 45 дней до опороса |
- | ||
Экономическая эффективность от применения пробиотических препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» для свиноматок до опороса составляет 6-10 руб соответственно при затратах на пробиотики 1 рубль.
Список использованных источников
1. Антипов, В.А. Микотоксикозы - важная проблема животноводства/ В.А.Антипов, В.Ф.Васильев, Т.Г.Кутищева // Ветеринария. - 2007. - №11. - С.7 - 9.
2. Бекесова, Т. Как защитить корма от плесени / Т.Бекесова // Био. - 2003. - № 8. - С.11-12.
3. Бурдов, Л.Г. О результатах анализа кормов на содержание микотоксинов / Л.Г.Бурдов, Л.Е.Матросова // Ветеринарный врач. - 2011. - №2. - С.7 - 9
4. Бурдов, Н.Г. Загрязнённость кормов микотоксинами грибов рода фузариум и возможности их нейтрализации / Н.Г.Бурдов, Е.И.Марасинская, Л.В.Фролова // Ветеринарный врач. - 2007. - № 3. - С.34-36.
5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / под ред. А.А.Воробьёва. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. - 704 с.
6. Методические указания по экспресс-определению микотоксинов в зерне, кормах и компонентов для их производства. - Введ. 2005-10-10. - М.: Изд-во стандартов, 2005. - 24 с.
7. Донник, И.М. Разработка регламента проведения оценки качества сырья и кормов для с.х. животных и птицы. Научные рекомендации / И.А.Шкуратова, И.Ю. Вершинина - Екатеринбург.: ООО «Ира УТК», 2008. - 182 с.
8. Доминов, Р.Р. Применение энтеросорбента «Полисорб ВП» в птицеводстве / Р.Р.Доминов // Био. - 2003. - №4 (31). - С. 7-9.
9. Иванов, А.В. Актуальные проблемы профилактики микотоксикозов / А.В. Иванов, М.Я. Тремасов, М.Г. Нуртдинов // Ветеринарный врач. - 2008. - № 2. - С.2 - 3.
10. Иванов, А.В. Микотоксикозы животных (этиология, диагностика, лечение, профилактика) / А.В.Иванов, М.Я.Тремасов, К.Х.Папуниди - М.: Колос, 2008. -177 с.
11. Кононенко, Г.П. Система микотоксикологического контроля объектов ветеринарно-санитарного и экологического надзора / Г.П.Кононенко // Автореф. дисс. канд. вет. наук. - М., 2005. - 48 с.
12. Микотоксины и микотоксикозы / под ред. Д.Диаза. - М.: Печатный Город, 2006. - 376 с.
13. Папуниди, Э.К. Ветеринарно-санитарная оценка продуктов животноводства при сочетанном воздействии пиретройда и микотоксина / Э.К.Папуниди [и др.]. // Ветеринарный врач. - 2007. - № 1. - С.8-10.
14. Петрович, С.В.Микотоксикозы животных / С.В.Петрович. - М.: Росагропромиздат, 1991. - 238 с.
15. Профилактика кормовых отравлений и микотоксикозов сельскохозяйственных животных . Рекомендации./ Н.А.Солдатенко [и др.] - Новочеркасск.: Издательство «ЦВВР», 2008. - 16 с.
16. Профилактика микотоксикозов животных / Б.Н.Хмелёвский [и др.]. - М.: Аграпромиздат, 1985. - 270 с.
17. Микотоксины - скрытая опасность в кормах / Н.А.Солдатенко [и др.] // Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчёл. - М., 2008. - С.356-361.
18. Труфанов О. В. Современные методы обеззараживания зерна и комбикормов, контаминированных микотоксинами // Ефективні корми та годівля. - 2007. - № 4. - 17-21.
19. Тремасов, М.Я. Профилактика микотоксикозов животных в Республике Марии Эл / М.Я.Тремасов // Ветеринария. - 2005. - № 1. - С.6 - 7.
20. Тутельян, В.А. Микотоксины. Медицинские и биологические аспекты / В.А.Тутельян, Л.В.Кравченко. - М.: Медицина, 1985. - 139 с.
21. Хусяинов, Р.Х. Микотоксикозы птиц / Р.Х.Хусяинов, Ф.Л.Радун // Международный московский конгресс по болезням мелких домашних животных. - М., 2004. - С. 135-136.