«Разработка способа схем профилактики микотоксикозов свиней с использованием пробиотических препаратов» ООО "Биотехагро"
РАЗРАБОТКА И ПРОИЗВОДСТВО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ И РАСТЕНИЙ
  • ПРИМЕНЕНИЕ

ОТЧЕТ
о научно-исследовательской работе:

«Разработка способов профилактики микотоксикозов свиней с использованием пробиотических препаратов»

 

 

Российская академия сельскохозяйственных наук
Государственное научное учреждение
Уральский научно-исследовательский ветеринарный институт
(ГНУ Уральский НИВИ Россельхозакадемии)

Директор ГНУ Уральского НИВИ РАСХН, доктор ветеринарных наук, профессор
И.А.Шкуратова
Зам.директора по научной работе
ГНУ Уральского НИВИ РАСХН,
Доктор биологических наук, доцент
М.В.Ряпосова
Ответственный исполнитель
Старший научный сотрудник отдела
Экологии и иммунопатологии
Доктор биологических наук, доцент
И.А.Лебедева

2006-2012г.г.

Реферат

Отчет 36 с., 10 табл., 15 рис., 20 использованных источников литературы.

МИКОТОКСИНЫ, МЕТАБОЛИТЫ ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ, ПРОДУЦЕНТЫ ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ, ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ.

Объектом исследования были корма, зараженные микотоксинами, лабораторные мыши, свиньи.

Цель работы: Разработка способов профилактики микотоксикозов свиней с использованием пробиотических препаратов».

В процессе работы проводилось мониторинговое исследование поступающих кормов и сырья в период с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года из предприятий и хозяйств, находящихся на территории Среднего Урала. Изучены особенности проявления микотоксикозов (клинико-морфологические, биохимические, иммуно-гематологические, патологоанатомические показатели) у экспериментальных лабораторных животных и животных, находящихся в условиях технологического цикла. Проведено сравнительное изучение применения лабораторным животным сорбирующих и пробиотических препаратов для профилактики микотоксикозов.

В результате исследования разработано руководство по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов, позволяющее повысить их сохранность на 10-15%.

 

СОДЕРЖАНИЕ

Обозначения и сокращения

Введение

1. Основная часть

1.1. Материалы и методы исследований

1.2. Результаты исследований

1.2.1. Мониторинговые исследования кормов и кормового сырья на территории Среднего Урала

1.2.2. Эффективность применения препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» при экспериментальном воспроизведении микотоксикозов на лабораторных животных

1.2.3. Влияние пробиотических препаратов «Бацелл-М», «Моноспорин» на снижение уровня микотоксинов в кормах

1.2.4. Влияние пробиотических препаратов «Бацелл-М», «Моноспорин» и «Пролам» на снижение уровня микотоксинов у свиноматок

Заключение

Выводы

Рекомендации производству

Список использованных источников

 

ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

МДУ - максимально допустимый уровень

ДОН - деоксиниваленол

ИФА - имунноферментный анализ

 

ВВЕДЕНИЕ

Среди незаразных заболеваний сельскохозяйственных животных значительное место занимают микотоксикозы - отравления, возникающие при скармливании животным кормов, пораженных токсичными метаболитами плесневых грибов (С.В.Петрович, 1991; В.А.Антипов, 2006). Эта проблема находится в центре внимания таких авторитетных международных организаций, как Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ), Продовольственная и сельскохозяйственная организация ООН (ФАО), Программа ООН по окружающей среде (ЮНЕП), Международное агентство по исследованию рака (МАИР) и др. Она несёт в себе значительную угрозу загрязнения окружающей среды и возникновения токсикозов сельскохозяйственных животных и человека (Р.Р.Доминов, 2003; А.А.Воробьёв, 2006).

Микотоксины наносят огромный экономический вред животноводству и птицеводству во всём мире. Рост плесневых грибов снижает питательную ценность корма, ухудшая его потребление, что приводит к падению продуктивности животных (Т.Бекесова, 2003).

В настоящее время известно более 300 различных микотоксинов, потребление которых с кормами и кормовым сырьём приводит к токсическому эффекту различной степени у млекопитающих и птиц (В.А.Тутельян и соавт., 1985; Д.Диаза, 2006). Сегодня, необходимо искать защиту не от одного, двух, а от целого ряда микотоксинов и число их постоянно растет. К тому же в зараженных кормах и кормовом сырье они, как правило, находятся в сочетании, взаимно усиливая действие, друг друга (Б.Н.Хмелёвский и соавт., 1985; Р.Х.Хусяинов и соавт., 2004).

Многие микотоксины обладают мутагенными, канцерогенными и иммуносупрессивными свойствами, и опасны для животных и человека (Н.Г.Бурдов, 2007). Токсические эффекты их весьма разнообразны и зависят от дозы токсина, продолжительности введения, вида, возраста животного, пола, физиологического статуса (Н.А.Солдатенко и соавт., 2008). Различные виды и концентрация микотоксинов варьируют каждый год, что связано с годовыми изменениями погодных условий и другими экологическими факторами (Э.К.Папуниди и соавт., 2007; А.В.Иванов и соавт., 2008).

Проблема микотоксикозов действительно значительная и новые знания в этой области актуальны как никогда (Диаза Д., 2006).

Для того чтобы борьба с микотоксикозами животных была более эффективной необходимо дальнейшее изучение и совершенствование средств и способов защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов, проведение систематического мониторинга на наличие микотоксинов в кормах и сырье, производимых на комбикормовых предприятиях и используемых на животноводческих комплексах на территории Среднего Урала.

Цель работы - разработка способов профилактики микотоксикозов свиней с использованием пробиотических препаратов.

Новизна работы - впервые проведен мониторинг степени зараженности микотоксинами кормов и кормового сырья на территории Среднего Урала в зависимости от их вида. Получены данные по эффективности пробиотиков на основе B.subtilis при экспериментальном воспроизведении микотоксикозов на лабораторных животных. Разработано комплексное руководство по средствам и способам защиты животных от микотоксикозов, на стадиях заготовки, хранения и потребления корм.

 

1. Основная часть

Выбор направления исследований. В настоящее время в животноводстве и птицеводстве одной из актуальных является проблема микотоксикозов - специфических заболеваний, возникающих в результате поедания животными и птицей кормов, поражённых токсическими метаболитами плесневых грибов (Петрович С.В., 1991).

Совсем недавно ФАО (Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединённых Наций) констатировала, что 25% зерна, которое производится в мире, заражено микотоксинами. Вполне возможно, что этот показатель несколько занижен (Э.К.Папуниди и соавт., 2007).

Американская компания Pioneer Hi-Bred International, которая занимается выведением новых сельскохозяйственных культур уже более 85 лет, сообщает, что 95% микотоксинов находятся именно в урожае (Л.Г.Бурдов и соавт., 2011; А.В.Иванов и соавт., 2008; В.А.Антипов и соавт., 2007). В России загрязненность фуражного зерна составляет в среднем 39,5-74,7%. В Западной Сибири этот показатель для некоторых видов грибов достигает 85,3%, при этом количество токсичных и остротоксичных изолятов может превышать 70-80% (Н.А.Солдатенко и соавт., 2008).

По данным Министерства сельского хозяйства Российской Федерации, агентства по сельскому хозяйству управления ветеринарии, результаты микологического анализа показали, что поражение микотоксинами зерна имеет место во всех обследованных регионах Российской Федерации (К.П.Кононенко и соавт., 2005; М. Я. Тремасов, 2005).

Результаты обследования зерна пшеницы, ячменя, овса и ржи в Российских регионах, выполненные за период 1995-2002гг., составили пораженность по Т-2 токсину в Уральском регионе - 36,4%, Заподно-Сибирском - 37,7%, Восточно-Сибирском - 10,6% и Дальневосточном регионе - 30,5%. Общими для всех регионов были наибольшая частота обнаружения Т-2-токсина в зерне овса и преобладание диапазона содержаний 10-100мкг/кг. В Уральском, Западно-Сибирском и Восточно-Сибирском регионах достаточно часто встречалось фоновое загрязнение менее 10мкг/кг в 24-36% проб от числа положительных (К.П.Кононенко и соавт., 2005).

В Уральском регионе экологическая обстановка, связанная с высоким уровнем концентрации промышленных предприятий (загрязнением окружающей среды тяжелыми металлами, радионуклидами и т. д.), во многом способствует образованию микотоксинов, которыми поражены корма и сырье (Донник и соавт., 2008).

В период с 2006 по 2009 год на базе ГНУ Уральского НИВИ Россельхозакадемии был проведен мониторинг кормов и сырья на наличие микотоксинов, который показал, что поступавшие пробы на 34% поражены опасными метаболитами плесневых грибов. Наиболее часто в кормах и сырье обнаруживали Т-2 токсин - 38%, охратоксин - 20%, зеараленон - 39%, ДОН - 11%, афлатоксин - 21% и фуманизин - 10%. Полученные данные способствовало дальнейшему проведению мониторинга кормов и сырья, поступающих на исследование микотоксинов с предприятий и хозяйств, расположенных на территории Среднего Урала.

Таким образом, микотоксикозы - это чрезвычайно значимая проблема, требующая проведения мониторинга кормов и сырья, изучения видового состава, распространения и контаминации плесневых грибов в кормах и комбикормовом сырье, а так же изучения особенностей клинического проявления микотоксикозов, эффективности сорбирующих препаратов для разработки руководства по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от действия метаболитов плесневых грибов.

 

1.1. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в Ветеринарном лабораторно-диагностическом центре ГНУ Уральский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук, в период 2012 года.

Для определения степени зараженности кормов и сырья микотоксинами иммуноферментному анализу была подвергнуто 886 проб кормов и сырья, поставляемых с предприятий и хозяйств, расположенных на территории Среднего Урала.

Иммуноферментный метод проводили в соответствии с методическими указаниями (Методические указания по экспресс-определению микотоксинов в зерне, кормах и компонентов для их производства, утвержденные Министерством сельского хозяйства Российской Федерации 10.10.2005 № 5-1-14/1001) и ГОСТом Р 52471-2005 «Иммуноферментный метод определения микотоксинов» (2005).

Отбор средних проб кормов и сырья для их производства осуществляли по ГОСТу 28495-90 «Продукция микробиологическая. Правила приёмки и методы отбора проб» (1990).

С целью определения возможности профилактировать развитие микотоксикозов проведены экспериментальные исследования на лабораторных животных - 60-ти здоровых мышах. Животным скармливали комбикорма, естественно контаминированные несколькими видами микотоксинов (Т-2 токсин и микотоксин ДОН) с одновременным введением в рацион сорбирующего препарата Кормо-Токс.

Клинические исследования опытных и контрольных животных проводили общепринятыми методами с определением общего состояния организма и деятельности отдельных его систем. Иммуно-гематологические исследования проводили по общепринятым методикам (Г.А.Симонян, Ф.Ф.Хисамутдинов, 1995).

Биохимические исследования проводили в соответствии с инструкциями, прилагающимися к тест-системам фирмы «Витал Диагностикс СПб», определяли содержание в крови животных билирубина, амилазы, креатинина, мочевины.

Статистическую и математическую обработку полученных цифровых данных проводили с помощью стандартной программы Microsoft Excel, включающей подсчет средней величины (М), средней ошибки (m), степень достоверности «Р» устанавливали по Стьюденту.

 

1.2. Результаты исследований

1.2.1 Мониторинговые исследования кормов и кормового сырья на территории Среднего Урала

Для определения степени зараженности кормов и сырья микотоксинами иммуноферментному анализу было подвергнуто 886 проб в 2012 года.

Проведенными исследованиями установлено, что пробы сырья, были на 100% контаминированы несколькими видами микотоксинов, не превышающими максимально допустимых уровней (МДУ).

В 2007 году пораженность кормов и кормового сырья составила 53%. Выделенные микотоксины имели разные уровни накопления: Т-2 токсин от 0,1 до 6,84мг/кг; охратоксин от 3,0 до 19,8мг/кг; зеараленон от 1,3 до 1,7мг/кг; фуманизин от 1,0 до 1,4мг/кг; афлатоксин от 0,01 до 0,6мг/кг и ДОН от 2,4 до 21,0 мг/кг. Доминирующими видами микотоксинов в пробах стали Т-2 токсин (превышение МДУ в 68,4 раза), охратоксин (превышение МДУ в 396 раза), афлатоксин (превышение МДУ в 24,4 раза) и микотоксин ДОН (превышение МДУ в 10,5 раз).

В 2008 году выявлено 27% проб, пораженных микотоксинами, с сочетанием различных микотоксинов и превышением максимально допустимых уровней по микотоксину ДОН в 1,7 раза и Т-2 токсину в 1,3 раза, но при этом с доминированием в пораженных образцах зеараленона, без превышения максимально допустимых уровней (МДУ). В пробах наблюдались разные концентрации микотоксинов: Т-2 токсин в концентрации - 0,13мг/кг; ДОН от 2,18 до 3,41мг/кг; охратоксин - 0,002мг/кг; зеараленон - 0,5мг/кг; афлатоксин - 0,001мг/кг.

Контаминация микотоксинами кормов и комбикормового сырья в 2009 году составила 16% с превышением максимально допустимых уровней: охратоксина в 2,6 раза, Т-2 токсина в 28 раз и фуманизина в 1,5раза. Уровни накопления микотоксинов составили: Т-2 токсин от 0,1мг/кг до 2,8мг/кг, охратоксин от 0,05 мг/кг до 0,13мг/кг, фуманизин от 1мг/кг до 1,5мг/кг.

Пораженность микотоксинами кормов и сырья в 2010 году составила 4,3% с превышением максимально допустимых уровней: охратоксина в 79,4 раза, Т-2 токсина в 3 раза, афлатоксина в 11,2 раза, фуманизина в 1,5 раза. Обнаруженные микотоксины содержали различные уровни накопления: охратоксин от 0,05мг/кг до 3,97мг/кг, Т-2 токсин от 0,125мг/кг до 0,3мг/кг, афлатоксин от 0,025мг/кг до 0,28мг/кг, фуманизин от 1,0мг/кг до 2,5мг/кг.

В 2011 году в 37,9% проб были обнаружены токсигенные метаболиты плесневых грибов с превышением максимально допустимых уровней по микотоксину ДОН в 2,8 раза. Обнаруженные микотоксины представляли различные уровни накопления: ДОН от 1,61мг/кг до 2,8мг/кг, Т-2 токсин от 0,02мг/кг до 0,1мг/кг. В 100% поступивших проб были найдены следы микотоксинов, не превышающих максимально допустимые уровни, с сочетанием до 6 различных видов опасных метаболитов грибов в одном образце. Однако следует отметить, что даже небольшие концентрации микотоксинов, способны накапливаться в органах и тканях, вызывая микотоксикозы сельскохозяйственных животных.

В 1-2 квартале 2012 года контаминация микотоксинами составила 65,8% с превышением максимально допустимых уровней: ДОН и Т-2 токсина в 2 раза; афлатоксина в 3 раза. Наблюдали различные уровни накопления микотоксинов: ДОН от 1,3мг/кг до 2мг/кг, Т-2 токсин от 0,1мг/кг до 0,2 мг/кг, афлатоксин от 0,025мг/кг до 0,075мг/кг. В пробах доминировали Т-2 токсин и ДОН.

Таким образом, пораженность микотоксинами проб с 2006 по 1-2 квартал 2012 года составила в среднем 22,4%: Т-2 токсином - 14%; зеараленоном - 4%, фуманизином - 2,6%; ДОН - 1%; афлатоксином - 1%.

Данные по пораженности микотоксинами кормов и сырья представлены на рисунках 1 и 2.

Рисунок 1 - Контаминация проб микотоксинами с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года

Рисунок 1 - Контаминация проб микотоксинами с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года

 

 

Рисунок 2 - Контаминация кормов и сырья различными видами опасных продуцентов плесневых грибов с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года

Рисунок 2 - Контаминация кормов и сырья различными видами опасных продуцентов плесневых грибов с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года

 

 

Одновременно проведен анализ степени пораженности различных видов кормов и сырья метаболитами плесневых грибов (табл.1).

Таблица 1 - Уровень пораженности различных видов кормов микотоксинами, n=886

Виды кормов Количество проб корма,
пораженных
микотоксинами от общего
числа поступивших проб, %
Комбикорма (n=99):
- полнорационный комбикорм
- кормовые смеси
- премиксы
- концентраты
11,00
10,40
0,20
0,10
0,30
Концентрированные корма (n=56):
- пшеница
- кукуруза
- ячмень
- рожь
- соя полножирная
- соя экструдированная
6,30
3,80
0,30
1,70
0,10
0,10
0,30
Сочные корма (n=18):
- сено
- сенаж
- силос
2,0
0,1
0,7
1,2
Отходы перерабатывающей промышленности (n=15):
- глютен кукурузный
- шрот подсолнечный
- шрот соевый
- жмых подсолнечный
1,70
0,20
0,40
0,50
0,60
Зерно-сенаж (n=1) 0,10
Зерно-смесь (n=7) 0,70
Зеленая масса (n=2) 0,20

Исследования показали, что в период с 2006 по 1-2 квартал 2012 года наиболее часто выявляли контаминацию миктоксинами комбикормов (11% от общего количества поступивших проб), концентрированных кормов (6,3%) и сочных кормов (2%). Наибольшую поражённость микотоксинами отмечали при исследовании полнорационных комбикормов - в среднем 10,4% исследуемых проб в течение анализируемого периода. Это могло быть связано с тем, что кормовое сырье, поступающее, для производства комбикормов уже было контаминировано микотоксинами. Из всех видов концентрированных кормов, поступивших на исследование, наиболее пораженными были пшеница - 3,8% и ячмень - 1,7%. Из сочных видов кормов чаще всего обнаруживали микотоксины в силосе - 1,2% проб от общего числа кормов всех видов.

При этом, в пробах различных видов кормов обнаруживали сочетание нескольких видов микотоксинов (табл. 2).

Таблица 2 - Встречаемость в кормах и сырье различных видов микотоксинов и их сочетаний

Пробы Виды микотоксинов
Полнорационный комбикорм Т-2, охратоксин, зеараленон,
охратоксин, афлатоксин
Пшеница Т-2, фуманизин, ДОН, афлатоксин
Силос Т-2, охратоксин, зеараленон, ДОН
Сенаж Т-2, охратоксин, зеараленон, ДОН
Ячмень Т-2, ДОН, охратоксин
Жмых подсолнечный Т-2, ДОН
Шрот подсолнечный Т-2, зеараленон
Кукуруза, соевый шрот,
соя полножирная,
соя эксудированная,
сено, глютен кукурузный,
зеленная масса
Т-2 токсин

В период с 2006 года по 1-2 квартал 2012 года пробы кормов и сырья были контаминированны несколькими видами микотоксинов: полнорационный комбикорм содержал до пяти видов микотоксинов; пшеница, силос, сенаж до четырех микотоксинов; ячмень сочетание до трех метаболитов плесневых грибов; жмых подсолнечный и шрот подсолнечный до двух видов опасных продуцентов плесневых грибов; кукуруза, соевый шрот, соя полножирная, соя экструдированная, сено, глютен кукурузный и зеленая масса до одного вида микотоксинов.

В пробах чаще обнаруживали сочетание таких микотоксинов, как Т-2 токсин, ДОН, зеараленон и охратоксин.

Предполагается, что степень контаминации кормов определенными сочетаниями, зависит в первую очередь от развития продуцирующих их плесневых грибов и токсичных свойств метаболитов (П.В.Мирошниченко, 2007).

Была проанализирована пораженность поставляемых кормов и сырья из различных сельскохозяйственных организаций, находящихся на территории Среднего Урала (рис.3).

Рисунок 3 - Контаминация проб микотоксинами, поступавших из различных видов предприятий и сельскохозяйственных организаций, находящихся на территории Среднего Урала

Рисунок 3 - Контаминация проб микотоксинами, поступавших из различных видов предприятий и сельскохозяйственных организаций, находящихся на территории Среднего Урала

 

 

Исследованиями было установлено, что доля пораженных микотоксинами кормов, поступивших из предприятий по их производству (комбикормовые заводы и т.д.) составила в среднем 38% проб, из свинокомплексов - 29% проб, из молочно-товарных предприятий - 19% и из птицеводческих организаций - 14%. Наибольшую степень поражения отмечали в пробах кормов, поступивших из молочно-товарных предприятий.

В результате анализа мониторинговых исследований было установлено, что контаминация кормов и кормового сырья токсинообразующими микромицетами и продуктами их метаболизма имеет широкое распространение на Среднем Урале, что требует разработки руководства по средствам и способам защиты сельскохозяйственных животных от микотоксикозов.

 

1.2.2. Эффективность применения препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» при экспериментальном воспроизведении микотоксикозов на лабораторных животных

Опыт по экспериментальному воспроизведению микотоксикозов, а так же изучению детоксикационного действия пробиотичеких препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» против микотоксинов проводили в условиях вивария Уральского НИВИ, на 70 здоровых белых мышах, обоего пола, живой массой 18-21г.

«Бацелл-М» (Bacell-М). Пробиотическая добавка к корму «Бацелл-М» состоит из микробной массы спорообразующих бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-5225; бактерий Lactobacillus plantarum52 ВКПМ В-2347; Enterococcus faecium М-3185 ВКПМ В-3491; шрота подсолнечного, либо продуктов переработки зерновых или зернобобовых культур. В 1г пробиотической добавки содержится не менее 1,1×108КОЕ (колониеобразующих единиц) бактерий. Не содержит генетически модифицированных организмов (ГМО).

«Моноспорин» - пробиотическая кормовая смесь, состоящая из микробной массы спорообразующих бактерий Bacillus subtilis, мелассы свекловичной, соевого гидролизата, воды.

Действие пробиотических препаратов основано на способности микроорганизмов вырабатывать ферменты, разрушающие микотоксины [Труфанов О.В., 2007].

При воспроизведении микотоксикозов, использовали комбикорма, естественно поражённые микотоксинами (Т-2 токсин и микотоксин ДОН). Корма задавали в течение 10 дней, в дозе 5г/гол один раз в день.

Первой опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный Т-2 токсином в концентрации 0,2мг/кг. Второй группе - комбикорм, пораженный Т-2 токсином в концентрации 0,2мг/кг с введением препарата «Бацелл-М» 0,2% от массы комбикорма в течение 10 дней подряд. Третьей опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный Т-2 токсином в концентрации 0,2мг/кг с введением жидкого препарата «Моноспорин» 4мл/100г корма в течение 10 дней подряд.

Четвертой опытной группе скармливали комбикорм, естественно пораженный микотоксином ДОН в концентрации 3,0мг/кг. Пятой опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный микотоксином ДОН в концентрации 3,0мг/кг с введением «Бацелл-М» 0,2% от массы комбикорма. Шестой опытной группе задавили комбикорм, естественно пораженный микотоксином ДОН в концентрации 3,0мг/кг с введением жидкого препарата «Моноспорин» 4мл/100г корма. Седьмая группа лабораторных животных была сформирована как контрольная, которой скармливали чистые от микотоксинов комбикорма.

В течение 10 дней в опытных и контрольной группе проводился учет живой массы лабораторных животных (табл.3).

Таблица 3 - Показатели живой массы мышей в течение опытного периода, n=70

Группа Количество, гол. Живая масса, г
в 1 день опыта В 10 день опыта ± %
1 опытная 10 20,3 20,5 +0,2 +1,0
2 опытная 10 20,5 21,6 +1,1 +5,4
3 опытная 10 19,0 20,8 +1,8 +9,5
4 опытная 10 20,7 17,1 -3,6 -7,3
5 опытная 10 20,1 20,9 +0,8 +4,0
6 опытная 10 20,0 21,0 +1,0 +5,0
контрольная 10 19,7 20,9 +1,2 +6,1

Из данных таблицы следует, что по показателям живой массы на конец опытного периода в четвертой опытной группе, потреблявшей корма с микотоксином ДОН, были отвесы на -7,3%, что составляет 1/5 начальной живой массы. Мыши похудели. По сравнению с опытными группами 1 и 4, где мыши получали корма с микотоксинами, в других опытных группах, где мыши получали с кормом пробиотикии и в контрольной группе приросты массы составляли от 4,0 до 9,5%.

Признаки микотоксикоза у четвертой опытной группы (получавших микотоксин ДОН) проявились на 5 день скармливания пораженных комбикормов. У мышей отмечались изменения ответной реакции на внешние раздражители, подёргивание конечностями и хвостом, агрессивность, взъерошенность и потеря блеска шерстного покрова, увеличение потребления воды. С 8 по 10 день испытаний наблюдалась гиперемия видимых слизистых оболочек, расстройство нервной системы. Отмечалось снижение потребления корма. У остальных опытных групп получавших комбикорма с микотоксинами (Т-2 токин, микотоксин ДОН) и препаратами «Бацелл-М» и «Моноспорин», а так же у контрольных животных признаки токсикоза не наблюдались.

В конце опытного периода у животных производили отбор проб крови для лабораторного исследования (табл.4-5).

Количество лейкоцитов у четвертой опытной группы (получавшей комбикорм с микотоксином ДОН) было выше на 42% (Р<0,01), по сравнению с опытными группами, получавшими комбикорм с препаратами «Бацелл-М» и «Моноспорин» и контрольной группой. Из лейкоформулы крови было видно, что количество сегментоядерных нейтрофилов у мышей четвертой опытной группы увеличилось на 51%, по сравнению с остальными опытными группами и контрольной группой. Что говорило о воспалительном процессе в организме у животных четвертой опытной группы, получавших комбикорм, пораженный микотоксином ДОН. Гематологические показатели у остальных опытных групп и контрольных животных находились в пределах физиологической нормы.

Использование «Бацелла-М» в рационах поросят и количестве 0,33% увеличило среднесуточный прирост животных на 24,5% в сравнении с «Бацеллом» старого поколения, который также использовали в количестве 0,33% по массе корма.

Затраты кормы на 1кг прироста живой массы составили соответственно групп: 3,39 и 4,20кг.

Таблица 4 - Биохимические показатели крови опытных и контрольных групп мышей

Группа животных Билирубин, ммоль/л Амилаза, ммоль/л Холестерин, ммоль/л Мочевина, ммоль/л Креатинин, ммоль/л
норма до 10 3,2-6,6 1,6-5,0 5,41±12,9 55,8-162,4
1 опытная группа
(n=10)
2,0 3,50±0,29 2,44±0,04 5,8±2,0** 158,30±1,7*
2 опытная группа
(n=10)
4,0 5,7±0,19 4,8±0,17 5,94±0,9** 154,65±1,8*
3 опытная группа
(n=10)
2,0 3,29±0,16 3,1±0,28 5,74±0,2 * 144,5±6,86*
4 опытная группа
(n=10)
2,8 3,85±0,10 2,0±0,23 13,5±0,43* 189,9±3,36*
5 опытная группа
(n=10)
1,0 3,56±0,11 3,5±0,47 7,8±0,29 146,8±6,87
6 опытная группа
(n=10)
4,0 3,33±0,23 3,56±0,22 7,9±0,30 126,6±5,31
контрольнаягруппа
(n=10)
4,2 4,67±0,21 5,0±0,10 6,7±0,24 158,3±7,88

Примечание: *-p<0,05; **-p<0,01.

Таблица 5 - Гематологические показатели крови опытных и контрольных групп мышей

Группа животных Эритро-
циты, 1012
Лейко-
циты, 109
Гемо-
глобин, г/л
Лейкоформула, %
Юные палочко-
ядерные нейтро-
филы
сегменто-
ядерные нейтро-
филы
эозино-
филы
моно-
циты
базо-
филы
лимфо-
циты
норма 5,0-11,0 6,0-13,0 140-180 0 1,0-5,0 18,0-30,0 0,0-4,0 2,0-5,0 0,0-2,0 60-78
1 опытная группа (n=10) 6,44±0,23 6,67±0,23 149,4±2,34 0 1,0 19,9 1,0 0,0 0 79,0
2 опытная группа (n=10) 5,89±0,20 6,80±0,39** 158,6±2,70 0 1,0 19,4** 1,0 0,0 0 78,6
3 опытная группа (n=10) 6,70±0,16 6,0±0,20 150,6±1,90 0 1,0 30,2 0,0 0,0 1 67,8
4 опытная группа (n=10) 5,20±0,20 14,52±0,39** 140,2±1,24 0 2,0 39,9** 0,0 0,0 0 58,1
5 опытная группа (n=10) 5,5±0,20 6,89±0,25** 151,1±1,30 0 1,0 20,2** 1,0 0,0 0 77,8
6 опытная группа (n=10) 6,45±0,20 6,90±0,19 156,6±1,30 0 1,0 21,3 1,0 0,0 0 76,7
контрольная группа (n=10) 6,9±0,18 6,50±0,15 152,2±2,90 0 1,0 20,2 0,0 0,0 0 78,8

Примечание: ** - Р<0,01

Биохимический анализ крови у мышей четвертой опытной группы, корма для которой были поражены микотоксином ДОН, показал, что уровень мочевины увеличился на 37%, а креатинина на 78%, по сравнению с опытными животными, получавшими с пораженными кормами препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» и контрольными животными. Увеличение этих показателей свидетельствует о нарушении белкового обмена, нарушении синтеза протеина, что подтверждается патологией почек у мышей при морфологических исследованиях.

Биохимические показатели опытных групп, получавшими с пораженными кормами препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» были в пределах нормы.

При патологоанатомическом исследовании животных, получавших микотоксин ДОН, отмечали подкожные и внутримышечные кровоизлияния, геморрагическое воспаление слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, гипертрофированные почки.

У опытных групп, получавших пробиотические препараты, патологоанатомических изменений, характерных для микотоксикозов во внутренних органах не выявлено.

Таким образом, при проведении ряда опытов было выяснено, что препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» обладают детоксикационными своиствами. Входящие в состав препаратов «Бацелл-М» и «Моноспорин» бактерии B. subtilis синтезируют ферменты, которые разрушительно воздействуют на различные химические группы молекул микотоксинов. Кроме того, препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» обладают пробиотическими свойствами, что в свою очередь положительно воздействует на естественную резистентность организма животных, нормализует деятельность желудочно-кишечного тракта, стимулирует обменные процессы в организме, повышая усвояемость кормов.

Препараты «Бацелл-М» и «Моноспорин» можно использовать как в профилактических целях против микотоксикозов животных, так и в целях детоксикации кормов пораженных токсичными метаболитами плесневых грибов. При этом препараты технологичны, так «Бацелл-М» достаточно удобно вводить в комбикорма и «Моноспорин» через систему поения.

 

1.2.3. Влияние пробиотических препаратов «Бацелл-М» на снижение уровня микотоксинов в кормах

Исследования корма. Имеющимися в лаборатории ИФА-методом по спецификации с набором R-Biofarm (производство Германия) в кормах, которые используют свиньям в хозяйстве, в одних пробах были обнаружены следы микотоксинов Т2-токсин и микотоксин ДОН, в других пробах превышение допустимого уровня Т-2 токсина - (Приложение 1 и 2). Для доказательства воздействия пробиотика «Бацелл-М» на снижение уровня микотоксинов были проведены исследования in vitro. Моделируя условия нарушения хранения кормов: температура 37°С и 80% влажности в течение 7 суток, и, контролируя уровень микотоксинов каждые 48 часов 3 раза подряд, установили уровень микотоксина Т2-токсин 0,094мг/кг и микотоксина ДОН 0,120мг/кг. Затем к 20г корма добавляли 50мл водного 0,5% раствора соляной кислоты (для создания условий подобных условиям в желудке) и пробиотический препарат «Бацелл-М» 0,2% к сухому корму. В течение 16 часов уровень контролируемых микотоксинов снизился до 0,022 и 0,074мг/кг, то есть на 76 и 38% соответственно. В контроле, где добавляли водный раствор соляной кислоты, но не добавляли пробиотический препарат «Бацелл-М», уровень микотоксинов не снизился.

 

1.2.4. Влияние пробиотических препаратов «Бацелл-М», «Моноспорин» и «Пролам» на снижение уровня микотоксинов у свиноматок

Исследование проводили в ООО «БМК» Богдановчского р-на Свердловской области. Материалом для исследования служили супоросные свиноматки породы ландрас. В первой серии экспериментов проводили скармливание «Бацелл-М» из расчета 2кг на 1 тонну комбикорма и выпаивание «Моноспорина» и «Пролама» из расчета 10мл на 1 голову за 30 дней до опороса по схеме: 10 дней выпаивание 10 дней перерыв через систему поения. Во второй серии экспериментов свиноматкам скармливали «Бацелл-М» в дозировках как в первом исследовании за 45 дней до опороса и «Моноспорин» по схеме: 10 дней выпаивание, 10 дней перерыв и так далее. В кормах определяли микотоксины: зеараленон, афлатоксин, охратоксин, Т2 токсин, ДОН (приложение «Экспертиза»). В таблице 6 и 7 представлены схемы исследований.

Таблица 6 - Схема проведения первого исследования

Группа Схема применения пробиотика Доза пробиотика
Контроль - -
1 опытная За 30 дней до опороса 2кг/т «Бацелл-М»
2 опытная За 30 дней до опороса 10мл на 1гол. «Моноспорин»
3 опытная За 30 дней до опороса 10мл на 1гол. «Пролам»

Таблица 7 - Схема проведения второго исследования

Группа Схема применения пробиотика Доза пробиотика
Контроль - -
1 опытная За 45 дней до опороса 2кг/т «Бацелл-М»
2 опытная За 45 дней до опороса 10мл на 1гол. «Моноспорин»

 

Учитываемые показатели:

    • уровень микотоксинов в кормах по ГОСТ Р 52471-2005 МУ 5-1-14/1001 от 10.10.2005 г.;
    • морфобиохимический анализ крови у свиноматок через 5 дней после опороса;
    • гистологические исследования плаценты у свиноматок;
    • сохранность и приросты живой массы поросят, полученных от свиноматок, которым скармливали и выпаивали до опороса пробиотические препараты.

 

Результаты исследований

Характеристика состояния свиноматок в хозяйстве. В кормах для свиноматок были выделены микотоксины выше допустимых значений: по афлатоксину 0,09мг/кг против 0,05мг/кг (превышение на 80%), по Т2 токсину 0,21мг/кг против 0,1мг/кг (превышение на 110%). Микотоксикозы у свиней проявляются в основном в осенний и зимний период, в этот период проводились исследования. Даже небольшое количество микотоксинов ослабляют иммунную систему свиноматок, снижается репродукция, у свиноматок появляется склонность к заболеваниям из-за ослабления сопротивляемости организма. У свиноматок наблюдались признаки микотоксикозов: вагинит, набухание молочных желез и вульвы, а также опухоли яичников и матки, гибель эмбрионов и снижение веса свиноматок. У свиноматок наблюдалась атония матки, растягивание родов до 8 дней, у свиноматок, которые абортировали, наблюдалась гибель и мумификация плодов, задержание последа до 20 дней и выделения из влагалища гнойной жидкости. Многие свиноматки не могли забеременеть. При вскрытии павших свиноматок фиксировали отек подслизистого слоя матки и многочисленные кисты в яичниках и слизистой оболочки матки.

Исследования крови. Результаты анализов крови показали, что пробиотические препараты в опытных группах способствовали нормализации уровня гемоглобина, а в контрольной группе уровень гемоглобина был выше нормативных значений. В опытных группах наблюдалось повышение уровня лейкоцитов и лимфоцитов, что свидетельствует о повышении резистентности организма. Так, уровень Т- и В-лимфоцитов был выше на 3,35 - 26,86%% в опытных группах при использовании пробиотиков, по сравнению с контрольными значениями. Фагоцитарная активность в контроле была выше, чем в опытных группах на 3,67 - 0,75%%. Достоверно выше был уровень палочковидных нейтрофилов и ближе к нормативным значениям в опытных группах при использовании пробиотиков, чем в контроле, такая же картина наблюдалась и по уровню моноцитов.

В целом можно отметить, что при использовании пробиотических препаратов происходил процесс нормализации и активизации иммунных процессов в организме свиноматок.

Были проведены биохимические исследования крови свиноматок, которые представлены в таблицах 8 и 9.

Таблица 8 - Биохимические показатели крови свиноматок, получавших пробиотики за 30 дней до опороса, n=32

Показатель Группы  
1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная Норматив
Общий белок, г/л 79,34±2,92 73,63±0,69 71,95±3,77 76,47±4,75 57,0-79,0
Альбумины, г/л 44,12±1,41 44,83±0,68 41,80±0,96 44,00±1,50 25,0-38,0
Глюкоза, ммоль/л 5,88±0,72 5,63±0,99 4,55±0,93 7,43±0,58 3,6-6,3
Мочевина ммоль/л 3,04±0,33 3,08±0,38 3,45±0,59 3,03±0,56 3,7-8,8
Холестерин, ммоль/л 1,48±0,10 1,48±0,18 1,20±0,19 1,37±0,03 1,8-3,7
Креатинин, мкмоль/л 71,48±8,41 62,18±9,42 77,00±15,99 73,83±12,41 77,0-175,0
Магний, ммоль/л 1,04±0,04 1,08±0,13 1,43±0,28 1,47±0,07 0,7-1,1
Кальций, ммоль/л 2,60±0,04 2,70±0,04 2,05±0,09 2,60±0,06 2,6-3,3
Фосфор, ммоль/л 2,08±0,08 2,85±0,69 1,83±0,09 2,20±0,21 0,7-1,7
Железо, мкмоль/л 30,52±1,33 38,18±1,88 40,20±2,45 40,03±4,97 16,0-36,0
Калий, ммоль/л 7,16±0,32 6,70±0,15 7,15±0,35 7,50±0,40 4,9-7,1
Хлориды, ммоль/л 99,34±1,68 99,58±1,06 108,13±0,81 103,60±1,65 88,0-107,0
Щелочная фосфатаза, U/л 51,17±7,86 59,25±3,71 88,00±14,93 62,00±13,00 70,0-227,0
Медь, мкмоль/л 18,36±0,57 20,48±5,56 12,83±1,99 18,60±1,31 11,0-47,0
Цинк, мкмоль/л 12,30±1,83 15,05±1,17 13,30±1,40 16,30±0,50 8,0-35,0
AST, ед./л 82,76±20,43 52,43±16,69 44,38±11,50 43,63±5,02 9,0-113,0
ALT, Ед./л 39,36±8,68 42,08±11,17 26,23±7,77 23,63±0,88 32,0-84,0
Креатинкиназа, Ед./л 1173,88±334,28 513,13±132,60 525,74±144,58 453,70±217,94 34,0-166,0
ЛДГ, Ед./л 794,34±171,59 540,03±103,99 711,08±36,95 500,53 ± 68,57 309,0-938,0
Амилаза, Ед/л 1419,22 ± 79,80 1183,28±213,34 1804,65±315,41 1385,23 ± 242,63 47,0-188,0
Кислая фосфатаза Ед/л 2,80 ±0,37 3,60 ± 0,63 3,38 ± 1,52 3,10 ± 0,31 0,0-6,5
Триглицериды, ммоль/л 0,46 ± 0,08 0,38 ± 0,06 0,15 ± 0,05 0,63 ± 0,24 0,22-1,28
Общий билирубин, мкмоль/л 0,70±0,51 0,45±0,45 0,55±0,43 0,43±0,43 1,7-3,4
СК-МВ, Ед/л 174,82±31,81 96,18±10,43 94,50±9,52 85,57±11,47 11,5-55,5
Холинэстераза, Ед/л 691,42±62,59 859,5±71,47 945,45±119,41 834,03±165,17 1000,0-2000,0
Липаза, Ед/л 21,04±8,93 8,50±2,13 9,25±4,70 6,40±2,00 0,0-83,0

Таблица 9 - Биохимические показатели крови свиноматок, получавших пробиотики за 45 дней до опороса, n=24

Показатель Группы Норматив
1 опытная 2 опытная контрольная
Общий белок, г/л 71,03±3,64 65,95±2,98 67,17±6,20 57,0-79,0
Альбумины, г/л 43,68±1,16 43,40±1,61 39,63±4,28 25,0-38,0
Глюкоза, ммоль/л 4,85±0,34 5,55±0,90 5,00±0,55 3,6-6,3
Мочевина ммоль/л 3,53±0,87 2,25±0,17 3,70±0,93 3,7-8,8
Холестерин, ммоль/л 0,85±0,16 0,90±0,07 1,50±0,21 1,8-3,7
Креатинин, мкмоль/л 105,08±26,69 120,25±7,96 112,77±14,17 77,0-175,0
Магний, ммоль/л 1,33±0,30 1,25±0,35 1,43±0,24 0,7-1,1
Кальций, ммоль/л 2,18±0,09 1,98±0,06 2,13±0,03 2,6-3,3
Фосфор, ммоль/л 1,90±0,04 2,00±0,09 2,73±0,58 0,7-1,7
Железо, мкмоль/л 38,33±3,56 43,95±4,19 33,77±1,98 16,0-36,0
Калий, ммоль/л 7,15±0,32 7,23±0,19 5,33±1,09 4,9-7,1
Натрий, ммоль/л 165,33±3,35 152,23±6,57 152,63±1,13 133,0-147,0
Хлориды,ммоль/л 109,85±2,80 108,13±2,71 108,27±2,70 88,0-107,0
Щелочная фосфатаза,
U/л
41,50±8,21 56,25±4,50 110,67±47,90 70,0-227,0
Медь, мкмоль/л 13,73±0,77 14,18±2,06 15,60±1,59 11,0-47,0
Цинк, мкмоль/л 11,4±0,94 15,48±2,78 11,40±1,19 8,0-35,0
AST, ед./л 36,70±4,82 41,78±7,91 41,83±2,02 9,0-113,0
ALT, Ед./л 18,65±5,71 26,00±4,75 44,53±3,32 32,0-84,0
ГГТ, Ед/л 18,78±5,80 15,58±6,95 26,23±3,20 2,7-22,0
ЛДГ, Ед./л 594,23±59,70 826,70±102,96 664,87±43,38 309,0-938,0
Амилаза, Ед/л 1843,80±258,03 994,15±239,89 1965,03±298,97 47,0-188,0
Кислая фосфатаза
Ед/л
3,78±0,14 4,08±1,06 5,27±1,62 0,0-6,5
Триглицериды,
ммоль/л
0,2±0,08 0,20±0,07 0,30±0,06 0,22-1,28
Общий билирубин,
мкмоль/л
0,23±0,23 2,83±1,36 0,13±0,13 1,7-3,4
СК-МВ, Ед/л 89,75±5,63 96,28±21,33 163,40±9,64 11,5-55,5
Холинэстераза, Ед/л 806,98±62,08 845,1±44,37 935,90±135,51 1000,0-2000,0
Липаза, Ед/л 4,08±2,53 11,13±7,69 18,80±4,39 0,0-83,0

Биохимический анализ крови по данным таблицы 8 и 9 показал, что основная масса показателей находиться в пределах нормативных или контрольных значений в опытных группах, где свиноматкам давали пробиотические препараты за 30-45 дней до опороса. По отдельным показателям отмечается тенденция изменения показателей, однако четкой закономерности не установлено.

Нужно отметить, что в сложной системе мать-плод в последний период супоросности происходит стабилизация и нормализация сложных биохимических процессов в зависимости от условий содержания и уровня кормления, генотипа. Эти факторы стабилизации оказываются более сильными, чем воздействие продуктов жизнедеятельности вводимых микроорганизмов на биохимические процессы. Так, отмечено закономерное повышение или понижение значения отдельных показателей, как в контрольных, так и в опытных группах одновременно, в отличие от нормативных значений.

Зоотехнические показатели. В 30 дневном возрасте была рассчитана сохранность и среднесуточный прирост поросят-сосунов от свиноматок, которым скармливали пробиотики до опороса (таблица 10).

Таблица 10 - Показатели сохранности и прироста живой массы поросят в возрасте 30 дней, n=616

Группа Период применения пробиотиков Сохранность
%
Среднесуточный прирост, кг
Первое исследование
Поросята от свиноматок контрольной группы - 83,3±1,87 0,131±0,01
Поросята от свиноматок 1 опытной группы «Бацелл-М» за 30 дней до опороса 92,46±2,21 0,155±0,01
Поросята от свиноматок 2 опытной группы «Моноспорин» за 30 дней до опороса 98,33±1,67 0,193±0,01
Поросята от свиноматок 3 опытной группы «Пролам» за 30 дней до опороса 100,00±0 0,152±0,01
Второе исследование
Поросята от свиноматок контрольной группы - 86,98±1,85 0,145±0,01
Поросята от свиноматок 1 опытной группы «Бацелл-М» за 45 дней до опороса 91,96±2,03 0,149±0,01
Поросята от свиноматок 2 опытной группы «Моноспорин» за 45 дней до опороса 96,02±2,10 0,154±0,01

По данным таблицы 10 в группах поросят от свиноматок, которые получали пробиотические препараты, была выше сохранность на 9-16% в первом исследовании и на 5-10% во втором исследовании.

Среднесуточные приросты живой массы были соответственно выше на 16-47% в первом исследовании и на 2,8-6,2% во втором исследовании.

Гистологические исследования плаценты свиноматок (по 3 головы из каждой группы) показали, что плацента свиноматок, получающих «Бацелл-М» была в пределах гистологической нормы. Ворсинки хориона и эпителий распределены не равномерно: эпителий высокий с хорошо выраженными ядрами и зернами хроматина в них (рис. 4). Стенки кровеносных сосудов собственной пластинки разрыхлены. Клеточный состав их в состоянии пролиферации (рис. 5).

Рис.4. Гиперемия капилляров ворсинок хориона. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 4 - Гиперемия капилляров ворсинок хориона.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Рис.5. Разрыхление собственной пластинки плаценты. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 5 - Разрыхление собственной пластинки плаценты.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Между ворсинками хориона встречаются разрозненные сгустки фибриноида и сеточки фибрина (рис. 6). В некоторых участках эпителия хориона ярко выраженная вакуольная дистрофия и некроз эпителия (рис.7).

Рис.6. Сеточка фибрина в собственной пластинке (↓) и наличие фибриноида в межворсинчатом пространстве. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 6 - Сеточка фибрина в собственной пластинке (↓)
и наличие фибриноида в межворсинчатом пространстве.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Рис.7. Вакуольная дистрофия и некроз эпителия ворсинок хориона. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 7 - Вакуольная дистрофия и некроз эпителия ворсинок хориона.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Кровеносные сосуды среднего калибра содержат эритроциты, находящиеся в состоянии распада (рис.8) Строма ворсинок разрыхлена, что характерно для отпадающей плаценты (рис.9).

Рис.8. Гиперемия кровеносных сосудов разного калибра и сложирование эритроцитов в них.<br/> Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 8 - Гиперемия кровеносных сосудов разного калибра
и сложирование эритроцитов в них.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Рис.9. Разрыхление стромы ворсинок хориона (признак старения плаценты). <br />Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 9 - Разрыхление стромы ворсинок хориона (признак старения плаценты).
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Плацента свиноматки, получающей «Моноспорин» была в пределах гистологической нормы. В плаценте имеют место участки разрастания молодой грануляционной ткани, в которой замурованы ворсины хориона (рис.10). Микроциркуляторное русло ворсин в состоянии гиперемии (рис.11).

Рис.10. Продуктивный плацентит с атрофией ворсин хориона. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×20

Рисунок 10 - Продуктивный плацентит с атрофией ворсин хориона.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×20

 

 

Рис.11. Гиперемия микроциркуляторного русла ворсин хориона. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 11 - Гиперемия микроциркуляторного русла ворсин хориона.
Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

 

 

Строма ворсин более плотная, огрубевшая. В собственной пластинке наблюдается наличие макрофагов с пенистой цитоплазмой и четко выраженным ядром в состоянии некробиоза (рис.12).

Плацента свиноматки, получающей «Пролам». Рисунок ворсин хориона выражен. Кровеносные сосуды собственной пластинки резко кровенаполнены. В них наблюдается гемолиз эритроцитов с выпадением пигмента гемосидерина, в самой пластинке - выпадение липофусцина, что свидетельствует о раннем изнашивании плаценты (рис.13).

Рис.12. Активная макрофагальная реакция собственной пластинки плаценты. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 12 - Активная макрофагальная реакция собственной пластинки плаценты.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Рис. 13. Гиперемия кровеносных сосудов и разрыхление ткани плаценты. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 13 - Гиперемия кровеносных сосудов и разрыхление ткани плаценты.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40

 

 

Плацента свиноматки контрольной группы. Патологические изменения. В концевых отделах ворсинок эпителий истончен, без ядер, атрофирован (плацентарная недостаточность) (рис.14). В собственной пластинке наличие макрофагов, нагруженных гемосидерином (рис.15).

Рис.14. Атрофия эпителия ворсин хориона, истончение ворсин, характерное для плацентарной недостаточности. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40.

Рисунок 14 - Атрофия эпителия ворсин хориона,
истончение ворсин, характерное для плацентарной недостаточности.
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40.

 

 

Рис.15. Гемосидероз макрофагов собственной пластинке плаценты (признак анемии). Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 18×40

Рисунок 15 - Гемосидероз макрофагов собственной
пластинке плаценты (признак анемии).
Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 18×40.

 

 

Анализ состояния плаценты свиноматок по гистлогическим срезам, получающих «Бацелл-М», «Моноспорин» и «Пролам», свидетельствует о том, что плацента находиться в основном в пределах гистологической нормы. В контрольной группе, отмечен целый ряд патологий плаценты: изнашивание, преждевременное старение, разрыхление плаценты; атрофия эпителия ворсинок; распад эритроцитов, плацентарная недостаточность, нарушение кровоснабжение плаценты. Всё это свидетельствует о том, что в контрольной группе при обнаружении афлатоксина и Т-2 токсина организме супоросных свиноматок происходит ряд патологических изменений, связанных с нарушением обмена веществ и ухудшением состояния здоровья организма: токсикоз, повышение артериального давления, отеки, распад гемоглобина с образованием оксида железа.

 

Заключение

Наиболее часто обнаруживаемые в кормах средней полосы России микотоксины трихотеценовой группы Т-2 токсин и микотоксин ДОН (вомитоксин) не способны связываться и удерживаться сорбентами, изготовленными как на основе алюмосиликатов, так и на основе бентонитов или цеолитов. Эти препараты вносят в корма, где они моментально инактивируются самим кормом, который выступает в качестве конкурента за присоединение микотоксинов. Входящие в состав комбикорма зерно, корма животного происхождения и минеральное сырье являются конкурентными сорбентами микотоксинов вследствие наличия клетчатки, полисахаридов, белков, а также благодаря существенному превышению любого фирменного сорбента по массе и наличию кислото-связывающей способности. Возможность сорбировать микотоксины у сорбирующих препаратов есть только в проксимальном отделе кишечника после расщепления корма в процессе переваривания. Однако смена кислой среды в желудке на слабощелочную в кишечнике приводит к потере большинством сорбентов способности удерживать токсины и они также поступают в кровь. Включенные в состав некоторых комплексных препаратов ферменты, расщепляющие специфические функциональные группы у неполярных токсинов (например, 12,13-эпокси группу у трихотеценовых токсинов), вводятся в состав комбикорма в очень небольших количествах и вместе с ним поступают в желудок. Компоненты комбикорма, значительно превышающие по массе как микотоксин, так и инактивирующий его фермент, создадут физико-химическое препятствие для их взаимодействия. Таким образом, сорбирующие препараты в тех небольших концентрациях, которые предлагается вводить в корма с целью профилактики микотоксикозов (0,25-0,5%) не способны существенно уменьшить содержание неполярных микотоксинов (10).

 

Выводы

Под воздействием пробиотических препаратов Бацелл-М, Моноспорин и Пролам произошла трансформация микотоксинов, такие же данные получены украинскими учеными (17). Использование пробиотических препаратов свиноматкам во вторую половину супоросности или в третий последний период супоросности позволяет не только нормализовать биохимические процессы в организме, но и повысить иммунитет. Эта закономерность передается плоду. Поросята, рожденные от свиноматок, которым давали с кормом и питьем пробиотические препараты обладают высокой скоростью роста по сравнению с общепринятыми системами содержания свиноматок, так приросты живой массы выше на 16-47% и 3-6% в первом и втором исследовании, а сохранность на 9-16% и 5-10% соответственно. У свиноматок, получающих пробиотики, наблюдались нормальные роды, быстрое восстановление без патологических отклонений.

 

Рекомендации производству

Для повышения сохранности и прироста живой массы поросят, сохранения здоровья свиноматок, снижения воздействия микотоксинов на организм рекомендуем новую схему с применением пробиотиков для супоросных свиноматок.

Схема применения пробиотиков для супоросных свиноматок

Физиологический период свиноматок Традиционная схема Новая схема с применением пробиотиков
«Бацелл-М» «Моноспорин» «Пролам»
Свиноматки за 30 дней до опороса - скармливание 0,2% к массе комбикорма ежедневно до опороса 10мл/гол по схеме:
10 дней выпаивание
10 дней перерыв
10мл/гол по схеме:
10 дней выпаивание
10 дней перерыв
Свиноматки за 45 дней до опороса -

 

Экономическая эффективность

При использовании пробиотического препарата «Бацелл-М», «Моноспорин» и «Пролам» для снижения действия микотоксинов для свиноматок до опороса прибыль за счет сохранности поросят составляет 6-10руб. соответственно на 1 рубль затрат на пробиотики.

 

Список использованных источников

1. Антипов, В. А. Микотоксикозы - важная проблема животноводства / В. А. Антипов, В. Ф. Васильев, Т. Г. Кутищева // Ветеринария. - 2007. - № 11. - С.7 - 9.

2. Бекесова, Т. Как защитить корма от плесени / Т. Бекесова // Био. - 2003. - № 8. - С.11-12.

3. Бурдов, Л.Г. О результатах анализа кормов на содержание микотоксинов / Л. Г. Бурдов, Л. Е. Матросова // Ветеринарный врач. - 2011. - № 2. - С.7 - 9

4. Бурдов, Н. Г. Загрязнённость кормов микотоксинами грибов рода фузариум и возможности их нейтрализации / Н. Г. Бурдов, Е. И. Марасинская, Л. В. Фролова // Ветеринарный врач. - 2007. - № 3. - С.34-36.

5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / под ред. А. А. Воробьёва. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. - 704 с.

6. Методические указания по экспресс-определению микотоксинов в зерне, кормах и компонентов для их производства. - Введ. 2005-10-10. - М.: Изд-во стандартов, 2005. - 24 с.

7. Донник, И. М. Разработка регламента проведения оценки качества сырья и кормов для с.х. животных и птицы. Научные рекомендации / И. А. Шкуратова, И. Ю. Вершинина - Екатеринбург.: ООО «Ира УТК», 2008. - 182 с.

8. Доминов, Р. Р. Применение энтеросорбента «Полисорб ВП» в птицеводстве / Р. Р. Доминов // Био. - 2003. - № 4 (31). - С. 7-9.

9. Иванов, А. В. Актуальные проблемы профилактики микотоксикозов / А. В. Иванов, М. Я. Тремасов, М. Г. Нуртдинов // Ветеринарный врач. - 2008. - № 2. - С.2 - 3.

10. Иванов, А. В. Микотоксикозы животных (этиология, диагностика, лечение, профилактика) / А. В. Иванов, М. Я. Тремасов, К. Х. Папуниди - М.: Колос, 2008. -177 с.

11. Кононенко, Г. П. Система микотоксикологического контроля объектов ветеринарно-санитарного и экологического надзора / Г. П. Кононенко // Автореф. дисс. канд. вет. наук. - М., 2005. - 48 с.

12. Микотоксины и микотоксикозы / под ред. Д. Диаза. - М.: Печатный Город, 2006. - 376 с.

13. Папуниди, Э. К. Ветеринарно-санитарная оценка продуктов животноводства при сочетанном воздействии пиретройда и микотоксина / Э. К. Папуниди [и др.]. // Ветеринарный врач. - 2007. - № 1. - С.8-10.

13. Петрович, С. В. Микотоксикозы животных / С. В. Петрович. - М.: Росагропромиздат, 1991. - 238 с.

14. Профилактика кормовых отравлений и микотоксикозов сельскохозяйственных животных. Рекомендации./ Н. А. Солдатенко [и др.] - Новочеркасск.: Издательство «ЦВВР», 2008. - 16 с.

15. Профилактика микотоксикозов животных / Б. Н. Хмелёвский [и др.]. - М.: Аграпромиздат, 1985. - 270 с.

16. Микотоксины - скрытая опасность в кормах / Н. А. Солдатенко [и др.] // Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчёл. - М., 2008. - С.356-361.

17. Труфанов О. В. Современные методы обеззараживания зерна и комбикормов, контаминированных микотоксинами // Ефективні корми та годівля. - 2007. - № 4. - 17-21.

18. Тремасов, М. Я. Профилактика микотоксикозов животных в Республике Марии Эл / М. Я. Тремасов // Ветеринария. - 2005. - № 1. - С.6 - 7.

19. Тутельян, В. А. Микотоксины. Медицинские и биологические аспекты / В. А. Тутельян, Л. В. Кравченко. - М.: Медицина, 1985. - 139 с.

20. Хусяинов, Р. Х. Микотоксикозы птиц / Р. Х. Хусяинов, Ф. Л. Радун // Международный московский конгресс по болезням мелких домашних животных. - М., 2004. - С. 135-136.

Наверх